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Expression and functional analysis of Fa PHO1;H9 gene of strawberry(Fragaria×ananassa) 被引量:2
1
作者 CAO Fei LI He +3 位作者 WANG Shou-ming LI Xiao-ming DAI Hong-yan ZHANG Zhi-hong 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期580-590,共11页
Although the phosphate 1(PHO1)gene family has been implicated in inorganic phosphate transport and homeostasis,the underlying mechanism of this gene in the strawberry has not yet been revealed.In the present study,w... Although the phosphate 1(PHO1)gene family has been implicated in inorganic phosphate transport and homeostasis,the underlying mechanism of this gene in the strawberry has not yet been revealed.In the present study,we analyzed the expression of the PHO1;H9 gene in the strawberry(Fragaria×ananassa),revealing the involvement of this gene in the regulation of phosphorus(P)content.The coding sequence(CDS)of the PHO1;H9 gene,was isolated from the cultivated strawberry‘Sachinoka’and named as Fa PHO1;H9.The full-length CDS of this gene was 2 292 bp,encoding 763 amino acids,and the protein contained both SYG1/Pho81/XPR1(SPX)and ERD1/XPR1/SYG1(EXS)domains,which were involved in phosphate(Pi)signaling.Real-time reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)data suggested that the level of Fa PHO1;H9 expression was consistent with the P content in different organs,except for the petiole.Particularly,its expression level was also correlated with P content in fruits of different developmental stages.The expression of Fa PHO1;H9 was also consistent with P content in leaves under different concentrations of P fertilizer application.Furthermore,transgenic Arabidopsis lines were generated,and the P content in Arabidopsis plants over-expressing Fa PHO1;H9was significantly higher than that in wild-type plants.Therefore,we proposed that Fa PHO1;H9 functions in P transport. 展开更多
关键词 Fragariaxananassa pho1 H9 phosphorus EXPRESSION FRUITS transgenic Arabidopsis
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PHO1反义转录本的功能研究 被引量:1
2
作者 任美燕 潭德勇 +2 位作者 毛传澡 吴忠长 吴平 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第4期416-421,共6页
磷是植物生长发育必需的大量元素之一.而PHO1是磷从地下部往地上部运输的重要因子.与拟南芥不同,水稻PHO1存在天然顺式反义转录本.为了阐明PHO1反义转录本是否在植物响应磷胁迫中起调控作用,克隆了PHO1-2的反义转录本,分析了该反义转录... 磷是植物生长发育必需的大量元素之一.而PHO1是磷从地下部往地上部运输的重要因子.与拟南芥不同,水稻PHO1存在天然顺式反义转录本.为了阐明PHO1反义转录本是否在植物响应磷胁迫中起调控作用,克隆了PHO1-2的反义转录本,分析了该反义转录本对缺磷的响应,并获得了该反义转录本增强表达的转基因苗.磷含量测定结果表明,转基因苗叶片中磷含量比野生型显著降低,但根中磷含量比野生型要高.这和PHO1功能缺失材料的表型一致.定量RT-PCR结果表明,在反义转录本增强表达的材料中PHO1的表达显著降低.结果表明,PHO1反义转录本可能通过调控PHO1的表达来调控体内磷的平衡. 展开更多
关键词 水稻 磷吸收转运 pho1 天然顺式反义转录本(cis—NATs)
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东方肉座菌EU7-22纤维素内切酶Ⅰ的异源表达 被引量:1
3
作者 林俊涵 林谢榕 +4 位作者 柯伙钊 魏瑜 柯轶 王娜 龙敏南 《生物技术》 CAS 2019年第1期1-6,38,共7页
[目的]实现东方肉座菌纤维素内切酶EGⅠ在毕赤酵母中的表达,获得重组EGⅠ。[方法]通过RT-PCR获得EGⅠ开放阅读框。将EGⅠ成熟肽和PHO1信号肽的DNA片段插入p PIC3. 5K后,重组表达载体电转化毕赤酵母。通过甲醇诱导表达和镍柱纯化获得EG... [目的]实现东方肉座菌纤维素内切酶EGⅠ在毕赤酵母中的表达,获得重组EGⅠ。[方法]通过RT-PCR获得EGⅠ开放阅读框。将EGⅠ成熟肽和PHO1信号肽的DNA片段插入p PIC3. 5K后,重组表达载体电转化毕赤酵母。通过甲醇诱导表达和镍柱纯化获得EGⅠ。以羟甲基纤维素钠检测活性,以肽N-糖苷酶F分析N-糖基化,以SDSPAGE分析表达情况和糖基化修饰。[结果]获得EGⅠ分泌表达菌株,诱导96 h后上清液活性为0. 513±0. 002 U/m L,纯化后的EGⅠ活性为0. 558±0. 012 U/mg。SDS-PAGE表明EGⅠ分子量在100~180 k Da,远高于预测值47. 3k Da,经肽N-糖苷酶F处理后,降至63~75 k Da。[结论]实现了EGⅠ的分泌表达,获得活性为0. 558±0. 012 U/mg的糖基化重组EGⅠ。 展开更多
关键词 东方肉座菌 纤维素内切酶 毕赤酵母 pho1信号肽 糖基化
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