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PGM-CSF对手工克隆猪生产效率的影响
1
作者
栾婧
窦红伟
+6 位作者
刘田宾
向熙
李林
徐颖
杨文献
郑华
夏代刚
《畜牧与兽医》
北大核心
2015年第4期20-24,共5页
为了优化猪的手工克隆技术方案,从而提高猪手工克隆效率,通过比较不同浓度(2和10 ng/m L)的猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(PGM-CSF)对孤雌胚胎和克隆胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响,并将PGM-CSF处理过的手工克隆囊胚进行移植,比...
为了优化猪的手工克隆技术方案,从而提高猪手工克隆效率,通过比较不同浓度(2和10 ng/m L)的猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(PGM-CSF)对孤雌胚胎和克隆胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响,并将PGM-CSF处理过的手工克隆囊胚进行移植,比较对照组和试验组的妊娠率、产仔率及克隆整体效率。结果显示:用10 ng/m L PGM-CSF处理重构胚后,试验组胚胎细胞数统计略高于对照组((47.74±3.88)vs(43.69±3.72)),囊胚率高于对照组((39.10±0.01)%vs(36.27±0.02)%),但差异均不显著(P>0.05);试验组10只受体中有5只怀孕且分娩,而对照组10只受体只有1只怀孕且分娩;试验组出生仔猪存活率略高于对照组(36.36%vs 30.00%),克隆总效率略高于对照组(0.37%vs 0.30%),但没有显著差异(P>0.05)。综上所述,PGM-CSF有利于提高猪手工克隆胚胎整体发育能力,有提高猪手工克隆对受体的利用率的潜在可能性。
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关键词
pgm-csf
手工克隆
体细胞核移植
猪
原文传递
猪Ⅱ型圆环病毒ORF2与猪GM-CSF基因重组腺病毒共表达及免疫效果分析
2
作者
陈降华
刘忠华
李文平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期124-128,共5页
旨在构建含融合基因pGMCSF-ORF2的重组腺病毒,并对其表达水平和免疫效果进行分析。运用PCR方法扩增PCV2ORF2和pGM-CSF基因,拼接后克隆入pMD18-T载体,然后再亚克隆入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,阳性穿梭质粒经PmeⅠ酶线性化后电转化...
旨在构建含融合基因pGMCSF-ORF2的重组腺病毒,并对其表达水平和免疫效果进行分析。运用PCR方法扩增PCV2ORF2和pGM-CSF基因,拼接后克隆入pMD18-T载体,然后再亚克隆入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,阳性穿梭质粒经PmeⅠ酶线性化后电转化含腺病毒基因组(AdEasy-1)的大肠杆菌细胞BJ5183-Ad-1,成功获得了重组腺病毒DNA。将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD293细胞,经过病毒基因组的PCR和转录水平的RT-PCR及Westernblot等方面对融合蛋白的表达进行了鉴定。以该病毒免疫Babl/c小白鼠,对免疫小鼠血清中PCV2抗体进行检测。结果显示,获得了pGMCSF-ORF2重组基因,重组腺病毒载体构建成功,获得了表达pGMCSF-ORF2融合蛋白的重组腺病毒。该病毒免疫小鼠后,在小鼠血清中检测到了PCV2的特异性抗体。获得的重组腺病毒能有效表达pGMCSF-ORF2融合蛋白,且可诱导小鼠产生针对PCV2的特异性抗体。
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关键词
猪Ⅱ型圆环病毒ORF2
pGM—CSF
重组腺病毒共表达免疫效果
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职称材料
题名
PGM-CSF对手工克隆猪生产效率的影响
1
作者
栾婧
窦红伟
刘田宾
向熙
李林
徐颖
杨文献
郑华
夏代刚
机构
深圳华大方舟生物技术有限公司
深圳市农牧实业有限公司
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2015年第4期20-24,共5页
基金
深圳市战略性新兴产业发展专项资金(JCYJ20120830105157538)
深圳市生物
+3 种基金
互联网
新能源
新材料产业发展专项资金(CYC201105250009A)
深圳市海外高层次人才创新创业专项资金(KQC201109050086A)
文摘
为了优化猪的手工克隆技术方案,从而提高猪手工克隆效率,通过比较不同浓度(2和10 ng/m L)的猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(PGM-CSF)对孤雌胚胎和克隆胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响,并将PGM-CSF处理过的手工克隆囊胚进行移植,比较对照组和试验组的妊娠率、产仔率及克隆整体效率。结果显示:用10 ng/m L PGM-CSF处理重构胚后,试验组胚胎细胞数统计略高于对照组((47.74±3.88)vs(43.69±3.72)),囊胚率高于对照组((39.10±0.01)%vs(36.27±0.02)%),但差异均不显著(P>0.05);试验组10只受体中有5只怀孕且分娩,而对照组10只受体只有1只怀孕且分娩;试验组出生仔猪存活率略高于对照组(36.36%vs 30.00%),克隆总效率略高于对照组(0.37%vs 0.30%),但没有显著差异(P>0.05)。综上所述,PGM-CSF有利于提高猪手工克隆胚胎整体发育能力,有提高猪手工克隆对受体的利用率的潜在可能性。
关键词
pgm-csf
手工克隆
体细胞核移植
猪
Keywords
pgm-csf
hand-made clone
SCNT
pig
分类号
Q813.7 [生物学—生物工程]
S814 [农业科学—畜牧学]
原文传递
题名
猪Ⅱ型圆环病毒ORF2与猪GM-CSF基因重组腺病毒共表达及免疫效果分析
2
作者
陈降华
刘忠华
李文平
机构
湖南农业大学动物医学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期124-128,共5页
文摘
旨在构建含融合基因pGMCSF-ORF2的重组腺病毒,并对其表达水平和免疫效果进行分析。运用PCR方法扩增PCV2ORF2和pGM-CSF基因,拼接后克隆入pMD18-T载体,然后再亚克隆入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,阳性穿梭质粒经PmeⅠ酶线性化后电转化含腺病毒基因组(AdEasy-1)的大肠杆菌细胞BJ5183-Ad-1,成功获得了重组腺病毒DNA。将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD293细胞,经过病毒基因组的PCR和转录水平的RT-PCR及Westernblot等方面对融合蛋白的表达进行了鉴定。以该病毒免疫Babl/c小白鼠,对免疫小鼠血清中PCV2抗体进行检测。结果显示,获得了pGMCSF-ORF2重组基因,重组腺病毒载体构建成功,获得了表达pGMCSF-ORF2融合蛋白的重组腺病毒。该病毒免疫小鼠后,在小鼠血清中检测到了PCV2的特异性抗体。获得的重组腺病毒能有效表达pGMCSF-ORF2融合蛋白,且可诱导小鼠产生针对PCV2的特异性抗体。
关键词
猪Ⅱ型圆环病毒ORF2
pGM—CSF
重组腺病毒共表达免疫效果
Keywords
PCV20RF2
pgm-csf
Recombinant adenovirus Co-expression Immunogenicity
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PGM-CSF对手工克隆猪生产效率的影响
栾婧
窦红伟
刘田宾
向熙
李林
徐颖
杨文献
郑华
夏代刚
《畜牧与兽医》
北大核心
2015
0
原文传递
2
猪Ⅱ型圆环病毒ORF2与猪GM-CSF基因重组腺病毒共表达及免疫效果分析
陈降华
刘忠华
李文平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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