归脾安神颗粒对失眠模型大鼠PGD2表达的影响

目的运用中医辨证论治,对疾病进行整体分析并作理论指导,探讨归脾安神颗粒治疗失眠的临床疗效,更进一步的深入了解归脾安神颗粒发挥药效的具体作用机制。方法选用清洁的wistar大鼠,并经过处理后制成失眠大鼠模型,然后将失眠大鼠模型随机分成失眠模型组、归脾安神颗粒低、中、高3个剂量组、阳性对照(枣仁安神胶囊)组,并设置空白对照组,各18只。观察戊巴比妥钠翻正实验对大鼠睡眠潜伏期及睡眠总时间的影响。采用酶联免疫法观察激素PGD2的含量,采用荧光定量PCR检测PGD2 mRNA、L-PGDS mRNA、DPR mRNA的表达。结果归脾安神颗粒可增加失眠大鼠模型的总睡眠时间,并且可以提高失眠模型大鼠下丘脑PGD2含量及PGD2 mRNA、L-PGDS mRNA、DPR mRNA的表达的作用。结论归脾安神颗粒能够改善失眠模型大鼠的睡眠,延长总的睡眠时间。药效发挥机理基本确认为通过干预失眠模型大鼠下丘脑激素而发挥改善睡眠的作用。

PGD2-DP1受体途径在人腹主动脉瘤形成中的作用

目的了解前列腺素D2（prostaglandin D2，PGD2）-DPI受体途径相关的酶前列腺素G／H合成酶（cyclooxygenase，COX）-1、COX-2和脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶（lipocalin—type prostagladin Dsynthase，L—PGDS）及DPI受体在人腹主动脉瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）组织中的表达定位，分析其与人AAA直径及破裂的相关性，探讨PGD2-DPI受体途径对人AAA的血管平滑肌细胞表型变异及炎性细胞趋化的影响。方法采用免疫组化及免疫荧光染色方法，检测已破裂、未破裂AAA组织和正常胸内动脉组织COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达，利用RT—PCR方法检测人AAA组织中COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体mRNA表达，使用Westernblot方法检测L—PGDS及DPI受体蛋白的表达，结合临床资料记录的AAA直径和是否破裂进行相关性分析。结果COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达于人AAA组织的结构性细胞和炎性细胞，L—PGDS的表达量与AAA的直径和破裂呈负相关，COX-2的表达量与AAA的直径呈正相关。结论人AAA中存在PGD2-DPI受体途径相关的酶及受体表达，且COX-2的表达量与AAA直径相关，L—PGDS表达量与AAA直径和破裂相关。

载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2(PGE_2)和前列腺素D_2(PGD_2)

目的探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin typeprostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2(PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用之间的关系。方法采用MTT法确定合适的给药浓度。用不同浓度(0、12.5、25、50、100和200μg/mL)apoA-Ⅰ处理体外培养的THP-1细胞源性巨噬细胞24 h后,逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测L-PGDS mRNA表达的变化,酶联免疫测定法(ELISA)检测PGE2和PGD2蛋白表达的变化。结果 apoA-Ⅰ处理24 h的巨噬细胞中L-PGDS mRNA、PGE2和PGD2蛋白的表达均显著高于未用apoA-Ⅰ处理的巨噬细胞(P均<0.001);apoA-Ⅰ浓度为50μg/mL时,作用效果最明显。结论 apoA-Ⅰ的抗AS作用可能与上调THP-1细胞源性巨噬细胞中L-PGDS mRNA以及PGE2和PGD2蛋白的表达有关。

民猪PGD和LDHA基因的表达与冷诱导研究

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是戊糖代谢途径中的一个关键酶,乳酸脱氢酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)是动物体内参与糖酵解的重要酶类之一。为了探讨PGD和LDHA基因在民猪抵御寒冷气候的过程中是否起着一定的生物学作用,研究采用RT-PCR和Real-time PCR的方法,分析了这2个基因在民猪大肠,腿肌、肺、脂肪、心脏、脾脏和肝脏的表达情况以及冷诱导后在腿肌的表达变化情况。结果表明,PGD基因在所检的7个组织内均高水平表达,冷诱导后表达水平显著上升(P<0.05),LDHA基因在所检的7个组织中也均有表达,冷诱导后表达水平出现显著下降(P<0.05)。

γ-PGA降解酶系基因pgdS和ggt的克隆及生物信息分析

以实验菌株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 115基因组为模板,通过PCR技术成功克隆到γ-聚谷氨酸降解酶系基因pgd S和ggt,并进行测序,利用Ex PASy-Prot Param tool、Server 3.0 Signal P、TMHMM Server和Tmpred、PSORTB、Predict Protein、Swiss-Model Workspace软件,分别对蛋白质的理化性质、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、二级结构、三维结构建模进行了分析和预测。结果表明:pgd S和ggt基因分别含1242个和1764个核苷酸,分别编码414个和588个氨基酸。Pgd S和GGT均为稳定型亲水性蛋白,都存在信号肽,其亚细胞分别定位于胞壁和胞外。GGT在N端存在一个强跨膜区。二级结构分析显示,Pgd S和GGT两种蛋白都以L(环)为主,分别占53.27%和52.47%。通过对γ-PGA降解酶系蛋白结构的分析,为日后有效控制γ-PGA合成及相关研究提供参考和理论依据。

应用G6PD/6PGD比值法检测育龄夫妇6-磷酸葡萄糖脱氢酶

目的 了解佛山地区育龄夫妇的 6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏症的发生率。方法 应用 G6PD/6PGD比值法检测 80 5 7例育龄夫妇的 G6PD缺乏。结果 40 0 8例男性受检者中 ,G6PD缺乏的 2 2 7例 ,40 4 9例女性受检者中检出 1 46例 ,检出率分别是 5 .66%和 3.5 7% ,总检出率为 4.63%。结论 佛山地区G6PD缺乏症有较高的发生率。在育龄夫妇中进行 G6PD缺乏症的筛查 ,并及早采取措施 ,是减轻新生儿病理性黄疸发生率和核黄疸发生率的有效途径。比值法简单、快速、较准确 ,是

PGD血小板细菌污染检测系统效果的评价

目的评价PGD检测系统用于混合血小板制品细菌污染检测的效果。方法分别将配制后经浓缩血小板稀释为101、103和105CFU/ml的大肠埃希菌和表皮葡萄球菌菌悬液进行PGD检测限的评估;将上述菌株分别接种于浓缩血小板中制成菌液浓度为101、103CFU/ml的模拟细菌污染浓缩血小板,经22℃振荡保存24、72、120 h后分别用PGD法和Bact/ALERT法进行细菌检测,比较2种方法的细菌污染检测限和阳性反应时间。结果 PGD法对大肠埃希菌的检测限为105CFU/ml,表皮葡萄球菌为103CFU/ml;将103CFU/ml的大肠埃希菌和表皮葡萄球菌分别接种到浓缩血小板,24 h后PGD检测均为阴性,72 h后均为阳性,而Bact/ALERT法检测在10 h均呈阳性反应;将105CFU/ml的大肠埃希菌和表皮葡萄球菌接种浓缩血小板4 h后PGD检测均为阳性,Bact/ALERT法在3—6 h内均呈阳性反应。结论 PGD检测系统对血小板细菌污染的检测限为(103—105)CFU/ml,适用于医院输血部门在血小板输血前的快速细菌检测。

G6PD/6PGD比值法和高铁血红蛋白还原试验检测G6PD缺陷症的比较

广东省是地中海贫血(地贫)和G6PD缺陷症的高发区,地贫和G6PD缺陷症的发生率分别是9.54%和10%,因此,地贫复合G6PD缺陷的患者在临床上并不少见,为求较准确的实验诊断,我室用G6PD/6PGD比值法和高铁血红蛋白还原试验(改良法)(MetHbRT)同时检测965例并进行比较。

121个染色体平衡易位携带者PGD周期COH的卵巢反应性分析

目的:探讨常染色体平衡易位对女性携带者控制性超促排卵(COH)中卵巢反应性的影响。方法:回顾分析于我院行胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的109对常染色体平衡易位夫妇,共121个周期,其中夫妇中仅女方为平衡易位携带者56例(63个周期,研究组),包括罗伯逊易位携带者23例(27个周期),相互易位携带者33例(36个周期);夫妇中仅男方为平衡易位携带者53例(58个周期,对照组),包括罗伯逊易位携带者30例(32个周期),相互易位携带者23例(26个周期)。分析COH过程中,研究组和对照组的女方卵巢反应性指标和妊娠结局。结果:两组的女方年龄、体重指数(BMI)、基础内分泌及窦卵泡数(AFC)均无显著差异(P>0.05)。两组的卵巢反应性指标,包括Gn总量、HCG注射日E2水平、获卵数、D3胚胎数、可移植胚胎数及移植胚胎数,以及移植周期临床妊娠率、早期流产率及种植率均无显著差异(P>0.05)。单独就罗伯逊易位携带者或相互易位携带者而言,两组的各指标均无显著差异。排除可能影响COH卵巢反应性的女方因素,研究组与对照组的各指标均无显著差异。结论:染色体平衡易位,包括罗伯逊易位或相互易位并不影响COH中的卵巢反应性。应将染色体平衡易位女性携带者视为正常卵巢反应性,采用合适剂量的促性腺激素进行控制性促排卵。

用非放射性原位杂交技术定位家猪PGD和HSL基因

用地高辛为标记物，以随机引物法标记猪ＰＧＤｃＤＮＡ和ＨＳＬｃＤＮＡ探针，经与半微量全血培养法制备的染色体进行原位杂交后，将猪ＰＧＤ和ＨＳＬ基因分别定位在猪６号染色体６ｑ２５和６ｃｅｎ－６ｑ２１区域。

NBT纸片定性法与G6PD/6PGD比值法在大样本G6PD缺陷症筛查中的联合应用

目的:探讨联合应用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)四氮唑蓝(NBT)纸片定性法与G6PD/6PGD比值定量法在大样本筛查中的可行性。方法:用NBT纸片定性法对501例贵州省江口县土家族、525例从江县侗族、586例荔波县瑶族共1612例成人进行定性初筛,再用G6PD/6PGD比值法对初筛阳性样本定量复查。结果:NBT纸片定性法共初筛出G6PD缺陷患者129例,G6PD/G6PD比值法确诊G6PD缺陷123例,2种方法的符合率高达95.35%。结论:对大样本G6PD缺陷症的筛查,先用NBT纸片定性法进行初筛,再用G6PD/6PGD比值法复查确诊,2法联合应用可以提高G6PD缺陷症检出率和节约大量经费和时间。

应用G6PD／6PGD比值法检测云南勐腊县6－磷酸脱氢酶缺乏症的基因频率

采用Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ法对云南勐腊县１２３例随机采集的男性血液标本进行了红细胞６－磷酸脱氢酶缺陷的基因频率检测。先用四氮唑蓝纸片法筛选疑诊病例，对筛选出的病例进一步应用四氮唑蓝定量测定法测定Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值。结果在检测的１２３人中，Ｇ６ＰＤ缺乏者２０人，即在此人群中Ｇ６ＰＤ缺乏的基因频率为０．１６２６，仍属国内Ｇ６ＰＤ缺陷高发地区，但显著低于过去报道的０．６６９。以前国内多数实验室均采用高铁血红蛋白还原试验来进行筛选，由于只能间接测定酶的活性，很易造成假阳性，致报告发病率偏高。木研究使用的四氮唑蓝法特异性比较高，结果较可靠。

PGD2/DP信号级联调控哮喘气道炎症及重构的研究进展

炎症细胞、炎症介质和细胞因子的相互作用以及气道平滑肌的结构功能异常构成了哮喘的主要发病机制。新近研究发现,脂质体前列腺素D2(PGD2)是重要的促炎因子,它不仅诱发支气管的强烈收缩还能增加血管的通透性,同时也调节成纤维细胞的形成和转化,参与气道重构,在哮喘的发生发展中发挥重要的作用。PGD2通过激活它的两种受体(DP1和CRTH2)而发挥不同的生物学效应。本文就目前PGD2/DP信号级联在哮喘气道炎症及重构中的研究进展进行综述,进一步阐述哮喘发病的分子机制。

G6PD试纸法与G6PD/6PGD比值法的对照研究

目的 通过G6PD试纸法与G6PD/ 6PGD比值法的对比 ,探讨应用G6PD试纸法的可行性。方法 同时用G6PD试纸法与G6PD/ 6PGD比值法对 115名广东籍儿童进行G6PD缺乏定性检查 ,观察两种方法的优缺点。结果 本组病例G6PD缺乏症患者的检出率 ,两种方法的符合率 10 0 % ,而杂合子的诊断G6PD试纸法可提供 ,G6PD/ 6PGD比值法未能提供。结论 G6PD试纸法使用方便简单 ,快速 ,且可以检出杂合子 ,尤其适合普查及不易抽静脉血的新生儿 ,婴幼儿及危重病人。

红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶缺乏症检测的G6PD/6PGD比值法

红细胞萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的检测,目前国内外已建立和推荐了十余种方法。这些方法大致可分为定性和定量两类。前者适用于群体筛查;后者适用于临床确诊、变异型鉴定及群体筛查出可疑者的确认。由于G6PD杂合子的表现度范围很广,可以表现为G6PD活性接近正常或正常,故检测特别困难。除组织化学法外,其他方法都不敏感。而各组织化学方法都比较繁琐,特别是在群体中进行杂合子筛查时不适用。然而对于预防G6PD缺乏所致新生儿黄疸来说,从孕妇中早期查出杂合子是预防的关键之一。为此,我们建立了一种G6PD/6PGD比值法,配合高铁血红蛋白还原试验（MHb法）,进行群体筛查取得了较好效果,提高了杂合子检出率。现将此法介绍如下。

无偶氮黑色皮革染料PGD的染色技术

本文阐述了国产无偶氮黑色染料ＰＧＤ－ １５０ 和ＰＧＤ－ １６０ 的染色性能，提出了皮革黑工艺和技术要点，直接给出了染料的应用效果。

高铁血红蛋白还原试验和G6PD/6PGD比值法检测中国南方新生儿的G6PD缺陷症的比较

中国南方的广东省是红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷症的高发区，发生率高达10％。为提高检测G6PD缺陷症方法的准确性，我们对152名新生儿进行了高铁血红蛋白还原试验(MetHbRT)和红细胞G6PD／6PGD酶活性直接测定比值法检测G6PD缺陷症，报告如下。

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的伦理思考

针对现在研究者往往关注胚胎的生理质量而忽视伦理选择的现象,用伦理的视角审视实施胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的行为,赋予生命科学行为必要的伦理思想。综合各种理论流派的观点,结合临床工作,得出人们在伦理道德上比较容易接受PGD中进行胚胎的优选的结论,用以指导PGD的发展。

PGD_2调控TGF-β_1/Smads在支气管哮喘中的实验研究

目的观察PGD2对小鼠肺成纤维细胞生物学特性的影响,利用其受体特异性抑制剂Laropiprant调控TGF-β1/Smads在支气管哮喘中的研究。方法根据Laropiprant的浓度将细胞分组,每组分别加入TGF-β2(2.5 ng/m L)培养24 h后用Laropiprant刺激24 h,分别用PCR法、WB法检测细胞TGF-β1、smad3和smad4的表达。采用不同浓度的Laropiprant作用于细胞不同时间,通过MTT法检测Laropiprant对细胞生长的抑制作用。结果随着Laropiprant的浓度增加,细胞中TGF-β1、smad3及smad4的m RNA和蛋白的表达呈下降趋势,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的Laropiprant作用于细胞不同时间后,其抑制率随浓度增高和作用时间增长呈下降趋势。结论 L-929小鼠肺成纤维细胞的中PGD2-DP1的表达可能与TGF-β1/Smads的调节相关。Laropiprant作用于细胞后,其抑制率随浓度增高和作用时间增长呈下降趋势。