PI3Kγ抑制剂AS605240对小鼠自身免疫性心肌炎的治疗研究

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)小分子抑制剂AS605240对自身免疫性心肌炎(EAM)的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法BALB/c小鼠随机分为AS605240组、EAM模型组和对照组。前两组小鼠分别于第0、7d在腹股沟和腋下皮下多点注射0.2mL乳浊剂(含与心肌肌球蛋白抗原表位具有相同氨基酸序列的多肽100ng)制备EAM模型;对照组在相同部位给予等量的完全弗氏佐剂(CFA)与磷酸盐缓冲液(PBS)的混合物。免疫后AS605240组给予AS60524050mg/(kg·d)一次性灌胃给药,EAM模型组给予等体积0.5%羧甲基纤维素,给药21d后处死小鼠,称取心脏质量和小鼠体质量,心脏HE切片观察心肌炎症程度并评分;免疫组化检测AS605240对心肌内的巨噬细胞浸润情况的影响;ELISA检测AS605240对心肌组织中TNF-α含量的影响;体内和体外趋化实验检测AS605240对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)诱导的巨噬细胞趋化的影响。结果AS605240使EAM小鼠的心肌炎病理评分及心脏质量/体质量比值降低(P<0.01);免疫组化实验结果显示巨噬细胞对心肌组织的浸润减少;ELISA结果显示AS605240下调了心肌组织中TNF-α的产生(P<0.01);巨噬细胞体内和体外趋化实验结果显示AS605240抑制了MCP-1诱导的巨噬细胞的趋化(P<0.01)。结论AS605240能够有效治疗EAM,其机制与抑制巨噬细胞趋化和对心肌组织的浸润,以及抑制心肌组织中TNF-α产生有关。