Circ-CDYL通过miR-223-3p/PHF19轴调节多发性骨髓瘤对硼替佐米的敏感性

目的 探讨环状RNA Circ-CDYL调节多发性骨髓瘤(MM)对硼替佐米(BTZ)的敏感性,以及对miR-223-3p/PHD锌指蛋白19(PHF19)轴的影响。方法 收集盐城市第三人民医院118例MM患者血清标本,其中60例患者未接受任何化疗(BTZ敏感组),58例患者接受BTZ治疗并产生化疗耐药性(BTZ耐药组),比较两组Circ-CDYL及miR-223-3p、PHF19的表达情况。将MM1.R细胞根据细胞转染情况分为C组、sh-Circ-C组、sh-Circ-CDYL组、sh-Circ-CDYL+anti-miR-223-3p组和sh-Circ-CDYL+pcDNA-PHF19组,对5组细胞进行相应转染。采用荧光定量PCR(RT-qPCR)测定Circ-CDYL、miR-223-3p和PHF19 mRNA水平,CCK-8法测定MM1.R细胞活性。采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,采用免疫印迹法(Western blotting)检测凋亡蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67、剪切化半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶3(C-caspase 3)]及PHF19蛋白的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验检测Circ-CDYL与miR-223-3p/PHF19的靶向关系。结果 Circ-CDYL和PHF19在BTZ耐药组患者血清标本和MM1.R细胞中均呈高表达(P<0.05),miR-223-3p呈低表达(P<0.05)。下调Circ-CDYL表达下调Circ-CDYL表达可明显降低MM1.R细胞对BTZ的半数抑制浓度(IC_(50)),抑制增殖活力,使凋亡蛋白PCNA、Ki67表达水平均下调,细胞凋亡率、C-caspase 3蛋白表达水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。抑制miR-223-3p或过表达PHF19可部分逆转敲低Circ-CDYL后的MM1.R细胞对BTZ敏感性(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-223-3p可抑制Circ-CDYL、PHF19的表达,Circ-CDYL、PHF19是miR-223-3p的靶基因。结论 敲低Circ-CDYL可通过miR-223-3p/PHF19轴而提高MM1.R细胞对BTZ的敏感性。