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大肠杆菌pheA基因在黄色短杆菌中的克隆与表达 被引量:6
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作者 雷呈祥 范长胜 +3 位作者 黄伟达 沈水源 严维耀 郑兆鑫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期184-189,共6页
在大肠杆菌中,影响苯丙氨酸生物合成的关键酶基因之一是pheA基因。利用大肠杆菌棒状杆菌穿梭表达载体pLCX36克隆了一个对反馈抑制不敏感的大肠杆菌基因pheA,组建成质粒pLCX37。pLCX37以接合转移方法转移到... 在大肠杆菌中,影响苯丙氨酸生物合成的关键酶基因之一是pheA基因。利用大肠杆菌棒状杆菌穿梭表达载体pLCX36克隆了一个对反馈抑制不敏感的大肠杆菌基因pheA,组建成质粒pLCX37。pLCX37以接合转移方法转移到抗氟代苯丙氨酸的黄色短杆菌3621等菌株中,获得若干基因工程菌株。经发酵测定,编号为362109的黄色短杆菌的苯丙氨酸产量比出发菌3621高出1倍。最高达2626mg/ml。 展开更多
关键词 phea基因 苯丙氨酸生产 黄色短杆菌 氨基酸基因工程
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成纤维细胞在壳聚糖/PHEA水凝胶膜上的粘附与生长行为 被引量:1
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作者 朱爱萍 王石泉 +4 位作者 成大明 陈强 刘崇江 沈健 林思聪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期109-111,共3页
The chitosan/PHEA-blended hydrogels were prepared from PHEA and chitosan in various blend ratios.The water contents of the hydrogels were in the range of 50%~80%(wt).The attachment and growth of fibroblast cells(L929... The chitosan/PHEA-blended hydrogels were prepared from PHEA and chitosan in various blend ratios.The water contents of the hydrogels were in the range of 50%~80%(wt).The attachment and growth of fibroblast cells(L929) on the hydrogels were studied.The results indicated the PHEA content in hydrogels has great effect on cell attachment but has little effect on the growth of L929 cells. 展开更多
关键词 成纤维细胞 壳聚糖/phea水凝胶膜 粘附 生长行为 组织工程 细胞培养
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PAN–b–PHEA和PAN–b–P(HEA–g–AEFC)与复合固体推进剂组分的表界面性能 被引量:2
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作者 周宏玉 张教强 +2 位作者 豆荣荣 石绘敏 康拴艳 《化学推进剂与高分子材料》 CAS 2016年第3期53-56,共4页
采用动态接触角表面张力仪,研究了PAN–b–PHEA(PAN为聚丙烯腈,HEA为2–羟乙基丙烯酸酯)和PAN–b–P(HEA–g–AEFC)(AEFC为二茂铁甲酸(2–丙烯酰氧乙基)酯)键合剂与不同固体填料(黑索今(RDX)、奥克托今(HMX)、高氯酸铵(AP)、六硝基六氮... 采用动态接触角表面张力仪,研究了PAN–b–PHEA(PAN为聚丙烯腈,HEA为2–羟乙基丙烯酸酯)和PAN–b–P(HEA–g–AEFC)(AEFC为二茂铁甲酸(2–丙烯酰氧乙基)酯)键合剂与不同固体填料(黑索今(RDX)、奥克托今(HMX)、高氯酸铵(AP)、六硝基六氮杂异伍兹烷(CL–20)、Al粉)以及黏合剂体系(端羟基聚丁二烯(HTPB)、星型叠氮缩水甘油醚(S–GAP))间的表界面性能。结果表明:PAN–b–P(HEA–g–AEFC)与配方组分间的黏附功关系为CL–20>HTPB>HMX>RDX>Al粉>S–GAP>AP;PAN–b–PHEA与配方组分间的黏附功关系为CL–20>HTPB>HMX>RDX>Al粉>S–GAP>AP。 展开更多
关键词 PAN–b–phea PAN–b–P(HEA–g–AEFC) 接触角 表面张力 界面张力 黏附功
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醋酸钙不动杆菌PHEA-2苯酚降解调控蛋白MphR化学信号域的研究 被引量:2
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作者 彭子欣 于海英 +3 位作者 战嵛华 陈明 林敏 张维 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期86-92,共7页
MphR是醋酸钙不动杆菌PHEA-2调控苯酚代谢的激活蛋白。通过分析苯酚羟化酶启动子的lacZ融合子(PmphK::lacZ)在21种苯酚及苯酚衍生物诱导时的β-半乳糖苷酶活性,确定了调控蛋白MphR化学信号域可以识别苯酚,邻甲酚,间甲酚,邻氯苯酚等酚类... MphR是醋酸钙不动杆菌PHEA-2调控苯酚代谢的激活蛋白。通过分析苯酚羟化酶启动子的lacZ融合子(PmphK::lacZ)在21种苯酚及苯酚衍生物诱导时的β-半乳糖苷酶活性,确定了调控蛋白MphR化学信号域可以识别苯酚,邻甲酚,间甲酚,邻氯苯酚等酚类衍生物。大肠杆菌中逐段截短MphR化学信号域试验证实,当化学信号域截短后,MphR受苯酚诱导激活转录的功能丧失。结果表明,化学信号域对于苯酚激活转录功能极为重要。 展开更多
关键词 醋酸钙不动杆菌phea-2 MphR 效应物识别谱 Β-半乳糖苷酶活性
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外源基因pheA、aroG和tyrB在苯丙氨酸合成途径中的共表达 被引量:8
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作者 曾小冰 范长胜 +2 位作者 江培翃 陈永青 黄伟达 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期671-674,共4页
利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性 ,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产量。首先采用聚合酶链反应 (PCR)从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的aroG ,pheA和tyrB 3个基... 利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性 ,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产量。首先采用聚合酶链反应 (PCR)从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的aroG ,pheA和tyrB 3个基因。其中aroG编码 3 脱氧 2 阿拉伯庚酮糖 7 磷酸合成酶 (DS) ,pheA编码双功能酶蛋白 分枝酸变位酶 (CM)和预苯酸脱水酶 (PD) ,tyrB编码转氨酶 (AT)。设计不同的酶切位点 ,利用质粒pUC118的多克隆位点 ,将 3个基因按不同的顺序组合串联 ,然后插入穿梭质粒pCZ 10 ,导入短杆菌中表达。结果表明 3个大肠杆菌基因在短杆菌中能够表达。其中以aroG pheA tyrB顺序串联而构建的黄色短杆菌工程菌株1311 GAB中的DS酶活力提高 4 5倍 ,CM提高 4 2倍 ,PD提高 2 7倍 ,AT提高 3 2倍 ;它的苯丙氨酸合成量提高2 35倍。 展开更多
关键词 苯丙氨酸 生物合成 外源基因 表达
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大肠杆菌pheA与tyrB基因的克隆与串联表达 被引量:2
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作者 彭永济 黄伟达 +2 位作者 沈水源 江培 范长胜 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期643-648,共6页
为探讨用基因工程的手段改良苯丙氨酸的发酵菌株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法,从大肠杆菌总DNA中克隆得到了编码苯丙氨酸合成途中的两个关键酶基因--即分枝酸变位酶(CM)/预苯酸脱水酶(PD)基因pheA与苯丙氨酸... 为探讨用基因工程的手段改良苯丙氨酸的发酵菌株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法,从大肠杆菌总DNA中克隆得到了编码苯丙氨酸合成途中的两个关键酶基因--即分枝酸变位酶(CM)/预苯酸脱水酶(PD)基因pheA与苯丙氨酸转氨酶(PAT)基因tyrB,在大肠杆菌中进行了这两个基因的单个和串联表达。pheA和tyrB基因分别都能在λ噬菌体的P。启动子之后得到较大量的表达,在SDS-PAGE上出现清晰的条带,使表达菌体的蛋白抽提物中CM/PD和PAT的比活分别提高了14.1倍/7.9倍和3.5倍.当pheA和tyrB以tyrB-pheA的形式进行串联表达时,酶的比活分别提高了4.2倍/2.4倍和2.5倍;而以pheA-tyrB的形式串联表达时,三种酶的比活分别提高了17.5倍/8.7倍和3.3倍.结果表明,后一种串联方式的表达效果较好. 展开更多
关键词 苯丙氨酸 phea基因 tyrB基因 克隆 发酵
原文传递
聚(丙烯酸-2-羟乙酯)与二氧化硅的原位复合 被引量:7
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作者 井新利 罗金恒 郑茂盛 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期109-110,共2页
Tetraacryloxyethoxysilane syntheslied by the reaction of 2-hydroxyethyl acrylatewith silicon tetrachloride was used in preparation of the transparent poly (2-hydroxyethylacrylate)/silicon dioxide composites by sol-gel... Tetraacryloxyethoxysilane syntheslied by the reaction of 2-hydroxyethyl acrylatewith silicon tetrachloride was used in preparation of the transparent poly (2-hydroxyethylacrylate)/silicon dioxide composites by sol-gel method. The composition of the compositeswere analyzed by electronic energy spectroscopy, elemental analysis and thermogravimetry.The composites have transparency greater than 80%, with thermal stability being increasedwith the silicon dioxide content. 展开更多
关键词 二氧化硅 复合材料 原位 聚丙烯酸羟乙酯 phea
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Delftia tsuruhatensis AD9苯胺双加氧酶基因的过量表达及多功能降解工程菌的构建
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作者 耿立召 梁泉峰 +4 位作者 张维 平淑珍 陆伟 林敏 陈明 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2008年第4期95-99,共5页
Delftia tsuruhatensis AD9和Acinetobacter calcoaceticus PHEA-2分别能利用苯胺和苯酚作为唯一碳源生长,降解的第一个中间产物均为邻苯二酚,随后裂解为参与三羧酸循环的中间产物。通过PCR方法克隆到苯胺高效降解菌AD9的苯胺双加氧酶基... Delftia tsuruhatensis AD9和Acinetobacter calcoaceticus PHEA-2分别能利用苯胺和苯酚作为唯一碳源生长,降解的第一个中间产物均为邻苯二酚,随后裂解为参与三羧酸循环的中间产物。通过PCR方法克隆到苯胺高效降解菌AD9的苯胺双加氧酶基因,并构建表达苯胺双加氧酶的广宿主质粒载体pVD,通过三亲接合,导入到AD9和PHEA-2中。对两种重组菌中苯胺双氧酶基因的表达及苯胺降解特性的分析结果表明,增加苯胺双加氧酶基因的拷贝数可以提高野生型AD9的苯胺降解速率,同时该基因的表达使PHEA-2菌获得苯胺降解能力。 展开更多
关键词 苯胺双加氧酶 Delftia tsuruhatensis AD9 ACINETOBACTER CALCOACETICUS phea-2
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高透明柔性含膦聚乙烯醇阻燃薄膜 被引量:4
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作者 周敏 曾尚恒 +4 位作者 李鑫 王凯 郑爽 韩立森 刘学清 《化学与生物工程》 CAS 2019年第3期7-12,共6页
合成了一种含磷羟基的活性单体含膦丙烯酸(PHEA),PHEA与聚乙烯醇(PVA)水溶液混合,成膜后得到高透明柔性的PVA/PHEA薄膜。采用~1HNMR、FTIR分别表征了PHEA和PVA/PHEA薄膜的结构,通过紫外可见光谱、X-射线衍射(XRD)图谱和拉伸实验研究了... 合成了一种含磷羟基的活性单体含膦丙烯酸(PHEA),PHEA与聚乙烯醇(PVA)水溶液混合,成膜后得到高透明柔性的PVA/PHEA薄膜。采用~1HNMR、FTIR分别表征了PHEA和PVA/PHEA薄膜的结构,通过紫外可见光谱、X-射线衍射(XRD)图谱和拉伸实验研究了薄膜的透明性、结晶性和柔性,通过微型燃烧量热法(MCC)、垂直燃烧实验(UL 94 VTM)和极限氧指数(LOI)研究了薄膜的阻燃性,并通过热分析(TG-DTG)研究了薄膜的稳定性。结果表明,PHEA的O=P-OH与PVA的-OH在80℃可反应;PHEA的加入降低了PVA的结晶性;含30%PHEA的PVA薄膜的透明度是纯PVA薄膜的95%。PVA/PHEA薄膜垂直燃烧达到阻燃UL 94 V0级别时,其断裂伸长率提高了4.47倍。PHEA的加入不仅延缓了热量释放,而且降低了PVA的热释放速率和热释放总量。PHEA是一种能提高PVA阻燃性和柔性,同时保持PVA高透明性的环保阻燃剂。 展开更多
关键词 透明 阻燃 聚乙烯醇 柔性 含膦丙烯酸
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戊醛缩合制2-丙基-2-庚烯醛研究进展
10
作者 柴文正 傅送保 王凯 《山东化工》 CAS 2021年第20期50-52,共3页
戊醛缩合合成2-丙基-2-庚烯醛(2-PHEA)反应是工业生产2-丙基庚醇(2-PH)的关键步骤之一,是增塑剂和洗涤剂产业链发展的重要组成部分。本文对目前国内外戊醛缩合的工艺和催化剂进展进行了概述。
关键词 戊醛 缩合 2-phea 催化剂
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仿贻贝粘附蛋白聚合物的合成及其防腐机理研究
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作者 杨名亮 吴建华 +3 位作者 李至秦 苏雅丽 方大庆 郑添水 《表面技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第8期211-219,共9页
目的合成水性含多巴胺功能基团的仿贻贝粘附蛋白聚合物(PHEA-DOPA),研究在水性环氧涂层中的腐蚀防护机理。方法通过聚琥珀酰亚胺与乙醇胺和多巴胺的连续氨解反应,成功制备了PHEA-DOPA粘附聚合物,并用红外光谱(FTIR)仪、核磁(1HNMR)共振... 目的合成水性含多巴胺功能基团的仿贻贝粘附蛋白聚合物(PHEA-DOPA),研究在水性环氧涂层中的腐蚀防护机理。方法通过聚琥珀酰亚胺与乙醇胺和多巴胺的连续氨解反应,成功制备了PHEA-DOPA粘附聚合物,并用红外光谱(FTIR)仪、核磁(1HNMR)共振波谱仪和紫外-可见分光光度计对其结构进行了表征。通过电化学阻抗谱(EIS)、扫描电子显微镜(SEM)、石英晶体微天平(QCM-D)和拉曼光谱,对含有PHEA-DOPA的水性环氧涂层在碳钢表面的防护性能与机理进行了研究。结果红外光谱、核磁光谱和紫外-可见光谱结果表明,成功合成了PHEA-DOPA聚合物。EIS和SEM结果表明,PHEA-DOPA的加入能够明显提高涂层的防护性能。QCM-D和拉曼光谱结果表明PHEA-DOPA的防腐机理为:PHEA-DOPA结构中的DOPA基团与Fe离子有较强的吸附络合作用,并在碳钢表面和涂层内部反应生成不溶性的[Fe(DOPA)3]3+络合物,可抑制铁的溶解过程,提高涂层的致密性。结论 PHEA-DOPA粘附聚合物的加入能够明显提高涂层的防护性能。 展开更多
关键词 仿贻贝粘附蛋白 粘附聚合物 合成 缓蚀剂 环氧涂层
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Corrosion protection of waterborne epoxy coatings containing mussel-inspired adhesive polymers based on polyaspartamide derivatives on carbon steel 被引量:6
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作者 Mingliang Yang Jianhua Wu +2 位作者 Daqing Fang Bo Li Yang Yang 《Journal of Materials Science & Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第12期2464-2471,共8页
A novel mussel-inspired adhesive polymer(PHEA-DOPA) containing the 3,4-dihydroxyphenylalanine(DOPA) functional group based on polyaspartamide derivatives was synthesized. The corrosion protection of the waterborne... A novel mussel-inspired adhesive polymer(PHEA-DOPA) containing the 3,4-dihydroxyphenylalanine(DOPA) functional group based on polyaspartamide derivatives was synthesized. The corrosion protection of the waterborne epoxy coatings containing the adhesive polymers was investigated by electrochemical impedance spectroscopy(EIS). The results indicated that the PHEA-DOPA could improve the corrosion resistance of the waterborne epoxy coating. The corrosion products were also analyzed by Raman microspectroscopy(RM), indicating the formation of the insoluble DOPA-Fe complexes on the carbon steel surface. These complexes simultaneously acting as a passivating layer, can inhibit the process of corrosion at the metal-solution interface. The differential scanning calorimeter(DSC) measurement indicated that PHEA-DOPA can increase the crosslinking density of coating. The effect of O;on the protective mechanism of the PHEA-DOPA coating in a 3.5% NaCl solution was also evaluated by EIS. The results indicated that the barrier effect was significantly improved under aerated conditions because DOPA was oxidized to DOPA-quinone(Dq) by O;, which triggered the reaction with Fe ions that were released from the surface of the carbon steel. This led to more compact coatings. 展开更多
关键词 Corrosion protection Adhesive polymer Inhibitor WATERBORNE phea-DOPA
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