PGC-1基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病的相关性研究

用聚合酶链反应限制性片断长度多态性(PCRRFLP)的方法检测2型糖尿病病人(n=266)和非糖尿病病人(n=297)的PGC1基因Gly482Ser多态性。结果显示PGC1基因与2型糖尿病的遗传易感性不相关。

失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因表达改变及意义

目的探讨失血性休克大鼠肠上皮细胞核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1(PGC-1)基因表达的改变,以探讨核转录因子对编码呼吸链亚基的细胞核基因组和线粒体基因组表达的影响。方法采用转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因mRNA量的改变,用Western-blot法检测肠上皮细胞PGC-1蛋白的表达变化。结果正常大鼠肠上皮细胞PGC-1 mRNA有较低程度表达,失血性休克1小时大鼠肠上皮细胞PGC-1 mRNA表达开始增加,2小时达高峰并维持到3小时,后又开始减弱,到休克晚期5小时PGC-1mRNA表达显著弱于休克前(P<0.05)。正常大鼠肠上皮细胞PGC-1蛋白含量较低。失血性休克1小时大鼠肠上皮细胞PGC-1蛋白含量基本没有变化。失血性休克2小时,即休克中期PGC-1蛋白表达增强,后又渐减弱,失血性休克5小时已明显弱于休克前。结论失血性休克早期大鼠肠上皮细胞核转录因子PGC-1基因表达增强,晚期减弱,PGC-1基因表达对缺血缺氧敏感,缺血缺氧早期肠上皮细胞PGC-1蛋白表达上调,可能与PGC-1 mRNA的上调有关。休克晚期PGC-1蛋白表达减少可能与线粒体能量代谢障碍时细胞蛋白合成减少有关。

Rg_1对失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因表达的影响

目的探讨Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因表达的影响,以从基因调控水平探讨Rg1对失血性休克时肠上皮细胞线粒体缺血缺氧性损伤的保护作用。方法用RT-PCR方法观察失血性休克大鼠肠上皮细胞PGC-1基因mRNA量的改变,用Western-blot法检测肠上皮细胞PGC-1蛋白的表达变化。结果失血性休克5 hPGC-1 mRNA表达明显降低(P<0.05),复苏后3 h组其表达量仍低于休克前水平,但较失血性休克组表达有所增强。复苏加Rg1治疗3 h后PGC-1 mRNA明显呈较高水平表达。复苏加SB202190及复苏加茴香霉素对PGC-1mRNA几乎无调节作用;Rg1在SB202190存在时,仍微弱上调PGC-1 mRNA表达,Rg1能增强茴香霉素上调PGC-1mRNA的作用。失血性休克5 h大鼠肠上皮细胞PGC-1蛋白表达量明显降低,复苏加Rg1能上调PGC-1蛋白表达,复苏加SB202190或茴香霉素对PGC-1蛋白表达调节作用较弱。Rg1在SB202190存在时,微弱上调PGC-1蛋白表达,但Rg1和茴香霉素同时作用时蛋白表达量明显增加。结论复苏加Rg1可明显上调PGC-1 mRNA及其蛋白表达。提示PGC-1 mRNA上调可以促进PGC-1蛋白表达,PGC-1蛋白合成在转录后水平的调节非常重要。

我国特有三个小型猪品系PGC-1基因外显子8的多态性分析

目的分析我国特有的三个小型猪品系巴马小型猪、中国农大小型猪、五指山小型猪过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同激活子1基因第8外显子的单核苷酸多态性(SNPs)分布特点,为我国小型猪在糖尿病和代谢性疾病研究中提供基础资料。方法以三个品系小型猪基因组DNA为模板,应用特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化测序,进行BLAST比对分析。结果测序结果表明在小型猪PGC-1基因外显子8有5个单核苷酸多态性位点为:Ala354Val(450C→T),Gly363Gly(478C→T),Arg369Arg(494C→A),Leu570Leu(913G→A),Ser551Ser(1039A→G),其中,只有45O位C→T的杂合突变导致了编码氨基酸的改变。结论小型猪品种不同PGC-1基因外显子8的多态性分布有很大差异。

我国特有的三个小型猪品系PGC-1基因外显子8的多态性分析

目的分析我国特有的三个小型猪品系:巴马小型猪、中国农大小型猪、五指山小型猪过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同激活子1基因第8外显子的单核苷酸多态性(SNPs)分布特点,为我国小型猪在糖尿病和代谢性疾病研究中提供基础资料。方法以三个品系小型猪基因组DNA为模板,应用特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化测序,进行BLAST比对分析。结果测序结果表明在小型猪PGC-1基因外显子8有5个单核苷酸多态性位点为:Ala354Val(450C→T),Gly363Gly(478C→T),Arg369Arg(494C→A),Leu570Leu(913G→A),Ser551Ser(1039A→G),其中,只有45O位C→T的杂合突变导致了编码氨基酸的改变。结论小型猪品种不同PGC-1基因外显子8的多态性分布有很大差异。

PGC-1基因Ser74Leu、IVS2+52C>A多态与2型糖尿病的相关性研究

目的探索中国延边朝鲜族、汉族人群的PGC-1基因Ser74Leu、IVS2+52C>A多态与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)确定PGC-1基因的第2外显子及第2内含子的Ser74Leu、IVS2+52C>A多态位点的基因型,比较等位基因频率及基因型频率在民族之间差异。结果1.朝鲜族和汉族的T2DM、NGT组间的PGC-1基因Ser74Leu(C>A)、IVS2+52(C>A)两个等位基因三种单体型的频率分布比较未见差异(P=0.178,P=0.671);2.T2DM组中,朝鲜族表型为CC-CA/CC-AA的腰臀比(WHR)水平较表型为CC-CC的高(P=0.030),汉族表型为CC-CA/CC-AA的空腹血糖(FPG)水平高于表型为CC-CC(P=0.005)。结论PGC-1基因可能是中国延边朝鲜族和汉族2型糖尿病的发病的易感基因。

PGC-1基因和2型糖尿病

PGC-1 过氧化物酶增殖体受体r辅活化因子(PGC-1)是核受体PPARr的一种转录辅活化因子，在能量代谢、肝脏、肌肉、组织的糖代谢中有重要作用。在糖尿病(DM)和肥胖发生、发展中有重要作用。

我国特有三个小型猪品系PGC-1基因内含子8、9的多态性分析

目的分析我国特有的三个小型猪品系巴马小型猪、中国农大小型猪、五指山小型猪,过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同激活子1基因intron8-exon10序列单核苷酸多态性(SNPs)分布特点,为我国小型猪在糖尿病和代谢性疾病研究中提供基础资料。方法以三个品系小型猪基因组DNA为模板,应用特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化测序,进行BLAST比对分析。结果在PGC-1基因intron8-exon10这段扩增序列上存在7个单核苷酸多态位点,分别为:1534C→G,1546G→A,1589位插入T,1648C→T,1 653位插入A,1 660位插入G或T,1 830G→A,这些多态位点均位于非编码区,其中,有三个位点发生了单碱基的插入。结论小型猪品种不同多态位点分布有很大差异。

PGC-1基因Gly482Ser多态与心肌梗死的相关研究

目的:旨在探讨过氧化物酶增殖物激活受体-γ共激活蛋白-1(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator-1,PGC-1)基因Gly482Ser多态与心肌梗死发生的相关性。方法:随机选取内蒙古地区汉族人255例,其中对照组134例,心肌梗死组121例。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)进行基因型检测,并用直接测序法加以证实。结果:PGC-1基因Gly482Ser多态GG、GA、AA基因型频率在对照组分别为0.455、0.388、0.157,在病例组分别为0.099、0.843、0.058(P<0.01),GG vs.GA+AA,P<0.01),等位基因频率分布有明显差异(P=0.003);GA/AA基因型的心梗患者,其血清总胆固醇(TC)水平较GG基因型者明显升高(P<0.05)。结论:PGC-1基因Gly482Ser变异与心梗的发病危险显著相关。

清远麻鸡PGC-1α基因多态性与肉质性状的相关性分析

PGC-1α基因是影响肉品质的关键基因,因此对清远麻鸡PGC-1α基因的多态性进行了研究,希望找出对肉品质有较大影响的突变位点,为下一步进行蛋白质功能验证打下基础。利用PCR-SSCP和PCR-LDR方法找出清远麻鸡PGC-1α基因的多态性位点,将所测得的肉品质指标脂肪含量、剪切力和胸肌失水率按照不同基因型进行方差分析与多重比较,分析不同基因型对肉品质的影响。筛查出了清远麻鸡的两个多态性位点SNP1和SNP2,均为G到A的突变。其中SNP1为内含子的突变,SNP2为外显子8上的有义突变。SNP1对肉品质没有显著影响,SNP2对胸肌系水力有显著影响。母鸡的肉品质要高于公鸡的,其中剪切力指标性别之间差异极显著。至于SNP2,AG型的肉品质要好于AA型和GG型的。

PGC-1α基因在两种类型鸡骨骼肌间的表达差异

为了检测过氧化物体增殖物激活受体γ辅激活因子1-α(PGC-1α)基因mRNA在鸡骨骼肌组织中的分布以及在速生型隐性白羽鸡和慢生型清远麻鸡品种间的表达差异,采集不同周龄(0、2、4、6、8、10、12)隐性白羽鸡和清远麻鸡的胸肌和腓肠肌组织样,提取总RNA,以β-actin基因为内参基因,进行实时荧光定量PCR。对PGC-1α基因mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算PGC-1α基因mRNA在不同骨骼肌组织以及速生型和慢生型鸡品种间的表达量。发现PGC-1α基因在鸡骨骼肌组织不同发育阶段广泛表达,在初生时表达量最高,并显著高于其他各周龄的表达量;相同周龄时,慢生型清远麻鸡骨骼肌中PGC-1α表达量大多高于速生型隐性白羽鸡。表明不同类型鸡骨骼肌PGC-1α mRNA表达具有特定的发育模式,并可能与鸡肉品质存在关联。

广西巴马小型猪PGC-1α基因克隆与组织表达分析

目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中的表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391 bp,编码796个氨基酸,与参考序列的同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

新生儿PGC-1α基因Gly482Ser多态性与产妇妊娠期糖尿病的关系

目的：探讨新生儿过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α（PGC-1α）基因Gly482Ser多态性与妊娠期糖尿病（GDM）的关系。方法：选取在我院住院的50例GDM产妇分娩的新生儿作为实验组以及50例正常产妇分娩的新生儿作为对照组,采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术,检测新生儿PGC-1α基因Gly482Ser多态性情况以及该多态性与产妇GDM的关系。结果：（1）实验组与对照组新生儿PGC-1α基因Gly482Ser多态性及等位基因的分布情况比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）分娩GG基因型或GA基因型新生儿的产妇患GDM的风险是分娩新生儿为AA基因型的产妇的3.20倍（95%CI=1.172~8.735）。结论：尚不能表明GDM产妇所分娩新生儿的PGC-1α基因Gly482Ser多态性与正常产妇分娩的新生儿有差异,但通过研究发现新生儿的PGC-1α基因型为AA可能是产妇患GDM的保护因素之一。

PGC-1α基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的了解云南省昆明地区PGC-1α基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病的相关性.方法采集430例2型糖尿病患者(T2DM)和431例OGTT正常的健康志愿者(NGT)的血样,提取基因组DNA.应用高分辨率熔解曲线方法 (HRM)分析PGC-1α基因Gly482Ser基因型,观察T2DM人群中基因型和等位基因的分布情况.结果 PGC-1α基因Gly482Ser AA基因型及G等位基因在T2DM组中的频率分别为0.209和0.587,在NGT组中为0.139和0.651,2组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 PGC-1α基因Gly482Ser多态性与云南省昆明地区2型糖尿病相关.

中国汉族人群PGC-1α基因Thr394Thr和Gly482Ser变异在2型糖尿病家系中传递的不平衡分析

目的了解中国汉族人群PGC-1α基因Thr394Thr和Gly482Ser变异与2型糖尿病的相关关系。方法招募350名中国南方汉族2型糖尿病先证者及其一级亲属，抽提外周血DNA。应用聚合酶链反应邛艮制性片段长度多态性（PCR—RFLP）分析和DNA直接测序技术鉴定PGC-1α基因型。基于2型糖尿病家系，采用单倍型相对危险度分析（HRR）和传递不平衡检验（TDT）方法分析Thr394Thr和Gly482Ser变异及其单倍型与2型糖尿病的关系。结果基于2型糖尿病家系的HRR分析显示，PGC-1α基因482Ser（A）等位基因更多向子代传递（x2=7．2170，P=0．0072，HRR=1．4496），而Thr394Thr（G／A）等位基因在传递与未传递两组间分布频率差异无统计学意义（x2=2．9557，P=0．0856，HRR=0．7638）。TDT分析提示，394Thr（A）-482Ser（A）单倍型在两组问分布差异有统计学意义（x2=33．160，P=0．002），且与2型糖尿病呈连锁不平衡关系（X2=4．6841，P=0．0292）。结论394A--482A联合变异可能增加了中国人患糖尿病的风险。

PGC-1α基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病前期的相关性研究

目的了解云南省昆明地区PGC-1α基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病前期的相关性。方法采集361例糖尿病前期人群(IGR)、430例2型糖尿病患者(T2DM)和446例OGTT正常的健康志愿者(NGT)的血样,提取基因组DNA。应用高分辨率熔解曲线分析方法检测PGC-1α基因Gly482Ser基因型,观察三组人群中基因型和等位基因的分布情况,同时分析糖尿病前期不同基因型人群的临床变量的差异性。结果 (1)PGC-1α基因Gly482Ser AA基因型及G等位基因在T2DM组中的频率分别为0.209和0.587,在IGR组中为0.152和0.640,差异均无统计学意义(P>0.05);A等位基因在T2DM组中为0.413,在IGR组中为0.360,两组之间差异具有显著性意义(P=0.032)。(2)IGR组PGC-1α基因482位点GG基因型和GA+AA基因型的表型间的BMI、TC、HDL-C和LDL-C比较差异无统计学意义(P>0.05)。IGR组空腹血糖受损人群(IFG)GG基因型和GA+AA基因型的临床变量差异均无统计学意义(P>0.05)。在糖耐量受损(IGT)人群,含A的基因型(GA+AA)表现出更高的餐后血糖(PBG)水平,且具有统计学差异(P=0.027),而BMI、TC、HDL-C和LDL-C水平在GA基因型和GA+AA基因型之间均无显著性差异(P>0.05)。结论云南省昆明地区PGC-1α基因Gly482Ser多态性与糖尿病前期密切相关,可以推测含有A等位基因的糖尿病前期人群更易合并餐后高血糖,更易进展为T2DM。

PGC-1及其基因多态性与胰岛素抵抗

过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子-1(PGC-1)与胰岛素抵抗(IR)形成密切相关。PGC-1可加速肝脏糖异生进程,诱发肝内IR,同时又可通过影响胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)引起胰岛β细胞IR。另一方面,PGC-1表达增加可减少骨骼肌脂肪比重,增加有氧肌肉类型和胰岛素敏感性,从而减轻骨骼肌IR。PGC-1基因Gly482Ser多态性与IR显著相关,在2型糖尿病患者中,携带Ser/Ser基因型者较携带Gly/Gly基因型者具有更高的空腹胰岛素浓度和IR指数;携带Gly/Gly基因型的正常糖耐量者,较Ser/Ser基因型携带者表现为更低的胰岛素分泌。

中国上海地区汉族人PGC-1α基因多态性与2型糖尿病相关性研究

目的研究过氧化物酶增殖激活受体γ共激活子1α(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγcoactivator1α,PGC1α)基因单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)与2型糖尿病(type2diabetesmellitus,T2DM)的关联性。方法应用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术,选择PGC1α基因4个常见SNPs位点:Thr394Thr(ACG→ACA)、Gly482Ser(GGT→AGT)、Thr612Met(ACG→ATG)和IVS2+52C→A,对69个T2DM家系(310例)进行基因分型,并用传递不平衡检验(transmissiondisequilibriumtest,TDT)和同胞传递不平衡检验(sibtransmissiondisequilibrium,STDT)进行分析。用同样方法在无家族史的156例T2DM患者及111名糖耐量正常者中进行病例对照关联分析,检验Gly482Ser多态性在散发人群中的分布。结果(1)经TDTSTDT检验,未发现单个PGC1α基因SNPs位点在T2DM患病子代中优势传递;(2)在病例对照关联分析中,Gly482Ser位点多态性在两组人群的分布差异有统计学意义,携带者GA基因型罹患T2DM的危险性可增加1.85倍,且等位基因在两组人群的分布差异有统计学意义(P=0.046);(3)在无家族史的糖耐量正常者中,Gly482Ser位点的GG基因型的高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平与GA+AA基因型比较,差异有统计学意义(分别为P=0.043,P=0.046,P=0.037)。结论PGC1α基因Gly482Ser多态性可能与T2DM的易感性相关。