凤尾草提取物通过调控lncRNA PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭

目的探讨凤尾草提取物通过调控lncRNA PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭。方法凤尾草提取物(20、40、80μg/mL)处理肝癌细胞HCC920448 h,将si-NC、si-PGM5-AS1分别转染至细胞HCC9204中再用20μg/mL凤尾草提取物处理48 h。Western blot检测Cyclin D1、p21、E-cadherin、MMP-2蛋白表达;MTT检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;RT-PCR检测PGM5-AS1表达。结果凤尾草提取物(20、40、80μg/mL)抑制肝癌细胞HCC9204中Cyclin D1、MMP-2表达,促进p21、E-cadherin表达,细降低胞存活率,降低细胞迁移和侵袭数量,促进PGM5-AS1表达(P<0.05)。过表达PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。抑制PGM5-AS1逆转了凤尾草提取物对细胞HCC9204增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论凤尾草提取物可能通过上调PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

长链非编码RNA PGM5-AS1在非小细胞肺癌中表达及分子机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PGM5-AS1在非小细胞肺癌中的表达及其作用机制。方法采用实时定量PCR检测26例肺鳞癌和28例肺腺癌的癌组织与正常组织中PGM5-AS1的表达,并利用软琼脂克隆增殖实验检测过表达PGM5-AS1后肺癌细胞的增殖能力。结果 TCGA数据库中PGM5-AS1在肺鳞癌和肺腺癌中表达均较正常组织下调(t分别=3.43、6.27,P均<0.05)。在本次研究肺癌标本库中,无论肺鳞癌还是肺腺癌的癌组织中的PGM5-AS1表达均较正常组织明显下调(t分别=23.72、27.45,P均<0.05)。过表达PGM5-AS1后,H520(PGM5-AS1)及H2170(PGM5-AS1)较对照细胞的细胞集落数明显减少(t分别=8.22、8.19,P均<0.05)。结论 lncRNA PGM5-AS1在肺癌中表达下降,可能通过抑制细胞增殖来发挥抑癌功能。

长链非编码RNA PGM5-AS1在结直肠癌中的临床意义及功能研究

目的探讨长链非编码RNA PGM5-AS1在结直肠癌组织中的表达情况及其对结直肠癌细胞增殖、迁移的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测24例结直肠癌组及癌旁组、正常人结直肠上皮细胞系NCM460及结直肠癌细胞系SW480、HCT116、Lovo中PGM5-AS1 mRNA的表达。体外构建PGM5-AS1过表达载体,转染结直肠癌细胞SW480、HCT116,构建PGM5-AS1过表达细胞模型,采用荧光定量PCR、CCK-8、细胞划痕实验检测PGM5-AS1水平、增殖活力、划痕愈合率。结果相比癌旁组织,PGM5-AS1在结直肠癌组织中表达降低(t=11.41,P<0.05)。3种结直肠癌细胞系(SW480、HCT116、Lovo)PGM5-AS1的表达较NCM460细胞低(t分别=6.76、7.28、9.47,P均<0.05)。HCT116、SW480细胞中,过表达组的PGM5-AS1 mRNA相对表达量高于空载组(t分别=5.72、3.47,P均<0.05)。过表达组转染48 h、72 h、96 h后的细胞增殖活力低于对照组和空载组(t分别=11.72、13.64;7.47、9.67;9.28、7.41,P均<0.05);过表达组的划痕愈合率低于对照组和空载组,差异有统计学意义(t分别=7.73、5.26,P均<0.05)。结论结直肠癌细胞中PGM5-AS1表达降低,上调PGM5-AS1水平可抑制细胞增殖、迁移能力,可能通过抑制细胞增殖来发挥抑癌功能,成为结直肠癌治疗的潜在靶点。

PGM5-AS1对食管癌细胞侵袭、迁移和Wnt信号通路的影响

目的探讨PGM5反义RNA 1(PGM5-AS1)对食管癌细胞侵袭、迁移和Wnt信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测人食管上皮细胞HET-1A和食管癌细胞(TE-1、KYSE150、KYSE450和EC-109)的PGM5-AS1水平;体外向EC-109细胞转染PGM5-AS1过表达载体(过表达组)或空载体pcDNA3.1(空载组),并设未转染的细胞为对照组。采用QPCR、MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测PGM5-AS1水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测Wnt1和β-连环蛋白(β-catenin)水平。结果食管癌细胞的PGM5-AS1水平低于HET-1A细胞(P<0.05);过表达组EC-109细胞的PGM5-AS1水平为19.772±1.980,高于对照组的1.067±0.059和空载组的0.923±0.087(P<0.05);过表达组转染48、72 h后的细胞增殖活力低于其余两组(P<0.05);过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(24.854±2.290)%和(60.539±26.577)个,低于对照组的(59.381±4.790)%和(165.421±22.082)个及空载组的(61.266±3.325)%和(157.758±22.462)个,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和空载组相比,过表达组的Wnt1和β-catenin水平降低(P<0.05)。对照组和空载组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌细胞中PGM5-AS1表达降低并发挥抑癌基因的作用,上调PGM5-AS1水平可抑制增殖、迁移和侵袭能力,可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路来发挥作用,有望成为食管癌治疗的潜在靶点。

PGM5-AS1抑制miR-4728-5p对宫颈癌细胞侵袭、转移的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)葡萄糖磷酸变位酶样蛋白5反义(PGM5-AS)1对微小RNA(miRNA)-4728-5p的靶向调控及对宫颈癌细胞侵袭、转移的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中PGM5-AS1表达。在宫颈癌SiHa细胞中转染pcDNA3.1-PGM5-AS1或anti-miR-4728-5p。采用噻唑蓝(MTT)法检测SiHa细胞的增殖,平板克隆形成实验分析细胞的克隆形成,Transwell小室法评估细胞的侵袭迁移,Western印迹测定细胞中细胞增殖抗原Ki67、E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达。生物信息学预测与双荧光素酶报告实验验证PGM5-AS1对miR-4728-5p的靶向调控。qRT-PCR检测miR-4728-5p的表达。结果 宫颈癌组织中PGM5-AS1的表达量明显减少(P<0.05)。转染pcDNA3.1-PGM5-AS1显著降低SiHa细胞的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67和N-cadherin蛋白水平,并明显提高E-cadherin蛋白水平(P<0.05)。PGM5-AS1靶向抑制miR-4728-5p的表达。转染anti-miR-4728-5p明显减少SiHa细胞的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67和N-cadherin蛋白表达量,而显著增加高E-cadherin蛋白表达量(P<0.05)。结论 PGM5-AS1通过靶向miR-4728-5p,抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭、转移。