荧光探针JC-1与PI联合染色法在猪精子线粒体膜电位检测中的应用

目前,对于精子线粒体膜电位(MMP)的检测分析,通常采用JC-1单独染色,这种染色方法可以准确地区分高、低MMP精子,但不能明确区分精子的存活状态。本研究采用JC-1与碘化丙啶(propidium iodide,PI)2种荧光染料联合染色的方法,对6种不同保存条件下的猪精子进行染色,分别使用流式细胞仪与荧光显微镜2种检测手段对猪精子MMP进行检测。结果表明:死亡精子头部呈红色,高MMP精子尾部呈橙红色,低MMP精子尾部为绿色。2种检测手段的结果比较显示,荧光显微镜能够有效地区分出高、低MMP死精子,但对于活精子MMP的高低检测效果不甚理想。相反,流式细胞仪则能够有效地区分活精子MMP的高低,但对于死精子MMP高低的检测仍较困难。因此,对于猪精子线粒体MMP的检测,采用JC-1与PI双染的方法,用流式细胞仪与荧光显微镜进行联合检测,能比较全面的反映出精子线粒体的功能状态。

异搏定对小鼠肝癌腹水瘤细胞系PI-PLC活性的影响

本文采用615近交系小鼠肝癌腹水瘤H_(ca)-F_(25)/CL-A_2细胞,测定钙拮抗剂异搏定作用前后磷脂酰肌醇特异的磷脂酶C(PI-PLC)活性的变化,并与同样处理的瘤株内钙恒稳的有关指标相比较。结果表明经异搏定处理后的A_2细胞PI-PLC活性显著降低,并与钙恒稳的指标基本呈现相应的平行变化趋势。提示PI-PLC可能参与肿瘤细胞内钙恒稳的变化过程,异搏定的作用可能与磷脂酰肌醇信号传导系统相关。

PI-PLC基因调节植物花粉管生长作用的研究进展

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)能够水解植物细胞中的磷脂生成三磷酸肌醇(IP3),而IP3可以促进花粉管细胞中Ca^(2+)的释放,从而促进植物花粉管生长。深入了解PI-PLC调节植物生长的作用,从而为PI-PLC基因在植物生长中的进一步研究提供参考,从PI-PLC基因的定位与结构、PI-PLC与质膜的结合方式、IP3促进Ca^(2+)释放的途径以及PI-PLC调节植物花粉管极性生长的作用机制等方面进行综述,并对磷脂酶C的水解产物及其调控植物生长发育的分子机制研究进行了展望。

英文版NoK-PiC量表的汉化及信效度评价

目的:对英文版No K-Pi C量表进行汉化及信度、效度评价。方法:使用既定程序对31项英文版No K-Pi C量表进行汉化及信度、效度评价,方便抽取某市三级甲等医院关怀科101名参与住院病人照护的亲属进行问卷调查。采用探索性因子分析法评估量表的结构效度,采用内容效度指数、Cronbach’sα系数及Pearson相关系数对量表的内容效度、内部一致性信度和重测信度进行评价。结果:探索性因子分析得到7个公因子,分别代表量表的7个维度,累积解释总变异的77.09%,各量表条目因子载荷均>40%。量表内容效度指数为0.904,Cronbach’sα系数为0.910,总量表两次调查得分的Pearson相关系数为0.541(P<0.001)。“沟通与信任”“参与护理”2个子量表Cronbach’sα系数分别为0.890,0.833,子量表两次调查得分的Pearson相关系数分别为0.605,0.508(P<0.001),7个维度的相关系数为0.444~0.642(均P<0.001)。结论:中文版No K-Pi C量表可用于了解病人亲属对医院和关怀环境人文化管理的评价。

基于改进型模糊自整定PI控制的无刷直流电机PLC调速系统

针对无刷直流电机(BLDCM)在中低速运行过程中,电机转速存在波动且动态调速特性较差的问题,提出了一种将改进型模糊自整定PI控制与PLC相结合的BLDCM调速方案。改进型模糊自整定PI控制在传统PI控制的基础上引入积分重置环节,既能够对参数进行实时调节,又避免了控制过程中积分饱和的问题。用Visual C++编写控制程序对PLC进行模块化编程。通过试验,证明了改进型方法在电机中低速运行过程中,具有响应速度快、稳定性好、无超调量等优点。

基于PLC与组态技术的管道流量测控系统的研究

以20mm过程控制系统的管道流量系统为被控对象,以PLC作为控制器,变频器为执行对象,在建立流量系统的数学模型的基础上,采用PID算法,进行了参数整定,构建了系统的组态环境,并在该环境下进行了调试,系统运行平缓,控制指标达到了工程要求,调试效果良好。

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C对内毒素血症大鼠肝组织CD14表达的抑制作用

目的观察磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)对大鼠内毒素血症时肝组织中Kuffer细胞(KCs)的活性、CD14mRNA的表达和血浆细胞因子释放的作用。方法将Wistar大鼠90只,随机分为LPS组(静注LPS5mg/kg)、PI-PLC组(注LPS前30min注PI-PLC100U/kg)和生理盐水NS组。分别于注射前及注射后1、3、6和12h取材,每组每时相点6只,测定血浆内毒素(鲎试剂基质偶氮显色法)、LBP及TNF-α(均用ELISA法)和IL-6(放免法)的含量,用RT-PCR检测肝组织中CD14mRNA的表达,并观察其形态学变化。结果LPS组LBP、TNF-αI、L-6的含量和CD14mRNA的表达明显增加,并伴有KCs激活,数量增多,体积增大,吞噬功能增强,肝细胞出现变性和坏死等;而PI-PLC处理组所致的上述变化明显减轻。结论PI-PLC对内毒素所致肝组织内KCs的激活有一定抑制作用。

从桑白皮中提取药物成分桑根酮C

开发了从中药桑白皮中分离和精制桑根酮 C的工艺路线 .用紫外光谱、红外光谱、质谱以及核磁共振谱 (13 C- NMR与 1H- NMR)进行结构鉴定 ,证实其为桑根酮 C(Sanggenon C)

磷肌酰脂醇特异性磷脂酶C对内毒素介导枯否细胞激活的抑制作用

目的研究磷肌酰脂醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)对内毒素介导的肝Kupffer细胞(枯否细胞,KCs)激活及其CD14表达的抑制作用。方法Wistar大鼠20只,分为PI-PLC组和LPS组,测定细胞培养液中TNF-α和IL-6含量变化,用免疫组化观察KCs膜CD14和核NF-κB的相对活性,测定KCs中CD14、TNF-α和IL-6的mRNA表达和KCs膜CD14蛋白含量变化。结果不同浓度的LPS刺激60 min后,PI-PLC组培养液中TNF-α与IL-6的含量随LPS浓度的增高而增加,但明显低于LPS组(P<0.01);CD14抗体染色显示,PI-PLC组部分KCs为弱阳性,而LPS组KCs为阳性细胞;NF-κB P65抗体染色显示,PI-PLC组部分KCs为弱阳性细胞,而LPS组KCs为强阳性细胞;PI-PLC组NF-κB活性在10μg/mL以上LPS刺激下才有升高,其相对光密度值显著低于LPS组(P<0.01);在相同浓度LPS刺激后,PI-PLC组CD14、TNF-α和IL-6的mRNA表达显著低于LPS组(P<0.01);PI-PLC组在相同浓度LPS刺激120 min后CD14蛋白表达才明显,LPS组在100μg/mL LPS刺激后30 min CD14蛋白开始升高,两者有显著性差异(P<0.01)。结论PI-PLC对LPS介导的KCs激活有明显的抑制作用,其机制可能与抑制KCs中CD14蛋白的表达有关。

ControlLogix PLC及其分布式I/O在水电厂监控系统中的应用

ControlLogix PLC是美国罗克韦尔公司推出的大型可编程控制器,本文介绍了该PLC及其分布式I/O在水电厂监控系统中的应用。在满足对辅助设备的监控要求下,通过使用分布式I/O,简化了监控系统网络结构,减少了监控系统和辅助控制系统之间的转接设备,节约了建设成本,减轻了维护工作量。

基于Raspberry Pi 3的智能化盆栽管理设计

为解决用户对合理照顾盆栽感到困难的问题,本文基于树莓派的智能盆栽通过传感器检测空气温湿度、土壤湿度、光照等条件,并根据检测到的数据来实现自动浇灌,提醒用户将盆栽移动至合适的位置。本设计允许用户通过Web访问连接到智能盆栽进行管理,从而达到优化盆栽的生长条件的目的。

PI-强wrpp半群的构造

设S为一个半群.如果S中的每个L 类都含幂等元,就称S为一个wrpp半群.特别地,如果对任意的a∈S,集合Ia∩L a都只含唯一的元素a°,就称S为一个强wrpp半群.在S上通过一个非恒等置换σ,给出了PI 强wrpp半群的结构定理.

应激致高血压大鼠神经核团c-fos蛋白表达及细胞凋亡的研究

为探讨应激性高血压大鼠发病中血管紧张素II(AII)的作用,通过足底电击结合噪声刺激制备了应激性高血压大鼠,对急性应激大鼠不同时间血浆中的AII含量进行了测定.结果表明:应激刺激导致的高血压与血浆AII浓度增加有关,并与c-fos蛋白表达和细胞凋亡有关.中枢缰核、下丘脑外侧核、杏仁中央核、岛叶神经元等参与了此过程.

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine与脑膜瘤细胞增生的相互关系

目的研究蛋白激酶C信号传导系统在人体外低代培养脑膜瘤细胞增生中的调节作用。初步探讨蛋白激酶C抑制剂对培养的脑膜瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法选取手术切除的新鲜脑膜瘤组织,常规早期传代细胞培养方法。观察蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对细胞增殖的抑制率与基础磷脂酰肌醇(PI)转换率,比较分析上述两者间的相互关系。结果低代培养脑膜瘤细胞的增殖对蛋白激酶C抑制剂Staurosporine表现出剂量依赖性抑制效应。蛋白激酶C抑制剂对细胞增殖的抑制率与基础PI转换率之间存在正相关,r=0.58,P<0.01。结论蛋白激酶C信号传导系统介入人体外低代培养脑膜瘤细胞增生的调节。

脾虚证大鼠肝、脾组织蛋白激酶C活性变化的比较研究

目的探讨脾气虚证、脾阳虚证和脾阴虚证大鼠肝、脾组织蛋白激酶 C(PKC)活性变化的异同。方法采用饮食不节、疲劳过度和药物损伤等复合因素建立脾气虚证、脾阳虚证和脾阴虚证大鼠模型;采用底物磷酸化法检测 PKC 活性。结果脾气虚证、脾阳虚证和脾阴虚证模型脾组织细胞膜 PKC 活性明显降低(P<0.01),但组间比较差异无显著性(P>0.05);脾组织细胞浆和肝组织细胞膜(脾气虚证模型组除外)以及肝组织细胞浆 PKC 活性明显升高(P<0.01),除脾阴虚证模型与脾阳虚证模型脾组织细胞浆及脾气虚证模型与脾阴虚证模型肝组织细胞膜 PKC 活性无明显差异外,其余每两组之间均存在明显差异(P<0.01)。补脾中药对脾组织细胞浆、肝组织细胞膜和细胞浆 PKC 活性均有明显的降低作用(P<0.01),尤以温运脾阳及滋补脾阴药作用显著。结论脾气虚证、脾阳虚证和脾阴虚证模型肝、脾组织细胞 PKC 活性变化存在一定的差异;补脾中药能够调节脾虚证大鼠肝、脾组织 PKC 活性。

阿糖胞苷对HL60细胞增殖和凋亡及bcl-2基因表达的影响

目的探讨阿糖胞苷(Ara-C)对急性早幼粒白血病细胞HL60增殖、凋亡及bcl-2基因表达的影响。方法 Ara-c与HL60细胞共同孵育后,应用光学显微镜和透射电子显微镜观察细胞的形态学变化,通过四唑盐(MTT)法分析不同剂量Ara-C对细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术分析Ara-C对细胞凋亡和Bcl-2蛋白的影响,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究bcl-2基因表达的影响。结果 250μg／ml Ara-C对HL60细胞作用48 h后,光学显微镜下可见细胞呈核固缩、深染及染色质边集等多种形态改变,透射电子显微镜下可见典型的凋亡细胞,MTT检测显示Ara-C能明显抑制细胞的生长。流式细胞仪分析结果显示,细胞凋亡百分率随作用时间的延长而增加,而Bcl-2蛋白则随之下降。RT-PCR结果显示,bcl-2 mRNA的表达亦随着药物作用时间的延长而下降。结论 Ara-C能诱导HL60细胞凋亡,下调Bcl-2蛋白及bcl-2 mRNA水平。

基于Handel-C的FPGA直流电机比例微分控制器设计

应用定点数计算在Handel-C语言中,实现了在Xilinx公司的现场可编程门阵列(FPGA)芯片上的直流伺服电机角度位置控制的比例微分(PI)控制器。PI控制器大约占用了FPGA virtex v1000整个容量的1%,其最大时钟频率为4.6 MHz。通过设计对现场可编程门阵列在数字控制应用软件中的性能做出了评估。实验和仿真表明,对于一些常规数字控制应用软件来说,现场可编程门阵列具有足够强大的计算能力。

植物磷脂酶C在应答胁迫反应中的研究进展

磷脂酶C(phospholipase C,PLC)是参与脂质和Ca^(2+)依赖信号通路的重要调节酶,它能将磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP_(2))水解生成2个重要的第二信使分子:脂类的二酰甘油和可溶性分子肌醇1,4,5-三磷酸。磷脂酶C根据其水解磷脂的底物不同,可分为磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和非特异性磷脂酶C。植物PLC基因通过调控各种信号途径,从而在植物的非生物胁迫(渗透胁迫、低温胁迫、干旱胁迫等)以及生物胁迫的应答过程中具有重要作用。综述了植物磷脂酶C分类、结构、生化特性和生理功能,并对相关领域的研究方向进行了展望。

磷脂酰胆碱特异性和磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C酶学性质及其在油脂脱胶中的应用

通过基因工程方法将具有磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)特异性磷脂酶C(PC-PLC)和磷脂酰肌醇(PI)特异性磷脂酶C(PI-PLC)基因分别在枯草芽孢杆菌WB800中进行胞外表达。对2种重组蛋白粗酶的酶学性质进行研究,并探究其用于油脂脱胶中的效果。结果表明:PC-PLC和PI-PLC均在30～45℃和中性偏酸的条件下具有较好的稳定性,2 h后残余活性仍在60%以上。Zn^(2+)、Mg^(2+)对PC-PLC的活性有促进作用,而Ca^(2+)对PI-PLC的活性有促进作用。油脂脱胶研究结果表明,PC-PLC的最适脱胶条件为50℃、pH 6.0、反应2 h、酶添加量为80 mg/kg;PI-PLC的最适脱胶条件为45℃、pH 7.0、反应2 h、酶添加量为60 mg/kg。PC-PLC和PI-PLC联合脱胶实验中大豆毛油中磷含量从531 mg/kg降至4.1 mg/kg,此时甘油二酯(DAG)含量增加0.95%。

健脾清热活血方介导Wnt/β-catenin通路对人结肠SW480细胞的影响

目的:观察人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡及β-catenin、T细胞因子4(Tcell factor4,TCF-4)、C-myc、CyclinD1表达变化,探讨健脾清热活血方防治结肠癌的可能机制.方法:将SW480细胞分为空白组、治疗组、对照组;采用血清药理学方法,空白组给予胎牛血清;治疗组分别给予等比稀释不同浓度含药血清;对照组给予美沙拉嗪含药血清干预体外培养的结肠癌细胞SW480(24h),应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期,免疫荧光染色分析细胞β-catenin蛋白表达,Western blot及荧光定量PCR检测β-catenin、TCF-4、C-myc、CyclinD1蛋白及mRNA表达.结果:与空白组比较,治疗组SW480细胞存活率明显下降(P<0.05),稀释浓度为5%、10%、15%、20%、30%的不同剂量组细胞生长抑制率分别为28.00%、44.58%、65.86%、57.86%、49.89%,但与药物浓度没有剂量依赖性(P>0.05);与对照组比较,治疗组S期细胞增多、G1期细胞减少,且与药物浓度有剂量依赖性(P<0.05);空白组β-catenin表达以核内表达为主,治疗组β-catenin胞质/核异位表达下降(P<0.05),以胞膜表达为主;与空白组比较,治疗组可明显下调β-catenin、TCF-4、C-myc、CyclinD1蛋白及mRNA表达并促进细胞凋亡(P<0.01),以中剂量更为明显.结论:健脾清热活血方可能通过介导Wnt/β-catenin通路,干预SW480细胞G1期,诱导细胞凋亡,发挥防治结肠癌的效应.