pH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白1与喉鳞癌转移的相关性及作用机制研究

目的观察PHLPP1与喉鳞癌的相互作用,为寻找新的诊治靶点提供数据支撑。方法以80例喉鳞癌患者为研究对象,包括转移组30例和未转移组50例,采用免疫蛋白印记(WB)实验检测PHLPP1蛋白表达水平。并通过RNA干扰实验构建PHLPP1过表达和干扰重组慢病毒载体,分别转染至HEP-2细胞共培养,观察细胞生长、迁移与侵袭能力,采用荧光定量PCR实验和WB实验测定细胞PHLPP1和P-AKT/AKT表达水平。结果转移组PHLPP1蛋白表达水平低于未转移组,未转移组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PHLPP1过表达组细胞生长速率、迁移和侵袭数目低于对照组,而PHLPP1沉默组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PHLPP1过表达组P-AKT/AKT mRNA与蛋白表达水平低于对照组,而PHLPP1沉默组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PHLPP1与喉鳞癌的发生与转移密切相关,可抑制喉鳞癌细胞的增殖与侵袭能力,且其作用可能与阻碍AKT磷酸化激活有关。

PHLPP与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制研究

目的探讨PH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白(PHLPP)与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制。方法采用回顾性研究方法,选取2016年7月至2022年7月在河北工程大学附属医院治疗的89例喉鳞状细胞癌患者病灶标本,同时选取病灶周边正常组织作为对照。采用免疫组织化学法检测PHLPP蛋白表达;同时选取喉鳞状细胞癌HEP-2细胞株,随机分为PHLPP沉默组、PHLPP过表达组和空白对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖,采用Transwell小室试验检测各组细胞迁移和侵袭,采用蛋白质印迹法检测各组PHLPP、BAX、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果喉鳞状细胞癌组织PHLPP蛋白阳性表达率为38.20%,明显低于正常组织(95.51%),差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、有远端转移的患者PHLPP蛋白阳性表达率分别为20.59%、17.50%、0,均显著低于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、无远端转移(79.41%、82.50%、100.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显高于PHLPP过表达组和空白对照组;PHLPP过表达组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞迁移和侵袭数均明显高于PHLPP过表达组和空白对照组(P<0.05);而PHLPP过表达组细细胞迁移和侵袭数均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP过表达组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显高于PHLPP沉默组和空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显低于PHLPP沉默组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);PHLPP沉默组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显低于空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论喉鳞状细胞癌组织PHLPP表达下调,与临床分期、淋巴结转移和远处转移有关;调控PHLPP表达对癌细胞增殖、迁移和侵袭有所影响,可能与调控BAX、PI3K和p-AKT蛋白有关。