PI3K&mTOR双重抑制剂Apitolisib的合成工艺改进

PI3K&mTOR双重抑制剂有望克服PI3K抑制剂耐药性等问题。Apitolisib为PI3K&mTOR双重抑制剂,目前处于临床Ⅱ期。以7-甲基噻吩[3,2-d]嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮(2)为原料,经氯代、取代、甲酰化、还原胺化和Suzuki反应等5步反应制得Apitolisib,并对其中的氯代,Suzuki反应进行了工艺的优化,反应总收率达32.0%。化合物结构经过1H-NMR,MS,HPLC确证。本工艺相比较于较原工艺具有反应时间短、操作步骤简单、收率较高等优点。

LED光源照射及PI3K抑制剂对人视网膜色素上皮细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨LED光源照射对人视网膜色素上皮(RPE)细胞自噬和凋亡的影响,以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002在光照下对RPE细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养人ARPE-19细胞,随机分为6 h对照组、6 h模型组、6 h LY294002组,12 h对照组、12 h模型组、12 h LY294002组,24 h对照组、24 h模型组、24 h LY294002组,分别给于设定时间的LED冷光照射或加入LY294002后的光照。采用噻唑蓝法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;透射电子显微镜观察各组细胞超微结构;构建稳定表达红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的RPE细胞株,激光共聚焦合倒置荧光显微镜分析细胞自噬流变化;Western blot法检测苄氯素1(Beclin 1)、LC3和p62自噬相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,6、12、24 h模型组细胞存活率均下降(均P<0.05),12、24 h LY294002组细胞存活率均下降(均P<0.01);与模型组比较,12、24 h LY294002组细胞存活率均升高(均P<0.05)。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞凋亡率均升高(均P<0.05);与模型组比较,6、12 h LY294002组细胞凋亡率均下降(均P<0.05)。模型组RPE细胞在光照24 h后,胞内可见较多的自噬泡,LY294002干预后也可见聚集性分布的自噬囊泡。观察自噬流发现,对照组少见红色亮点,模型组红色亮点荧光随光照时间延长数量逐渐增多,Merge图中黄色亮点数量增多明显,LY294002干预后,红色亮点与黄色亮点呈增多趋势。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均升高,p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,6、12、24 h LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均升高,12、24 h LY294002组细胞中p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论LED光源照射可刺激ARPE-19细胞发生自噬,增加细胞凋亡率;PI3K抑制剂LY294002能上调细胞的自噬活性,减缓凋亡。

PI3K抑制剂林普利塞对弥漫大B细胞淋巴瘤的体外抗肿瘤效应

目的探讨PI3K抑制剂林普利塞(Linperlisib,YY-20394)对弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)的抗肿瘤效应及其作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度YY-20394对SU-DHL-4细胞(GCB亚型)和U2932细胞(ABC亚型)增殖能力的影响,并计算出24 h时药物的IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)。采用流式细胞术检测IC_(25)、IC_(50)和IC_(75)浓度YY-20394对SU-DHL-4细胞和U2932细胞凋亡的影响。采用高通量RNA测序技术(RNA-Seq)检测药物作用前后各组细胞基因表达的变化,对差异表达基因进行KEGG信号通路分析和GO富集分析,并且对各组细胞基因表达数据进行GSEA富集分析。结果在YY-20394作用下,SU-DHL-4细胞增殖抑制率和细胞凋亡率增加(P<0.05),但U2932细胞增殖及凋亡能力未发生明显改变(P>0.05)。KEGG和GO富集分析结果显示,YY-20394对SU-DHL-4细胞的抗肿瘤作用涉及多条信号通路,其中PI3K-AKT、MAPK、JAK-STAT等信号通路的活性下调,且可能通过影响醇类物质合成等细胞生物学功能发挥作用;而U2932细胞中未富集到具有显著差异的信号通路。GSEA富集分析显示PI3K-AKT信号通路在SU-DHL-4细胞中的活化水平显著低于U2932细胞。结论PI3K抑制剂YY-20394通过影响PI3K-AKT等肿瘤相关信号通路,对GCB亚型的SU-DHL-4细胞产生抗肿瘤效应,而对ABC亚型的U2932细胞不敏感。

用于肿瘤治疗的PI3K/mTOR双重抑制剂的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路与细胞周期、血管形成、肿瘤发生和侵袭的关系密切,针对该通路的抑制剂近年也有不同程度的发展,抗肿瘤治疗前景看好。PI3K/mTOR双重抑制剂已成为抗肿瘤药物研发的热点之一。本文对PI3K/mTOR双重抑制剂的最新研究进展进行了综述,同时简要介绍了磷脂酰肌醇3-激酶,雷帕霉素靶蛋白的相关内容。

自噬抑制剂3-MA联合PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235促进宫颈癌细胞凋亡的实验研究

目的分析PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235与自噬抑制剂3-MA对人宫颈癌Si Ha细胞凋亡的协同作用。方法将人宫颈癌Si Ha细胞分别采用PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235、自噬抑制剂3-MA、NVP-BEZ235联合3-MA进行处理,比较细胞的生存水平、凋亡水平、相关凋亡蛋白的表达水平。结果人宫颈癌Si Ha细胞经不同浓度的NVP-BEZ235处理1 d后,细胞增殖率下降,而细胞凋亡率升高,且呈现剂量依赖性。Western blot结果显示NVP-BEZ235处理呈剂量依赖性地下调Bcl-2表达,同时上调了Bax表达。与对照组相比,3-MA单独处理对细胞的增殖,凋亡及凋亡蛋白表达无显著影响。与NVP-BEZ235组相比,3-MA联合NVP-BEZ235处理导致细胞增殖率下降,细胞凋亡率提高,Bcl-2表达降低,而Bax表达升高。结论3-MA联合NVP-BEZ235可进一步抑制细胞增殖,促进宫颈癌细胞凋亡。本研究为宫颈癌的治疗提供一种潜在的联合治疗方案。

PI3K-mTOR双重小分子抑制剂的研究进展

PI3K脂激酶家族介导的细胞信号转导通路,调节细胞增殖、分化、凋亡等一系列活动,已经成为治疗肿瘤、炎症等疾病的重要靶标。近来出现了多种结构类型的该通路抑制剂,笔者总结了近年内进入临床研究的具有PI3K-mTOR双重抑制活性的小分子化合物。

小分子PI3K/mTOR双重抑制剂研究进展

PI3K-Akt-mTOR信号通路是细胞内的重要传导通路,且研究发现该通路在肿瘤细胞中高度表达,与肿瘤形成有着密切的联系,抑制该信号通路已经成为肿瘤预防和肿瘤靶向治疗的研究热点。PI3K-Akt-mTOR通路抑制剂主要分为四类:PI3K抑制剂、Akt抑制剂、mTOR抑制剂和PI3K/mTOR双重抑制剂。其中,与单一靶点小分子抑制剂相比,同时作用于PI3K和mTOR双靶点的双重抑制剂以其独特的优势受到了越来越多的关注。本文阐述了近年来小分子PI3K/mTOR双重抑制剂的研究进展。

PI3K/Akt信号通路抑制剂在妇科恶性肿瘤治疗中的研究进展

PI3K/Akt信号通路在细胞生长、增殖、迁移、代谢和分泌等各种细胞调控过程中起着至关重要的作用。PI3K/Akt信号转导是一种致癌途径,多项研究表明,PI3K/Akt信号转导的激活有利于增加肿瘤细胞的增殖和转移以及诱导治疗耐药性,这使得PI3K/Akt信号通路可成为肿瘤诊断及治疗的新靶点之一,因此,该通路的药物靶点有望成为癌症防治的有效临床治疗方法。PI3K/Akt信号通路抑制剂包括泛PI3K抑制剂(pan-PI3Ki)、亚型特异性PI3K抑制剂(IS PI3Ki)、双PI3K/mTOR抑制剂和Akt抑制剂。其中泛PI3K抑制剂是研究最多的药物。本文综述了PI3K/Akt信号通路抑制剂在疾病中的分子机制及其与妇科恶性肿瘤的关系,为妇科恶性肿瘤的治疗提供新的选择。

基于1H-吡唑并[3,4-b]吡啶母核PI3Kδ抑制剂的设计合成

恶性肿瘤严重危害人类健康与生命,磷脂酰肌醇-3激酶家族(PI3Ks)在细胞增殖、分化过程中起着重要作用,该激酶及其相关通路的其他激酶可被药物干预,是抗癌药物的热门靶点。在以往的PI3K抑制剂中,均有1H-吡唑并[3,4-b]吡啶母核,通过虚拟筛选以及合成路线设计,合成了一系列1H-吡唑并[3,4-b]吡啶类化合物,该类化合物可能对PI3Kδ具有潜在抑制作用。

PI3Kα抑制剂联合程序性死亡受体-1抗体在宫颈癌治疗中的研究探讨

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一。宫颈癌的发病主要与生殖道人乳头瘤病毒(HPV)长期感染有关,激活PI3K通路,促进宫颈癌变的发生。宫颈癌的治疗以手术为主,辅助放化疗、靶向及免疫治疗。早期宫颈癌治愈率较高,5年生存率>90%^([1]),而晚期及复发性Ⅳ期宫颈癌5年无进展生存率显著下降,仅约10%^([2])。提高晚期复发性宫颈癌的疗效成为现今面临的难点及挑战。宫颈癌PI3K通路的激活,促使程序性死亡配体-1(PD-L1)表达水平升高,成为宫颈癌免疫治疗靶点,提高了复发转移性宫颈癌的免疫治疗效果,但程序性死亡受体-1(PD-1)单克隆抗体单药治疗复发或转移性宫颈癌患者的疗效并不是很令人满意。如何提高复发或转移性宫颈癌的免疫治疗反应率,优化免疫治疗组合方法是提高抗肿瘤疗效的未来发展方向。本研究旨在探讨PI3Kα靶向抑制剂联合PD-1抗体能否提高复发转移性宫颈癌中疗效,并为未来优化免疫组合治疗提供选择。

西安交大药学院李义平教授团队在PI3Kα选择性抑制剂发现领域取得重要进展

磷脂酰肌醇-3-激酶α(PI3Kα)的过度活化是多种实体瘤存活、增殖和生长的关键途径。PI3Kα作为抗肿瘤治疗的重要靶点,其高选择性抑制剂的发现成为抗肿瘤药物研发的热点,也是难点。Alpelisib是全球首个,也是唯一上市的PI3Kα选择性抑制剂,而我国尚无上市的自主知识产权的PI3Kα选择性抑制剂。

PI3K/AKT/mTOR信号通路及PI3K/mTOR双重抑制剂在胃癌中的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[phosphatidylinositol-3-kinase(PI3K)/proteinkinase B(Akt)/the mammalian target of Rapamycin(mTOR),P I3 K/Akt/mTOR]信号通路在细胞的生长、增殖、凋亡、血管生成等过程扮演着重要的角色,该通路紊乱可引起多系统疾病,并且与肿瘤密切相关。随着对该信号通路的深入研究,靶向PI3K/Akt/mTOR途径的抑制剂已成为抗肿瘤的研究热点。有研究报道,该通路的异常活化在胃癌的发生、发展中起着至关重要的作用,并与预后相关,一些抑制剂已进入胃癌的临床试验中,尤其是PI3K/mTOR双重抑制。本文就该通路及PI3K/mTOR双重抑制在胃癌中的研究进展作一综述。

PI3K抑制剂对四氯化碳刺激的肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响

目的探讨PI3K抑制剂对四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)增殖和Ⅰ型胶原表达的影响,为肝纤维化的治疗提供理论基础。方法将液氮保存下的HSC株,于37℃,50mL/L CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白对照组、CCl4组、CCl4+1μmol/L PI103组、CCl4+2μmol/L PI103组、CCl4+4μmol/L PI103组,分别培养48h。用透射电子显微镜初步观察了细胞形态改变;MTT比色法测定细胞增殖情况;免疫细胞化学测定细胞的Ⅰ型胶原表达情况。结果 CCl4组与空白对照组比较,细胞生长旺盛,细胞数目增多,Ⅰ型胶原表达增多;透射电子显微镜下可见CCl4+4μmol/L PI103组比CCl4组凋亡细胞显著增多,细胞数目减少;MTT和免疫细胞化学实验结果显示,与CCl4组比较,CCl4+1μmol/L PI103组、CCl4+2μmol/L PI103组、CCl4+4μmol/L PI103组细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,随着PI103剂量加大,细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,但CCl4+4μmol/L PI103组和CCl4+2μmol/L PI103组比较,细胞的增殖无明显变化。结论 PI3K抑制剂PI103可抑制活化的HSC的增殖,促进其凋亡以及减少其Ⅰ型胶原的表达。

PI3K/AKT抑制剂对前列腺增生的影响及机制研究

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB或PI3K/AKT)信号通路抑制剂对前列腺增生的影响及机制。方法:选用鼠龄12周的雄性SD大鼠48只,随机分为4组:假手术对照组;BPH模型组;LY294002 50 mg组和LY294002 100 mg组,每组12只。大鼠去势后肌注丙酸睾酮10 mg/(kg.d)连续30 d建模,LY294002 50 mg组和100 mg组同时肌注LY294002 50 mg/kg和100 mg/kg,隔日1次。给药30 d后,切除各组大鼠前列腺组织,称取前列腺重量,切片观察前列腺组织细胞结构变化。免疫组化法检测K i-67、凋亡相关蛋白Bc l-2与Bax的表达情况;核酸末端原位标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果:各组大鼠前列腺湿重(mg)和前列腺指数:假手术对照组:551±10.8,1.61±0.05;模型组:687±13.8,2.15±0.12;LY294002 50 mg组:623±23.5,1.95±0.11,与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:561±12.6,1.71±0.18,与模型组相比,差异具有极显著性(P<0.01)。凋亡相关蛋白Bax与Bc l-2的表达:假手术对照组:16.7%,16.7%;模型组:16.7%,58.3%;LY294002 50 mg组:33.3%,33.3%,与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:50.0%,25.0%,与模型组相比,差异极有显著性(P<0.01)。增殖和凋亡指数(%):假手术对照组:上皮组织14.2±6.4,6.5±1.8,间质组织7.6±2.6,2.5±0.3;模型组:上皮组织50.9±12.8,2.7±1.4,间质组织16.5±5.7,1.3±0.8;LY294002 50 mg组:上皮组织32.0±13.8,6.2±2.5,间质组织12.1±3.8,1.6±1.1;与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:上皮组织17.8±14.7,7.4±3.6,间质组织9.5±3.4,2.2±1.3;与模型组相比,差异有显著性(P<0.05)或极显著性(P<0.01)。结论:前列腺增生动物模型前列腺细胞增殖增加和凋亡的相对减少参与了BPH的发生发展过程。PI3K/AKT介导的信号通路在前列腺增生的发生发展过程中起重要作用,阻断PI3K/AKT信号通路具有抑制前列腺增生的作用。

PI3K-Akt-mTOR通路及其小分子抑制剂的研究进展

磷脂肌醇(PI3K)-蛋白激酶B(PKB,Akt)-雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)通路在细胞的存活、增殖和分化等过程中发挥关键作用。PI3K-Akt-mTOR信号通路的异常激活和人类肿瘤的发生密切相关,许多靶向该通路的小分子抑制剂已经进入临床试验中。本文将对近年来PI3K-Akt-mTOR信号通路与肿瘤的关系及PI3K-Akt-mTOR抑制剂抗肿瘤作用研究进展,并结合本课题组的相关研究成果进行综述。

靶向PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂的研究进展

PI3K-Akt-mTOR信号通路控制着众多在肿瘤发生发展中至关重要的细胞生物学过程,包括细胞凋亡、转录、翻译、代谢、血管新生以及细胞周期的调控。遗传学上的改变和生化条件引起的激活经常发生在恶变早期和肿瘤进展期,同时,信号通路激活程度也是肿瘤患者预后的重要指标。因此抑制该信号通路成为肿瘤预防和肿瘤靶向治疗的热点。对于该信号通路的各个激酶,均有多种抑制剂处于临床前和临床研究阶段。

PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制剂与肿瘤免疫治疗

磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-AKT-mTOR)信号通路的上游通路主要包括表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)、肝细胞生长因子受体(MET)和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)等各类受体的酪氨酸激酶,其受体的突变、扩增常会导致PI3K-AKT-mTOR信号通路的失调,引起肿瘤发生发展。该通路异常激活常伴随着下游关键分子的改变包括PIK3CA、AKT1、PTEN的基因突变,PIK3CA、AKT1、AKT2的基因扩增,肿瘤抑制基因PTEN的缺失等。PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制剂主要包括PI3K抑制剂、AKT抑制剂、mTOR抑制剂和双重抑制剂等。PI3K-AKT-mTOR抑制剂对肿瘤免疫微环境、免疫细胞均有显著影响。PI3K-AKT-mTOR抑制剂单药治疗肿瘤具有一定局限性,如联合DC疫苗、免疫检查点抑制剂和CAR-T细胞等免疫疗法可增强抗肿瘤疗效。

PI3K抑制剂联合Ad-PTEN对裸鼠移植胶质瘤的治疗作用

目的本研究旨在观察磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002联合含PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)对人脑胶质瘤裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用,初步探讨其可能的作用机制。方法将实验动物24只随机分为4组,即胶质瘤模型给予DMSO对照组、空载对照组、LY294002治疗组及LY294002与Ad-PTEN联合治疗组。皮下接种LN229人脑胶质瘤细胞建立胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型,定期测量动物体质量及肿瘤直径;应用免疫组化法检测肿瘤细胞的PTEN、p-Akt、PCNA、CyclinD1、Caspase-3、MMP-2、p-FAK的表达水平。结果联合治疗组对人脑胶质瘤裸鼠移植瘤抑制作用较对照组及LY294002治疗组均明显增强(均P<0.01);与对照组及LY294002治疗组比较联合治疗组Caspase-3、PTEN表达显著升高(均P<0.05),p-Akt、CyclinD1、MMP2、p-FAK的表达均显著下降(均P<0.05)。结论LY294002与Ad-PTEN联合治疗可以提高对裸鼠移植人脑胶质瘤的抑制作用。

选择性PI3K抑制剂的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是细胞内重要的信号转导分子,在细胞存活、增殖和分化过程中起重要调节作用。PI3K是PI3K/AKT/mT0R信号转导通路中的关键节点蛋白,调控着重要的生命活动。现已证实磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)是潜力巨大的药物治疗靶点,特别是PI3Kα现己成为抗肿瘤治疗的重要靶点之一。目前己有多种针对PI3Ks的抑制剂进入临床研究。然而现有抑制剂的化学类型不多且选择性不高、临床应用受局限。因此积极研究和开发结构新颖的PI3K选择性抑制剂对于疾病的靶向治疗具有重要意义。本文将对选择性PI3K抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述。

PI3K/Akt/mTOR信号通路及mTOR抑制剂在泌尿系统肿瘤中的研究进展

PI3K/Akt/mTOR信号通路在血管生成、蛋白合成以及细胞生长代谢中发挥着关键作用,在多种实体性恶性肿瘤中已发现该信号通路调节异常。随着PI3K/Akt/mTOR信号通路相关抑制药物的相继问世,尤其是在治疗晚期肾癌中显示出一定的临床疗效,对该通路以及相应抑制药物的深入研究,特别是在泌尿系统肿瘤的应用,成为热点之一。该文总结了PI3K/Akt/mTOR信号通路的发生机制及其在肿瘤形成过程中的作用,并就mTOR抑制剂在泌尿系统肿瘤中的研究进展进行综述。