PHLPP基因对血管损伤后狭窄的影响

目的分析蛋白磷酸酶(PHLPP)基因表达水平对血管损伤后狭窄的影响,并探讨其可能机制。方法动物实验,大鼠分为研究组、对照组和假手术组。研究组大鼠鼠尾静脉给予PHLPP腺病毒,对照组大鼠鼠尾给予空载病毒。给予颈动脉球囊损伤,2周后取颈动脉,切片后染色,观察血管损伤后狭窄程度。细胞实验,取大鼠血管平滑肌原代细胞,分别将质粒pc DNA3.0/PHLPP(研究组)和pc DNA3.0/空载(对照组)转染至该细胞,采用EDU、划痕实验对细胞增殖和迁移能力进行检测;Western blot技术对增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白和PHLPP基因进行检测。结果研究组的损伤血管后狭窄程度较对照组减轻,细胞增殖和迁移能力显著低于对照组,并且PCNA和MMP2的m RNA水平和蛋白水平低于对照组(P<0.05)。结论 PHLPP表达水平可通过调节血管平滑肌细胞增殖和迁移能力而影响损伤后血管的狭窄程度;抑制PCNA和MMP2表达可能为其作用机制。

mTOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在结肠癌中的表达及意义

目的检测结肠癌组织中m TOR、PTEN、PHLPP及VEGF和p53蛋白表达,探讨结肠癌发生、发展可能的分子机制及临床意义。方法选择2011年3月至2012年10月65例结肠癌癌组织标本及25例腹部外伤者的正常结肠组织标本,分别采用免疫组化法及Western-blot方法检测m TOR及PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白的阳性表达率及相对表达量,并对检测结果进行比较。结果 m TOR、PTEN、PHLPP、VEGF、p53蛋白在正常结肠组织中的阳性率分别为12.0%、96.0%、92.0%、12.0%、8.0%,在结肠癌组织中综合阳性率为78.5%、23.1%、20.0%、92.3%、67.7%。结肠癌组m TOR、VEGF、p53阳性表达率高于正常对照组,PTEN、PHLPP低于正常对照组(P均<0.01)。Western-blot检测结果显示,TNM分期越晚,m TOR蛋白及VEGF表达水平越高(P<0.05,P<0.01),PTEN、PHLPP蛋白表达水平越低(P<0.05,P<0.01),而p53蛋白表达水平在肿瘤TNM不同分期无明显变化。结论 m TOR通路蛋白及抑癌基因PTEN、PHLPP、p53可能参与结肠癌发生、浸润、转移的信号传导。提示m TOR通路蛋白抑制剂可用于结肠癌的治疗。

PHLPP对卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3／CDDP耐药的逆转研究

目的探讨PHLPP对卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3／CDDP的影响。方法采用集落形成试验检测PHLPP对SKOV3、顺铂＋SKOV3、SKOV3／CDDP和顺铂＋SKOV3／CDDP的细胞抑制作用。结果随着PHLPP的剂量增加，SKOV3、顺铂＋SKOV3、SKOV3／CDDP和顺铂＋SKOV3／CDDP的细胞集落形成数逐渐下降。当PHLPP为8μmol／L时SKOV3组、顺铂＋SKOV3组与前一浓度、对照组差异有统计学意义（均P〈0．05）；SKOV3／CDDP组、顺铂＋SKOV3／CDDP组与前一浓度差异无统计学意义（均P〉0．05），与对照组差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论PHLPP与卵巢癌耐药密切相关并可逆转耐药。