DDIT3免疫组织化学检测在黏液样脂肪肉瘤诊断中的意义

目的评估DNA损伤诱导转录因子3(DNA-damage inducible transcription 3,DDIT3)免疫组织化学检测诊断黏液样脂肪肉瘤的可靠性及在黏液样脂肪肉瘤诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集山西省肿瘤医院2014至2021年经荧光原位杂交检测确诊的黏液样脂肪肉瘤病例42例作为实验组,并选取其他圆细胞肿瘤及高分化脂肪肉瘤共73例作为对照组。采用免疫组织化学染色检测实验组与对照组DDIT3表达水平,采用Wilcoxon符号秩检验进行统计学分析。结果在实验组中,35例(35/42,83%)病例显示DDIT3弥漫阳性定位于细胞核;在对照组中,16例(16/73,22%)病例存在不同程度的DDIT3表达;实验组中DDIT3表达水平显著高于对照组中圆细胞肿瘤组;DDIT3诊断黏液样脂肪肉瘤的灵敏度为83%,特异度为78%。结论DDIT3免疫组织化学检测可作为黏液样脂肪肉瘤诊断的辅助方法。

程序性细胞死亡1-配体1在不同免疫组织化学染色方法的一致性比较

目的:比较程序性细胞死亡1-配体1(programmed cell death 1-ligand 1,PD-L1,克隆号E1L3N、22C3、SP263)在不同免疫组织化学染色方法的一致性。方法:第一步,筛选最优流程:采用PD-L1(克隆号E1L3N)抗体分别按推荐流程、自建流程①、自建流程②与自建流程③,对5例扁桃体组织完成平行免疫组织化学染色,专科病理医生对全部切片进行质量评分(0~6分),筛选出评分最高的流程;第二步,用最优流程与两种标准流程的评分结果进行一致性比较:选取近两年北京大学第一医院病理最终诊断为非小细胞肺癌的标本共32例,用筛选出的自建流程①、与SP263标准流程及22C3标准流程对32病例各自进行平行染色,全部染色片由专科病理医师行阳性肿瘤细胞比例评分(tumor proportion score,TPS)。评分结果按<1%,≥1%至<10%,≥10%至<50%,≥50%分组,分析PD-L1检测抗体克隆号E1L3N与22C3、SP263染色结果的一致性。结果:扁桃体染色切片质量评分(0~6分)如下:推荐流程为5、5、5、5、5分;自建流程①为5、6、6、5、6分;自建流程②为4、4、4、4、4分;自建流程③为3、3、3、3、3分。自建流程①的结果总体评分最高,选用自建流程①完成32例非小细胞肺癌病例的免疫组组织化学染色,TPS评分为:自建流程①,<1%共6例,≥1%至<10%共5例,≥10%至<50%共10例,≥50%共11例;22C3标准流程,<1%共5例,≥1%至<10%共3例,≥10%至<50%共13例,≥50%共11例;SP263标准流程,<1%共7例,≥1%至<10%共4例,≥10%至<50%共11例,≥50%共10例。一致性检验结果为:自建流程①和22C3标准流程,κ值为0.736(P<0.001),一致性好;自建流程①和SP263标准流程,κ值为0.914(P<0.001),一致性极好。结论:采用PD-L1(克隆号E1L3N)抗体,在罗氏Ventana Benchmark GX平台,通过自建染色流程①完成,可获得良好质量的染色切片;在非小细胞肺癌病例的检测中,自建染色流程①与22C3标准流程和SP263标准流程一致性好。

大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织STAT_3变化的免疫组织化学研究

目的 探讨信号转导和转录激活子 (STAT) 3在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达及其与缺血性神经细胞损伤的关系。方法 用 ABC免疫组化方法观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中的STAT3蛋白免疫反应阳性细胞分布。结果 正常和假手术大鼠脑内以及脑缺血后的非缺血半球脑组织中未发现有 STAT3免疫反应阳性细胞 ,脑缺血再灌注损伤后 12小时在栓塞侧梗死区可见少量 STAT3免疫阳性细胞 ,2 4小时后阳性细胞数显著增多达高峰 ,在缺血侧纹状体和缺血皮质周边区表达最明显 ,1周后梗死周边区少数神经细胞仍有阳性表达。差异有显著意义 (P<0 .0 1)。结论 STAT3的活化及超量表达可能介导了缺血神经细胞信号转导过程 。

BDNF和NT-3在鸡胚脊髓发育中的表达—免疫组织化学研究

探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养因子 3(NT- 3)在脊髓发育中的表达。取 Hamburger30期和 40期鸡胚腰段脊髓制作 2 0 μm厚冰冻切片。分别用 BDNF和 NT- 3抗体行 ABC免疫组化染色。观察 BDNF、NT- 3样免疫阳性反应物 (BDNF- IR、NT- 3- IR)在两时相脊髓的分布。结果显示 :30期组者 ,BDNF- IR主要分布于脊髓腰段腹角神经元的核周质及神经突起内。NT- 3- IR则仅限于腹角前群神经元 ,胞核、胞浆均染色 ;40期组者 ,BDNF- IR除腹角染色外 ,还扩展至整个脊髓背角神经元及神经突起。另外 ,亦见一些 BDNF- IR的胶质细胞。与之类似 ,NT- 3- IR除分布于腹角前群神经元外 ,中间带、背角内亦出现了一些 NT- 3阳性神经元。结果表明 :BDNF和 NT- 3在脊髓的表达随发育进程由腹角向背角扩展。提示 :BDNF和 NT- 3的生理作用与脊髓的发育有关。

实验性脑挫伤后caspase-3表达的免疫组织化学研究

目的 观察大鼠在不同程度及不同时间脑挫伤后caspase-3表达的变化。方法 对48例实验性脑挫伤大鼠的脑组织进行检验,同时以10例非脑挫伤的脑组织做对照。结果 伤后1h,caspase-3即有表达;24～48h达高峰,2周时仍有阳性细胞存在。阳性细胞多集中于挫伤区及周围带皮质和脑实质内海马区;不同程度脑挫伤组之间于伤后1h,12h,24h,72h,1周和2周caspase-3表达有差异。结论 不同程度脑损伤后caspase-3表达量不同;在脑损伤后caspase-3的表达有时间变化规律,对探讨脑挫伤后二次损害原因和研究脑挫伤程度有一定意义。

BDNF,NT-3在猫背根神经元的自分泌和旁分泌作用初探——原位杂交和免疫组织化学研究

探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经营养因子 3 (NT- 3)在成年猫背根节 (DRG)神经元是否存在自分泌或旁分泌作用方式。用特异的 trk B、 trk C抗体及 BDNF、 NT- 3的 c RNA探针 ,以免疫组化及原位杂交双标法观察了成年猫 L6DRG神经元 BDNF m RNA与 trk B、 NT- 3 m RNA与 trk C的关系 ,以了解 BDNF、 NT- 3在成年猫 L6 DRG神经元有无自分泌或旁分泌作用。结果表明 ,在成年猫 L6 DRG BDNFm RNA阳性细胞主要是部分中、小神经元 (4 2～ 5 7μm,<42μm) ,而 trk B阳性细胞则主要是部分大神经元 (>5 7μm)。未见双标的 BDNF m RNA和 trk B阳性神经元 ,但见一些双标的卫星细胞。与BDNF者比较 ,大多数大神经元既表达 NT- 3 m RNA,又表达 trk C。这表明在成年猫 L6 DRG神经元 ,NT- 3可能存在自分泌方式。但本文的结果未证明 BDNF在成年猫 L6 DRG神经元存在自分泌。

NGF,BDNF,NT-3和GDNF在背根节不同神经元的配布的免疫组织化学证据

为了探讨神经生长因子、脑源性神经生长因子 ,神经营养素 -3,胶原细胞源性神经生长因子在成年猫背根节神经元不同大小细胞的分布。取 L6背根节制成 2 0μm厚冰冻切片 ,用上述四种因子抗血清进行免疫组化反应。计数每一种因子阳性大、中、小型 (小于 42μm者为小型神经元 ;42～ 5 7μm者为中型神经元 ;大于 5 7μm者为大型神经元 )神经元的百分数。结果证明 ,此四种因子在背根节大、中、小神经元的阳性百分数分别为 :1.2± 0 .7,2 .1± 0 .9,3.3± 1.1;1.7± 0 .4,11.2± 1.2 ,30 .0± 1.5 ;2 6 .7± 2 .2 ,6 .2± 1.2 ,13.2± 2 .9;2 7.4± 3.3,8.1± 1.7,2 0 .1± 2 .4。表明 :在成年猫 L6背根节仅存在少数神经生长因子阳性细胞 ,而脑源性神经生长因子则主要配布于中、小神经元 ,神经营养素 -3和胶质细胞源性生长因子的免疫阳性细胞主要是大神经元 ,但也包括一些中小神经元。提示此四种因子在成年猫背根节的生理功能可能与神经元的不同大小有关。

口腔扁平苔藓中Caspase-3和PTEN蛋白的免疫组织化学观察

目的:探讨Caspase-3和PTEN蛋白在口腔扁平苔藓病变发生发展中的作用及两者间的关系。方法:采用S-P免疫组化方法对28例口腔扁平苔藓及5例正常口腔黏膜中Caspase-3和PTEN蛋白表达进行检测。结果:口腔扁平苔藓病损中Caspase-3的阳性率上皮层和固有层均为100%,与正常口腔黏膜相比,表达有显著统计学意义(P<0.01)。口腔扁平苔藓病损中PTEN蛋白阳性率为100%,与正常口腔黏膜相比,无统计学差异(P>0.05)。口腔扁平苔藓中Caspase-3与PTEN蛋白表达呈正相关,(P<0.05)。结论:Caspase-3和PTEN蛋白均参与口腔扁平苔藓病变的发生及发展过程,且两者之间具有相关性。

背根切断对脊髓后角Ⅱ板层BDNF,NT-3表达的影响——免疫组织化学研究

目的 采用免疫组织化学技术探讨切断背根 (L1)后脊髓Ⅱ板层脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养因子 3 (NT 3)表达的变化。方法 将成年雄猫 5只行单侧L1背根切断术 (对侧为非手术侧 )。术后 5天取L1脊髓制作2 0 μm厚冰冻切片 ,用BDNF及NT 3抗体分别进行免疫组化染色。观察BDNF、NT 3免疫阳性反应物在脊髓的分布 ,计数单位面积内Ⅱ板层BDNF阳性膨体密度及NT 3阳性细胞数。结果用t检验进行统计分析。结果 BDNF样免疫反应物在Ⅱ板层主要分布于神经膨体 ,NT 3样免疫反应物在神经元及胶质细胞均有分布。背根切断后 ,手术侧Ⅱ板层BDNF阳性膨体数量明显较非手术侧者减少 (P <0 0 1)。而手术侧Ⅱ板层NT 3阳性神经元及胶质细胞数量则较非手术侧者明显增加(P <0 0 1)。结论 背根切断后脊髓Ⅱ板层BDNF ,NT 3的表达发生不同变化。BDNF减少 ,而NT 3表达增多。提示BD NF和NT 3在脊髓损伤修复中的不同作用。

兔退变椎间盘中BNIP3的免疫组织化学研究

目的探讨兔退变椎间盘中BNIP3蛋白的表达情况。方法建立兔椎间盘穿刺退变模型,分别培养2、4、8周后对目的椎间盘进行组织HE染色、番红O染色及BNIP3免疫组织化学染色,与正常椎间盘随机对照,检测椎间盘退变程度及BNIP3蛋白表达情况。结果成功建立兔椎间盘退变模型,随椎间盘退变程度加重,BNIP3蛋白在中央髓核组织中的阳性表达逐渐增强。结论兔椎间盘退变过程中,BNIP3蛋白表达增强诱导髓核细胞死亡增加。

肾综合征出血热肺组织中C3的免疫组织化学检测

本文应用免疫组织化学方法(ABC法)对10例肾综合征出血热尸检肺组织中C3进行检测，发现C3分散地存在干肺的多种细胞内和细胞间隙中。此研究结果，为肾综合征出血热的免疫发病机理提供了实验依据．

Caspase-3在成年大鼠中枢神经系统分布的免疫组织化学研究

采用免疫组织化学ABC法观察caspase3在成年大鼠中枢神经系统不同区域内的分布。caspase3阳性反应产物主要分布于脊髓前角和侧角大型运动神经元及中型神经元的胞浆、胞核及突起;脊髓后角及灰质连合的中、小型神经元的胞核及胞浆亦可见caspase3阳性反应产物;脊髓白质内的星形胶质细胞、小胶质细胞及少突胶质细胞的胞核和胞浆,caspase3阳性反应产物呈强阳性反应。在延髓内,caspase3阳性反应产物定位于中央灰质、三叉神经尾侧亚核和中央网状核内中型神经元的胞浆。大脑皮层各区内的caspase3阳性反应产物集中分布于ⅢⅤ层锥体细胞的胞浆,呈弱阳性反应。海马的CA1、CA2、CA3、CA4区的锥体细胞层的细胞,胞浆亦呈弱阳性反应。小脑内,以Purkinje细胞胞浆着色为主。乳头体核、尾状核、豆状核、嗅前核后部、嗅结节及丘脑等部位亦可见caspase3阳性神经元。本研究的结果说明caspase3在中枢神经系统内广泛分布,且在不同部位神经元的亚细胞分布存在差异。

免疫组织化学方法检测皮损组织中C3d,C4d,IgG,IgG4及CD123表达在诊断自身免疫性皮肤病中的应用价值

目的:探讨免疫组织化学方法检测皮损组织中C3d,C4d,IgG,IgG4及CD123表达在诊断自身免疫性皮肤病中的应用价值。方法:采用免疫组织化学方法检测27例红斑狼疮(其中8例盘状红斑狼疮、4例亚急性皮肤型红斑狼疮、15例系统性红斑狼疮)、15例皮肌炎、15例大疱性类天疱疮、15例天疱疮皮损组织石蜡切片中的C3d,C4d,IgG,IgG4及CD123表达情况;比较免疫组织化学染色与直接免疫荧光检测在红斑狼疮、大疱性类天疱疮、天疱疮皮损组织中上述5种抗体的阳性率。结果:红斑狼疮组皮损基底膜带的C3d,C4d阳性率分别为85.2%,51.9%,皮肌炎组C3d,C4d阳性率分别为40%,0;红斑狼疮组皮损组织中C3d,C4d表达水平均明显高于皮肌炎组(P<0.05)。红斑狼疮组皮损组织中CD123蛋白的表达水平显著高于皮肌炎组(P<0.05)。大疱性类天疱疮组皮损基底膜带的C3d,C4d阳性率分别为100%,86.7%,天疱疮组角质形成细胞间的C3d,C4d阳性率分别为100%,60%。天疱疮组皮损真皮内的IgG,IgG4表达水平明显高于大疱性类天疱疮组(P<0.05),且天疱疮组IgG4/IgG明显高于大疱性类天疱疮组(P<0.05)。结论:免疫组织化学检测皮损组织中的C3d,C4d在红斑狼疮、大疱性类天疱疮和天疱疮中有重要的诊断价值,在某些情况下可能作为替代直接免疫荧光的诊断工具。CD123表达对于红斑狼疮的鉴别诊断有一定的临床意义,IgG4和IgG对于天疱疮有辅助诊断意义。

GPC-3、CD10、CD147、CD138免疫组织化学联合检测 对于高分化肝细胞癌与异型增生的鉴别诊断价值

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC-3)、CD10、CD147和CD138在高分化肝细胞癌与异型增生病理鉴别诊断中的联合互补诊断价值。方法:应用免疫组织化学法检测76例高分化肝细胞癌和癌周异型增生结节内GPC-3、CD10、CD147和CD138的表达情况并进行分析。结果:高分化肝细胞癌组织中GPC-3、CD10、CD147较异型增生结节内高表达,且异型增生结节内表达常常杂乱不均;而CD138在异型增生结节中高表达,高分化肝细胞癌组织中弱表达或不表达。高分化肝细胞癌和异型增生结节组织内GPC-3、CD10、CD147和CD138的表达差异均有统计学意义(P<0.01)。4种标记联合检测诊断高分化肝细胞癌的灵敏度达96.05%,而特异性仅为52.6%。结论:GPC-3、CD10、CD147和CD138对高分化肝细胞癌与异型增生具有较高的病理鉴别诊断价值,可作为肝穿标本内两者区别的客观辅助指标。

甲状腺微小乳头状癌的形态学和免疫组织化学研究

目的:观察甲状腺微小乳头状癌的临床病理并检测其免疫表型,探讨相关疾病的鉴别诊断。方法:光学显微镜下观察223例甲状腺微小乳头状癌的组织形态;对74例甲状腺微小乳头状癌、32例甲状腺增生性病变行免疫组织化学方法标记细胞角蛋白19(CK19)、间皮细胞(MC)、细胞黏附凝集素3(Galectin-3)、CD56,复习相关文献。结果:在223例甲状腺微小乳头状癌中以滤泡状排列为主者占38.6%(86/223),核的特征不典型者占13.9%(31/223)。在74例甲状腺微小乳头状癌中CK19、MC、Galectin-3、CD56阳性表达率分别为100.0%、98.6%、98.6%、4.1%;在32例增生性病变中4者阳性表达率分别为37.5%、12.5%、18.8%、68.8%。结论:部分甲状腺微小乳头状癌细胞以滤泡状排列为主,核的特征不够典型,诊断较为困难。根据滤泡细胞增生活跃,细胞核具有乳头状癌的基本特点,病变与周围滤泡截然不同,且肿瘤性滤泡穿插于硬化间质或正常滤泡之间,可与增生性病变鉴别。CK19、Galectin-3、MC弥漫性中强阳性表达,CD56阴性表达对其诊断有重要价值,联合应用可以提高诊断的准确性和特异性。

人卵巢上皮癌组织中T细胞表型的免疫组织化学研究

研究采用 ABC免疫组织化学技术和图像分析的方法 ,通过观察人卵巢上皮癌组织中 CD3、 CD4、 CD8阳性 T细胞数和表达强度 ,了解卵巢上皮癌局部微环境的免疫状态 ,与卵巢上皮癌发生、发展的关系。结果发现 ,在卵巢上皮癌中 ,CD3+ 、CD8+ T细胞数量明显减少 ,与正常卵巢组织相比较 ,两者具有显著性差异 ,同时其表达强度也明显降低 ,并与临床分期和病理分级相关。 CD4+ T细胞数量明显减少 ,与正常卵巢组织相比较具有显著性差异 ,其表达强度虽呈下降趋势 。

免疫组织化学染色法在大鼠急性心肌缺血研究中的应用

目的:探讨槲皮素对大鼠急性心肌缺血的药理调节作用。方法:免疫组织化学法。结果:槲皮素可降低大鼠急性心肌缺血时的Caspase-3的表达。结论:槲皮素具有提高心肌对急性缺血的耐受力,即槲皮素具有抗心肌缺血的药理作用。

大鼠实验性胃溃疡期间胃窦粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学和放射自显影研究

成年雄性Wistar大鼠16只,分为实验溃疡组和对照组,后者又分为盐水组和空白组。在手术后4、6、10和21天取胃窦粘膜,经离体H-TdR掺入,用免疫组织化学和放射自显影方法观察胃泌素细胞(G细胞)的变化。正常大鼠胃窦粘膜G细胞标记指数为1.59±0.78,细胞百分率为4.27±0.27。溃疡组G细胞标记指数在手术后4天比对照组降低,10天的比对照组增高;G细胞百分率在手术后4、6、和10天低于对照组,21天的则高于对照组;经统计学处理,其中21天的G细胞百分率与4或6天的相比有显著性差异。溃疡组手术后6天的新生粘膜内出现G细胞,其数目随时间增加。6、10和21天的新生粘膜内可见少量H-TdR标记的G细胞。G细胞形状有多种,有的G细胞伸出突起,与幽门腺其他腺细胞接触。本研究结果提示,在大鼠实验性胃溃疡修复期间,G细胞可能与其他内分泌细胞共同参与了机体自然抗病活动。

食管癌组织吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO-1)高表达与食管癌患者不良预后相关

目的 基于多种生物信息学数据库和免疫组织化学染色分析吲哚胺2, 3-双加氧酶1(IDO-1)在食管癌中的表达及临床意义。方法 通过免疫组织化学染色法检测IDO-1在食管癌组织和癌旁组织的表达水平,利用肿瘤免疫评估资源数据库(TIMER)、基因表达谱交互分析数据库(GEPIA)、阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析数据库(UALCAN)、 Kaplan-Meier plotter、癌症基因组图谱数据库(TCGA)等数据库分析IDO-1在食管癌组织中的表达情况,IDO-1差异表达对食管癌患者预后的影响,IDO-1表达与肿瘤特征基因通路的相关性,IDO-1表达与免疫细胞浸润情况及免疫检查点表达情况的相关性。结果 免疫组织化学染色结果显示,IDO-1在食管癌组织中的阳性表达率为70%,明显高于癌旁组织的15%;IDO-1表达与患者年龄、性别无显著差异。IDO-1表达在低分化食管癌组织、高临床分期级有淋巴结转移的组织表达增加;GEPIA数据库和TIMER数据库分析结果显示,IDO-1在食管癌组织中表达水平显著高于癌旁组织;UALCAN数据库分析结果显示,IDO-1在低分化食管癌、有淋巴结转移的患者高表达;GEPIA数据库、 Kaplan-Meier plotter数据库、 UALCAN数据库分析结果显示,IDO-1高表达的食管癌患者,特别是食管鳞状细胞癌患者的生存时间显著缩短,但食管腺癌患者的IDO-1表达水平与生存时间并无显著相关性;TCGA数据库食管癌RNA-seq数据的通路富集、免疫细胞浸润、免疫检查点表达情况分析结果显示食管癌患者IDO-1的表达水平与多种食管癌恶性进展基因通路密切相关,并且IDO-1表达与多种免疫细胞浸润和免疫检查点表达关系密切。结论 IDO-1在食管癌中高表达并与患者不良预后密切相关,高表达IDO-1是食管癌恶性进展及免疫抑制微环境形成的关键因素。