利用分子标记辅助选择聚合Pi-1和Pi-2基因改良两系不育系稻瘟病抗性

以含广谱稻瘟病抗性基因Pi-1和Pi-2的BL122为供体,温敏核不育系GD-7S为受体,通过杂交、回交和自交并结合分子标记辅助选择,将Pi-1、Pi-2基因导入温敏核不育系GD-7S中,获得5个携带两个抗性基因的纯合改良不育株系。利用34个广东代表性稻瘟病菌株接种鉴定,5个改良株系的抗性频率为94.12%-97.06%,而对照GD-7S抗性频率仅为17.65%;自然病圃诱发鉴定5个改良株系的叶瘟和穗颈瘟均为0级,表现高抗。经自然条件和人工气候箱育性鉴定,改良株系与对照均为无或少花粉败育类型,自交结实率为0,说明不育起点温度与对照基本一致。统计分析表明,除剑叶长和每株穗数外,改良株系与对照在其他农艺性状方面均无显著差异。与恢复系L38杂交,改良株系的杂种F1与对照的F1大多农艺性状无显著差异,说明改良株系基本保持了GD-7S的农艺性状和配合力。

抗稻瘟病基因Pi-2(t)紧密连锁的SSR标记的筛选与应用

根据已报道的双侧连锁标记并利用已公布的水稻基因组序列信息,在广谱抗稻瘟病基因Pi-2(t)的附近找到了一个新的SSR标记,记为SRM24,估计它与Pi-2(t)间的距离大约只有0.5 cM或43 kb 。利用该标记,成功地将Pi-2(t)从供体材料5173导入到迄今广泛使用的雄性不育保持系珍汕97B中,获得了一批携有Pi-2(t)的珍汕97B近等基因系。

水稻稻瘟病抗性基因Pi-2(t)的精细定位

利用重组自交系群体对水稻稻瘟病抗性基因 Pi- 2 (t)进行精细定位 ,将 Pi- 2 (t)定位于分子标记 RG6 4和 AP2 2之间 ,遗传距离分别为 0 .9c M和 1.2 c M。该研究建立了 Pi- 2 (t)基因和分子标记之间的紧密连锁 ,为提高分子标记辅助选择育种的效率 ,以及克隆该基因奠定了基础。

水稻抗稻瘟病基因Pi-2(t)物理图谱的构建

应用BAC文库，采用基于分子标记的染色体着陆（marker-based chromosome landing）和染色体步查（chromosome walking）等手段，建立了包含有水稻抗稻瘟病基因Pi-2（t）的物理图谱，该物理图谱由22个BAC克隆组成，遗传跨度8cM，而物理距离为925kb，该物理图谱的构建不仅为进一步分离和克隆该基因打下了基础，同时也可为分子标记辅助选择育种选择抗稻瘟病新材料提供新的标记。

利用分子标记技术聚合Pi-1和Pi-2基因改良三系不育系荣丰A的稻瘟病抗性

以籼型水稻材料BL122为稻瘟病抗性基因的供体亲本,三系不育系荣丰A的保持系荣丰B为轮回亲本,通过常规杂交、回交、田间农艺性状筛选和分子标记辅助选择相结合,将Pi-1、Pi-2两个基因导入到荣丰B中,获得5个带有两个目标基因的改良保持系纯合株系。利用广东省致病性代表的30个稻瘟病菌株进行人工接种鉴定,5个改良株系的抗性频率均为100%,而原始对照荣丰B的抗性频率仅为56.67%;自然病圃诱发鉴定5个改良株系的穗颈瘟均为1级,表现高抗,而对照为7级,表现感病。所有改良保持系株系与荣丰A杂交和回交进行不育系转育,根据农艺性状综合评价,筛选出不育性彻底、后期熟色好的三系不育系安丰A。利用该不育系与一批恢复系配组,其杂交稻组合均表现出良好的稻瘟病抗性和丰产性,显示出很好的应用前景。

与Pi-2(t)基因连锁的栽培稻BAC克隆在药用野生稻和栽培稻中的比较物理定位

用栽培稻遗传图第 6连锁群中与 Pi- 2 ( t)紧密连锁的 RFL P标记 RG64及其筛选出来的 BAC克隆3 8D17作为探针 ,对药用野生稻和栽培稻进行荧光原位杂交 ( FISH) ,供试探针 RG64及 BAC克隆 3 8D17均被定位于药用野生稻和栽培稻第 6染色体 .药用野生稻杂交信号的百分距离分别为 4 4 .87± 5 .3 3和 4 6.5 0± 4 .5 7,而栽培稻则为 3 5 .85± 3 .0 6和 3 6.0 5± 2 .4 4 ,信号检出率相应地为 7.14 %、4 2 .5 3 %、8.0 9%和 4 0 .78% .BAC克隆和RFL P探针杂交位置几乎一致 ,由此推知 ,与抗性基因 Pi- 2 ( t)连锁的 BAC克隆在药用野生稻中的同源顺序就在第6染色体杂交信号出现的相应位置 .在未封阻的情况下 ,药用野生稻多个染色体上具有信号 ,这表明它和栽培稻的Cot- DNA重复序列在一定的程度上具有同源性 .文中讨论了栽培稻 BAC克隆对药用野生稻原位杂交物理作图的可行性和 Cot- DNA的制备所涉及的一些技术问题 .

黑龙江省主栽水稻品种抗稻瘟病基因Pi-2(t)的SSR检测分析

为合理搭配种植水稻品种,利用与抗稻瘟病基因Pi-2(t)紧密连锁的SSR标记AP22和SRM24检测49份黑龙江省主栽水稻品种(系)抗瘟基因Pi-2(t)的分布情况。结果表明:用2个与抗稻瘟病基因Pi-2(t)紧密连锁的SSR标记同时对抗瘟基因Pi-2(t)的检测是非常有效的方法,龙粳8号、绥粳4号、龙D99-709和垦676共4个水稻品种(系)检测出含有Pi-2(t)抗稻瘟病基因,并了解了该基因在黑龙江省水稻品种资源中的分布情况。

基于奶牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿rAP1-BP-AP2重组蛋白的间接ELISA方法的建立

为建立一种快速准确高效的检测奶牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿抗原相应抗体的检测方法,本研究以牛乳腺炎无乳链球菌Ia型PI-2a菌毛岛屿辅助蛋白AP1、AP2及骨架蛋白BP 3基因串联表达的重组蛋白为ELISA包被抗原,通过方阵滴定法优化反应条件,建立了奶牛乳腺炎无乳链球菌抗体的间接ELISA检测方法。优化后抗原的最佳包被量为5.0μg/孔,血清样品最佳稀释倍数为1∶40,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶5 000。对S.agalactiae、S.pyogens、E.coli、S.aureus、S.epidermidis阳性血清进行检测结果显示,后4种阳性对照血清未出现阳性反应,表明该方法具有良好的特异性;对已知牛无乳链球菌阳性血清倍比稀释后进行检测时,当稀释倍数达到1:12 800时仍出现阳性结果,表明该方法具有较高的敏感度;重复性试验显示批内变异系数为2.41%~8.89%,批间试验变异系数为7.53%~10.46%;用该方法对426份临床样品进行奶牛无乳链球菌抗体检测,结果显示,其样品阳性检出率为45.07%。本研究首次基于乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿三联重组蛋白建立的间接ELISA方法为奶牛无乳链球菌的快速检测提供了一种准确、可靠的检测方法。

PI/Bi_(2)WO_(6)复合物的制备及其光催化降解染料应用研究

通过光催化降解能有效处理有机染料污染物,从而解决水污染的问题。本文分别采用热解法和水热法制备聚酰亚胺(PI)和Bi_(2)WO_(6),再利用超声辅助沉积法制备PI/Bi_(2)WO_(6)复合物,并且对样品进行XRD、FT-IR、UV-DRS等表征。以罗丹明B(RhB)染料溶液作为水污染模型,考察了所制备的PI/Bi_(2)WO_(6)复合物对有机染料的光催化降解性能,发现各种比例的PI/Bi_(2)WO_(6)复合物的光催化活性均明显高于单体PI和Bi_(2)WO_(6),其中1∶2 PI/Bi_(2)WO_(6)复合物对RhB的降解效果最好。在50 mg 1∶2 PI/Bi_(2)WO_(6)催化剂作用下,对50 mL、浓度为20 mg·L^(-1)的RhB溶液光照24 min,降解率达到98.5%。循环实验表明,所制备的1∶2 PI/Bi_(2)WO_(6)复合光催化剂比单体Bi_(2)WO_(6)具有更高的稳定性。

水稻抗稻瘟病基因Pi-ta与Pi-ta^2之间的关系

该研究以含抗稻瘟病基因Pi-ta和Pi-ta2的水稻品种Katy和Kaybonnet为供体亲本的4个F2群体(含2516个单株)为材料,利用已建立的Pi-ta显性标记与Pi-ta2微卫星标记进行分子检测,结果发现,所有含Pi-ta基因的单株都具有Pi-ta2,不含Pi-ta基因的单株也无Pi-ta2,这表明,这两个基因紧密连锁或等位;稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)人工接种试验发现所有抗病单株都含Pi-ta基因,而感病单株则无.由此表明,在含2516个单株的F2群体中没有发生抗病基因的重组,这进一步验证这两个抗病基因等位或紧密连锁.

ERK2和PI-3K在小柴胡汤抗大鼠肝纤维化中的表达

目的观察小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝组织细胞外信号调节激酶2(ERK2)、磷酸肌醇-3激酶(PI-3K)表达的影响,探讨小柴胡汤治疗肝纤维化的分子机制。方法皮下注射10%四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,第9周开始四氯化碳给药同时给予小柴胡汤灌胃治疗6周。通过血清生化检测反映肝脏功能;HE染色法观察肝组织病理学变化;免疫组织化学方法观察肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,以反映肝星状细胞的活化情况;Real time RT-PCR观察ERK2、PI-3K mRNA的表达。结果与模型组相比,小柴胡汤中、高剂量组在血清学和组织学上均有明显改善,肝组织ERK2、PI-3K mRNA的表达明显减少,具有统计学意义。结论小柴胡汤抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化作用可能与干预Ras/ERK和PI-3K信号通路有关。

L-赖氨酸发酵的研究钝齿棒状杆菌PI-3-2的L-赖氨酸发酵中间生产试验

1978年我们完成了北京棒状杆菌AS 1.563发酵生产L-赖氨酸研究的扩大试验。为进一步提高L-赖氨酸产率和糖原料的转化率,采用钝齿棒状杆菌(Corynebacterium crenatum)PI-3-2进行了L-赖氨酸发酵中间生产的研究,现报道如下。

评估PI-RADSv2对不同部位前列腺临床显著癌的诊断效能研究

目的:评估前列腺癌(PCa)影像学报告和数据系统第2版(PI-RADSv2)对累及前列腺外周带(PZ)、移行带(TZ)和多区域(MZ)的前列腺临床显著癌(CSPCa)的诊断效能。方法:选取医院收治的109例疑诊PCa患者,行前列腺多参数磁共振成像(mpMRI)检查,应用PI-RADSv2对疑诊PCa患者MR图像进行诊断评估,将经直肠超声(TRUS)引导下前列腺系统穿刺活检的病理结果作为金标准,与MR影像诊断结果进行对照,评估PI-RADSv2与CSPCa的相关性。用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)描述PI-RADSv2对累及前列腺不同部位CSPCa的诊断效能。结果:经穿刺病理结果证实,CSPCa在本组患者发病率为61.5%。经PI-RADSv2诊断,根据前列腺不同部位,发现48例PZ区病变中可疑CSPCa病变评分4~5分为46例(占95.8%),病理诊断CSPCa为31例(占64.6%);17例TZ病变中,可疑CSPCa病变为9例(占52.9%),病理诊断CSPCa为5例(占29.4%);44例MZ病变中,可疑CSPCa病变为39例(占88.6%),病理诊断CSPCa为31例(占70.5%),前列腺PZ、TZ和MZ病变的PI-RADSv2均与CSPCa存在显著性相关(r=0.491,P<0.001)。PI-RADSv2诊断前列腺PZ、TZ和MZ病变的AUC分别为0.664、0.733和0.788;诊断灵敏度分别为58.1%、80.0%和93.6%;特异度分别为70.6%、58.3%及61.5%;阳性预测值(PPV)分别为78.3%、44.4%和85.3%;阴性预测值(NPV)分别为48.0%、87.5%和80.1%。结论:PI-RADSv2对前列腺不同部位CSPCa均有较好的诊断效能,在对CSPCa不同部位的诊断效能中MZ优于TZ和PZ。

应用PI-RADS version 2诊断前列腺癌在基层医院的应用价值

目的回顾分析应用第2版前列腺影像报告和数据系统(Prostate image reporting and data system,PI-RADS)在基层医院中诊断前列腺癌的价值。方法回顾性收集自2016年2月至今在我院行MR前列腺检查并有明确病理结果的20例病例,以病理结果为金标准,评价应用PI-RADS version 2诊断前列腺癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果 20例患者经病理学证实的前列腺癌为3例,其余为前列腺增生。应用PIRADS version 2诊断前列腺癌的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为100%、75%、75%和100%。结论应用PIRADS version 2对前列腺癌的诊断效能很高,值得在基层医院中推广。

快速响应恢复的PI-SiO_(2)/NiI_(2)比色湿度传感器

有机-无机杂化型比色湿度传感器可通过电学信号和颜色变化获取环境湿度,并因其特征颜色区分度高、稳定性好、制备工艺简单等优点,在湿度监测领域具有广阔的应用前景,但其通常响应恢复时间长,从而不利于湿度实时监测.本文在聚酰亚胺(PI)-碘化镍(NiI_(2))有机无机杂化材料中掺杂纳米SiO_(2)微球制备得到PI-SiO_(2)/NiI_(2)复合薄膜及比色湿度传感器,对其表面形貌和湿敏特性进行了研究.结果显示,PI-SiO_(2)/NiI_(2)薄膜具有蜂巢状的表面形貌,传感器的特征颜色显著,湿度响应时间小于1.5 s,恢复时间小于18 s.研究表明,纳米SiO_(2)微球掺杂能够较为显著地改善有机-无机杂化型比色湿度传感器的响应恢复特性,这对于传感器性能的提升具有一定参考意义.

利用回交和MAS技术改良优质两系不育系金山s-2的稻瘟病抗性

以水稻品系5173为抗性供体亲本,通过连续回交和MAS技术将稻瘟病抗性基因Pi-2导入优质低温敏核不育系金山s-2的遗传背景中。在各世代皆利用与Pi-2紧密连锁的SSR标记SRM24对目标基因进行"前景选择",并结合形态性状进行"背景选择",直至BC3F2,获得抗病标记纯合且其它性状与金山s-2非常相似的植株9株。在BC3F1,对中选的4个单株利用SRAP标记进行遗传背景分析表明,它们与受体亲本金山s-2具较高的遗传相似系数;对选育出的株系的温敏不育性特性观察表明,获得的4个近等基因系,它们保持了亲本育性稳定、临界温度低和可繁性好的特性;对BC3F1∶2株系抗病鉴定结果表明,通过标记选出的单株均表现抗病,说明利用SRM24对Pi-2基因进行选择是可靠的,能够满足需要。因此,在BC3F1决选出4个单株可望替代不抗病的金山s-2直接应用于生产。

CO_(2)激光直写PI薄膜温度、应力场仿真与分析

CO_(2)激光直写诱导碳基前驱体生成石墨烯过程中,温度与应力是影响石墨烯生成质量的主要因素。利用COMSOL Multiphysics仿真软件,建立连续CO_(2)激光作用于聚酰亚胺(PI)薄膜温度场与应力场模型,研究激光功率、光斑直径、扫描速度对平均升温速率(δ)及热应力的影响,并根据石墨烯生成温度阈值与薄膜受损温度阈值筛选出合理参数范围。仿真结果表明:在重复扫描策略下,薄膜正面平均升温速率δ1与激光功率呈线性正相关关系,与光斑直径呈指数下降关系,与扫描速度呈幂函数单调递减关系,δ1的较优范围为93.6℃/s≤δ_(1)≤147.8℃/s;背面平均升温速率δ2与激光功率呈线性正相关规律,与光斑直径呈二次函数单调递减规律,与扫描速度呈线性负相关规律,δ2的较优范围为69.5℃/s≤δ_(2)≤86.9℃/s。激光功率是影响热应力的主要因素,仿真结果与结论可为PI薄膜激光诱导石墨烯研究提供参考。

绞股蓝总皂甙对小鼠产生白细胞介素2(IL-2)的增强效应

大黄脾虚模型小鼠IL-2活性比正常小鼠明显降低;绞股蓝总皂甙10～80mg/L以及100～200mg/kg在体外、体内可协同ConA使正常小鼠脾细胞产生之IL-2明显提高;10～40mg/L和50～200mg/kg在体外、体内也能协同ConA使大黄脾虚模型小鼠低下的IL-2活性提高,并恢复至接近正常水平。绞股蓝总皂甙能使脾虚小鼠低下的IL-2提高的实验结果进一步提示IL-2可能与机体的“正气”和“脾”的本质存在某种内在联系,也可能是中医“脾气”的免疫学物质基础之一。

20 例腹腔镜胆囊切除术中 PetCO_2 与 PaCO_2 的关系探讨

选２０例全麻下行腹腔镜胆囊切除术（ＬＣ）患者，观察ＣＯ２气腹后ＰｅｔＣＯ２与ＰａＣＯ２的关系。结果显示气腹后１５、３０分钟ＰｅｔＣＯ２与ＰａＣＯ２均呈密切相关（Ｐ＜０．０１），Ｐａ－ｅｔＣＯ２计算值（为０．４４±０．３２，０．４５±０．４１）极小。说明ＬＣ中ＰｅｔＣＯ２与ＰａＣＯ２值基本接近，动态观察ＰｅｔＣＯ２变化值可代替ＰａＣＯ２监测。

苦参碱对NCI-N87胃癌细胞增殖凋亡及bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨不同浓度苦参碱对体外培养的人胃癌细胞NCI-N87的增殖、凋亡及bcl-2蛋白表达的影响。方法:NCI-N87细胞经不同浓度苦参碱处理后,采用CCK-8法检测药物对肿瘤细胞的抑制作用,显微镜观察细胞形态学改变;应用流式细胞仪分析苦参碱对细胞凋亡和bcl-2蛋白的影响。结果:苦参碱浓度>3mg/mL,细胞毒作用较大;浓度在0.5～2.0mg/mL时,对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且呈时间剂量依赖性;浓度在0.1mg/mL,对肿瘤细胞生长几乎无抑制作用。流式细胞仪分析结果显示,细胞凋亡百分率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增加,而bcl-2蛋白则随之下降。结论:苦参碱对人胃癌细胞NCI-N87增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡,下调bcl-2蛋白水平。