PI3Kδ过度活化综合征7例报道

目的总结7例PI3Kδ过度活化综合征(activated phosphoinositide 3-kinase delta synd rome,APDS)患儿的临床资料,提高对该病的认识。方法回顾性分析2019年1月—2023年8月湖南省人民医院收治的7例APDS患儿的临床资料。结果7例患儿(男4例,女3例)中位发病年龄为30个月,中位诊断年龄为101个月。临床表现:反复呼吸道感染、肝脾大及多部位淋巴结肿大7例,脓毒血症5例,中耳炎及多发性龋齿3例,腹泻及关节痛2例,淋巴瘤、系统性红斑狼疮各1例。4例患儿行纤维支气管镜检查,管腔内均可见大量散在的结节样突起。最常见的呼吸道病原为肺炎链球菌(4例)。6例患儿为p.E1021K位点错义突变,1例为p.434-475del位点剪切突变。结论p.E1021K是APDS患儿最常见的突变位点。对于具有反复呼吸道感染、肝脾大、多部位淋巴结肿大、中耳炎、龋齿等表现1项或多项,且纤维支气管镜下见散在结节样突起的患儿,需警惕APDS。

雷帕霉素治疗PIK3CD基因突变致PI3Kδ过度活化综合征4例病例系列报告

背景PI3Kδ过度活化综合征(APDS)采用传统治疗方案预防感染的疗效欠佳,近年来雷帕霉素被用于PIK3CD基因突变所致的APDS1患儿的临床治疗。目的探讨雷帕霉素治疗APDS1的疗效和安全性。设计病例系列报告。方法纳入2017年6月至2023年6月在浙江大学医学院附属儿童医院经基因检测确诊为APDS1且口服雷帕霉素治疗的连续病例。国内儿童雷帕霉素治疗APDS引起的非肿瘤性淋巴细胞增生,仍属于超说明书用药,用药前家长均充分了解用药风险并签署了知情同意书。雷帕霉素口服剂量为1 mg·m^(-2)·d^(-1)。主要结局指标①12个月内发生肺炎的次数;②B超评估肝、脾、淋巴结肿大情况。结果4例使用雷帕霉素治疗的APDS1患儿中,男3例、女1例,发病年龄为(35.5±17.9)月龄,确诊年龄(56.5±35.0)月龄;全外显子组测序均显示PIK3CD基因c.3061G>A(p.E1021K)新发杂合突变;均因“反复咳嗽”就诊,均有肝、脾、淋巴结肿大;均有肺炎,反复腮腺炎2例,伴特异性皮炎、炎症性肠病和韦格纳肉芽肿病各1例,生长迟缓2例;4例均行支气管镜检查,3例有支气管内膜鹅卵石样凸起;均有CD19+B细胞比例下降、CD4^(+)/CD8^(+)倒置,3例IgM升高,1例IgG下降。在雷帕霉素治疗前均予IVIG、抗感染、糖皮质激素等治疗,治疗后仍有反复呼吸道感染、肝脾肿大,且3例出现PLT减少,2例出现贫血。4例患儿确诊后1~44个月起口服雷帕霉素,疗程12~58个月。雷帕霉素治疗后12个月肺炎年均次数由5.3次降至1.0次,肝、脾和浅表淋巴结肿大均明显改善,Hb和PLT均恢复至正常水平,但免疫学指标在治疗前后比较差异均无统计学意义。随访期间未发现雷帕霉素相关不良反应,无发生肿瘤及死亡病例。结论雷帕霉素对APSD1有一定疗效且相对安全。

中医滋阴潜阳法对多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗大鼠PI3K/Akt信号通路、性激素及胰岛素相关指标的影响

目的探讨中医滋阴潜阳法对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠的磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路、性激素及胰岛素相关指标的影响。方法以来曲唑加高脂饲料诱导建立多囊卵巢及胰岛素抵抗双重大鼠模型。采用滋阴潜阳法配合达英-35及二甲双胍干预,用免疫荧光法测定卵巢PI3K、Akt通路信号,实时荧光定量PCR检测卵巢PI3K、Akt途径信号分子mRNA表达及PI3K、Akt、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)、胰岛素受体(insulin receptor,INSR)蛋白表达,性激素、胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1),胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI),观察卵巢组织形态变化。结果中医滋阴潜阳法能显著增加卵巢PI3K、Akt mRNA相对表达量(P<0.05),并能显著增加卵巢PI3K、Akt蛋白表达,上调IRS-1、INSR,降低血清睾酮(testos teron,T)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)含量,调节ISI,增加卵巢颗粒细胞层数及黄体组织数量。结论中医滋阴潜阳法可提高PI3K/Akt通路信号表达水平,改善胰岛素抵抗及卵泡颗粒细胞功能,调节促黄体生成素/卵泡刺激素(LH/FSH)比值,控制LH异常增高,调节多囊卵巢综合征及胰岛素抵抗。

隐丹参酮调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对心肾综合征大鼠心肾功能的保护作用

目的探究隐丹参酮(CTS)调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对心肾综合征(CRS)大鼠心肾功能的保护作用及机制。方法采用左冠状动脉前降支结扎结合肾急性缺血再灌注损伤的方法建立大鼠CRS模型,并将模型大鼠随机分为CRS模型组(CRS组)、低剂量CTS干预组(CTS-L组)、高剂量CTS干预组(CTS-H组)和高剂量CTS+PI3K激活剂740Y-P组(CTS-H+740Y-P组),每组12只;另设12只大鼠为正常对照组(Normal组),手术但不造模。CTS-L组、CTS-H组大鼠分别灌胃30、60 mg/kg CTS,每日1次,连续14 d;CTS-H+740Y-P组除灌胃CTS 60 mg/kg外,还需腹腔注射10 mg/kg 740Y-P,每日1次,连续14 d。末次给药后,检测大鼠心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)]和肾功能指标[24 h尿蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、脑钠肽(BNP)]水平;观察大鼠心肾组织病理学变化和纤维化情况;检测大鼠心肾组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果与Normal组比较,CRS组大鼠LVEF、LVFS均显著降低(P<0.05);LVESD、LVEDD、24 h尿蛋白,血清BUN、Scr、BNP水平,心肾组织胶原染色面积,心肾组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平均显著升高/增大(P<0.05);心肌细胞形态肥大、排列紊乱;肾小管结构紊乱、上皮细胞皱缩,存在炎症细胞浸润。与CRS组比较,CTS-L组、CTS-H组大鼠上述指标变化均显著逆转(P<0.05),心肾功能有所恢复,病理损伤和纤维化程度减轻。PI3K激活剂740Y-P减弱了CTS对CRS大鼠心肾功能的保护作用。结论CTS可保护CRS大鼠的心肾功能,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

代谢综合征基于PI3K/AKT信号通路对卵巢癌发生发展影响的研究进展

代谢综合征以胰岛素抵抗、腹部肥胖、血压升高等一系列代谢异常为特征,近年来发病率高。卵巢癌是女性生殖系统常见的癌症之一,有研究证据表明代谢综合征会促进卵巢癌的发生发展。PI3K/AKT信号通路为卵巢癌中经常改变的信号通路,通过对中英文多个数据库进行检索,我们发现PI3K/AKT信号通路与糖尿病、肥胖和高血压等代谢性疾病相关。然而,医学界尚未对代谢综合征与PI3K/AKT信号通路在卵巢癌发病机制中的作用进行深入阐述,基于此,该文通过对PI3K/AKT信号通路进一步探讨代谢综合征异常表现对卵巢癌发生发展的影响,旨在深入了解卵巢癌相关代谢综合征的分子机制,从而为卵巢癌防控及治疗提供新的思路。

黄连素通过重塑肠道菌群和调节PI3K/AKT信号通路改善多囊卵巢综合征小鼠的作用机制研究

目的探究黄连素(BBR)对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠肠道菌群的调节作用及其治疗机制。方法于2021年6月—2022年6月在复旦大学附属上海市第五人民医院实验动物中心进行实验。清洁级健康雌性C57BL/6J小鼠24只,随机选取6只作为正常对照组,其余18只应用来曲唑灌胃制备PCOS模型。造模成功后,将造模小鼠随机分为模型(PCOS)组、阳性药达英-35(0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1))组和BBR(100·kg^(-1)·d^(-1))组,每组6只,给予相应药物治疗14 d。收集小鼠结肠内粪便,采用16S rDNA测序检测肠道菌群;称小鼠体质量,观察小鼠阴道脱落细胞形态学改变;检测血清性激素和胰岛素水平;HE染色观察卵巢病理结构;免疫组化检测小鼠结肠Claudin-1、Occludin表达;Western-blot检测卵巢组织PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果16S rDNA测序结果显示,PCOS组肠道菌群多样性较正常对照组发生变化。在属水平,与正常对照组比较,PCOS组布劳特氏菌属、韦永氏球菌属、孪生球菌属和梭形杆菌属等有害菌属丰度增加;BBR治疗后小鼠肠道菌群紊乱状态得到改善,乳酸菌属等有益菌属丰度增加。与正常对照组比较,PCOS组小鼠雌二醇(E_(2))、卵泡刺激素(FSH)和胰岛素敏感系数(ISI)水平降低(t/P=2.847/0.017,3.079/0.012,3.541/0.005),体质量和睾酮(T)、黄体生成素(LH)、LH/FSH、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平升高(t/P=4.782/0.013,4.626/0.001,5.703/<0.001,2.578/0.028,4.156/0.002,3.255/0.009,7.439/<0.001),动情周期紊乱,光镜下卵巢结构符合PCOS病理特征,Claudin-1、Occludin、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT表达下降(t/P=3.806/0.003,3.795/0.004,13.474/<0.001,17.285/<0.001)。与PCOS组比较,达英-35组E_(2)、FSH和ISI水平升高(t/P=2.389/0.038,3.354/0.007,3.198/0.010),体质量和T、LH、LH/FSH、FINS、HOMA-IR水平降低(t/P=3.133/0.011,3.416/0.007,4.596/0.001,2.327/0.042,2.908/0.016,6.096/<0.001),动情周期和卵巢结构得到改善,Claudin-1、Occludin、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT表达升高(t/P=2.390/0.038,2.247/0.048,7.323/<0.001,7.564/<0.001);BBR组ISI水平升高(t/P=3.198/0.010),体质量和T、LH、LH/FSH、FPG、FINS、HOMA-IR水平明显降低(t/P=3.668/0.004,4.602/0.001,6.101/<0.001,2.535/0.030,5.950/<0.001,2.914/0.015,7.630/<0.001),动情周期和卵巢结构得到改善,Claudin-1、Occludin、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT表达升高(t/P=3.799/0.003,3.185/0.010,7.473/<0.001,8.187/<0.001)。结论来曲唑诱导的PCOS小鼠存在菌群失调,BBR通过调节肠道菌群分布可能有助于激活PI3K/AKT通路,改善肠道屏障功能,达到治疗PCOS的目的。

lncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路对多囊卵巢综合征大鼠性激素和卵巢功能的影响

目的:分析长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素和卵巢功能的影响。方法:随机将30只SD雌性大鼠分为模型组、si-NC组、TMPO-AS1-shRNA组,另选取健康大鼠设空白对照组,每组10只,模型组、si-NC组、TMPO-AS1-shRNA组给予60%高脂饲料,皮下注射DHEA(60 mg/kg溶于0.2 ml芝麻油中),空白对照组给予普通饲料,皮下注射等量芝麻油,于10 d开始对大鼠进行为期10 d的阴道涂片,持续注射21 d后测量大鼠体重、卵巢重量,计算卵巢指数;并采用Western blot检测PI3K、P-PI3K、Akt、P-Akt蛋白水平;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TMPO-AS1、PI3K、Akt mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附法检测血清性激素水平;于光学显微镜下观察卵巢形态学。结果:MPO-AS1、PI3K、Akt mRNA水平比较,模型组、si-NC组比空白对照组低(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组体重、卵巢重量、卵巢指数比空白对照组高,比模型组、si-NC组低(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组PI3K、Akt蛋白表达水平比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组睾酮激素(T)、促黄体生成素(LH)水平比空白对照组高,比模型组、si-NC组低;雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)水平比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组黄体数、成熟卵泡数、颗粒细胞厚层比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。结论:lncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路可有效降低PCOS大鼠性激素水平,并改善其卵巢功能。

清肺汤通过PI3K/Akt信号通路对急性呼吸窘迫综合征大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 研究清肺汤参与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠细胞凋亡过程、调控PI3K/Akt信号通路的作用机制。方法 SPF级大鼠共40只,随机分为空白组、模型组、清肺汤组、抑制剂组,每组10只。造模前1.5 h,抑制剂组予渥曼青霉素1 mg/kg腹腔注射。除空白组外,各组大鼠均气管内滴注3 mg/kg脂多糖(LPS)100μL造模,各组留置观察6 h后开始药物治疗。空白组、模型组给予灌胃蒸馏水12 m L/kg,清肺汤组、抑制剂组灌胃清肺汤12 mL/kg;各组早晚各给药1次,连续7 d。干预结束后比较各组肺组织细胞凋亡情况及PI3K/Akt信号通路相关蛋白及Bax和Bcl-2基因表达情况。结果 模型组中大鼠肺组织中Bcl-2、磷酸化Akt和Gsk-3β表达明显低于空白组,Bax表达、肺组织中TUNEL阳性细胞率明显升高(P <0.05);抑制剂组中大鼠肺组织中Bcl-2、磷酸化Akt和Gsk-3β表达明显低于模型组,Bax表达、肺组织中TUNEL阳性细胞率明显升高(P <0.05),清肺汤组中肺组织中Bax表达、肺组织中TUNEL阳性细胞率明显低于模型组和抑制剂组,Bcl-2、磷酸化Akt和Gsk-3β表达明显高于模型组和抑制剂组(P <0.05)。结论 清肺汤可能通过PI3K/Akt信号通路参与肺组织细胞凋亡过程治疗ARDS。

磷脂酰肌醇3激酶δ过度活化综合征治疗进展

磷脂酰肌醇3激酶δ(phosphoinositide 3⁃kinaseδ,PI3Kδ)过度活化综合征(activated phosphoinositide 3⁃kinaseδsyndrome,APDS)于2013年首次报道。APDS是一种PIK3CD基因或PIK3R1基因突变导致的常染色体显性遗传的原发性免疫缺陷病(primary immunodeficiency disease,PID),临床表现为反复呼吸道感染、非肿瘤性淋巴组织增生、自身免疫性疾病及淋巴瘤等。本文详细介绍了APDS治疗方案,除常规针对免疫缺陷治疗外,如抗菌药物预防、免疫球蛋白替代治疗及造血干细胞移植等,还讨论了针对性更强的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制剂和PI3Kδ抑制剂。

PI3K信号过度活化引发免疫病理机制研究进展

目前少数研究发现磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)基因PIK3CD(编码p110δ)发生功能获得性(GOF)变异后,可导致活化的PI3Kδ综合征(APDS)。该突变可通过诱导T细胞减少/衰老/耗竭、B细胞发育受阻、NK细胞毒性降低等多种免疫系统内部缺陷机制导致机体内免疫缺陷、免疫失调甚至肿瘤发生。本文主要对PI3Kδ GOF诱导APDS发生的相关临床疾病特点及免疫缺陷分子机制展开综述,重点阐述该突变导致淋巴细胞发育、分化及功能缺陷的分子机制。

PI3Kδ过度活化综合征诊疗进展

PI3Kδ过度活化综合征(APDS)是一种罕见的常染色体显性遗传原发性免疫缺陷病,全球报道该病例已超300例。c.3061 G>A(p.E1021K)与c.1425+1 G>(A,C,T)(p.434-475del)为目前热点突变位点。尽管早期行基因二代测序筛查可缩短确诊时间,但由于APDS发病率低及高度异质性的临床特点,临床对其识别率不高,极易被漏诊、误诊,且目前尚无统一的诊疗方法。故该文就近年来有关APDS的发病机制、诊断和治疗进展进行综述。

基于PI3K/AKT通路探讨柴苓汤加味对阴虚热盛代谢综合征-胰岛素抵抗大鼠血管内皮功能的影响

目的基于PI3K/AKT通路探讨柴苓汤加味对阴虚热盛代谢综合征-胰岛素抵抗(metabolic syndrome and insulin resistance,MS-IR)大鼠血管内皮功能调控的部分作用机制及病证结合治疗的优势。方法50只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、造模组。造模组大鼠采用高脂高糖饲料喂养,注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(30 mg/kg)联合中药(干姜、附子)灌服造模,建立阴虚热盛型MS-IR大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、柴苓汤加味组(病证结合治疗)、柴苓汤组(因病治疗)、西药组(吡格列酮),各组分别进行柴苓汤加味、柴苓汤、吡格列酮药物干预治疗2周,空白组、模型组给予等体积的蒸馏水灌服。生化检测大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);ELISA法检测血清一氧化氮(NO)水平、血管性血友病因子(vWF);Western blot检测腹主动脉血管内皮磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶(phosphorylated-Akt,P-AKT)、磷酸化内皮一氧化氮(phosphorylated-endothelial nitric oxide synthase,P-eNOS)蛋白表达;HE染色切片,光学显微镜观察颈动脉内膜、中膜厚度以及血管管腔结构情况。结果与空白组比较,模型组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR水平明显升高,血清NO水平明显降低,vWF水平明显升高(P<0.01),血管内皮结构发生紊乱出现损伤,内皮PI3K、P-AKT、P-eNOS蛋白表达均下调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,柴苓汤加味组、西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平明显降低(P<0.01),柴苓汤加味组、柴苓汤组、西药组血清NO水平明显升高、vWF水平明显降低(P<0.05,P<0.01),血管内皮PI3K、P-AKT、P-eNOS蛋白表达均上调(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,柴苓汤加味组FBG、FINS、HOMA-IR水平无明显差异,柴苓汤组NO、vWF水平无明显差异,柴苓汤组血管内皮PI3K蛋白表达上调(P<0.05),柴苓汤加味组NO水平明显升高(P<0.05)、vWF水平明显降低(P<0.01),血管内皮PI3K、P-AKT、P-eNOS蛋白表达均上调(P<0.05,P<0.01);与柴苓汤组比较,柴苓汤加味组、西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平明显降低(P<0.05),柴苓汤加味组NO水平明显升高(P<0.05)、vWF水平明显降低(P<0.01),血管内皮PI3K、P-AKT、P-eNOS蛋白表达均上调(P<0.05,P<0.01);柴苓汤加味对血管组织内膜、中膜、外膜的厚度以及炎症改善效果最为明显,优于柴苓汤组和西药组。结论柴苓汤及加味方促进血管内皮损伤的修复,并显著改善阴虚热盛MS-IR大鼠血管内皮功能,作用机制可能与改善FBG、FINS、HOMA-IR、NO、vWF水平,消除炎症及调控PI3K/AKT通路有关,病证结合用方治疗具有显著优势。

电针对代谢综合征大鼠糖脂代谢和IRS-1/PI3K/Akt/GLUT4信号通路的影响

【目的】探讨电针对代谢综合征(MS)大鼠糖脂代谢和胰岛素受体底物1(IRS-1)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)信号通路的影响。【方法】采用高脂高糖高盐饲料喂养方法构建代谢综合征大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、二甲双胍组和电针组,另设正常组。二甲双胍组大鼠给予盐酸二甲双胍片的生理盐水混悬液灌胃,电针组大鼠给予关元、中脘、足三里、丰隆穴电针治疗,正常组和模型组大鼠只固定,不针刺。连续干预21 d后,测量大鼠体质量、腹腔脂肪质量和血压,计算Lee’s指数和体脂比,检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂、脂肪酸(FFA)、脂联素(APN),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);分别采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western Blot法检测肝脏组织IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4的mRNA和蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色法观察肝脏和胸主动脉病理变化。【结果】与正常组比较,模型组大鼠体质量、Lee’s指数、腹腔脂肪质量、体脂比、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、FPG、FINS、HOMA-IR、总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、FFA水平升高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、APN水平降低(P<0.05),肝脏IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),HE染色结果显示肝脏脂肪变性和胸主动脉粥样硬化。与模型组比较,电针组和二甲双胍组大鼠体质量、Lee’s指数、腹腔脂肪质量、体脂比、SBP、DBP、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、FFA水平降低(P<0.05),HDL-C、APN水平升高(P<0.05),肝脏IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),HE染色结果显示肝脏脂肪变性和胸主动脉粥样硬化明显减轻。电针组和二甲双胍组上述指标改变差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】电针可以改善代谢综合征大鼠的糖脂代谢,其机制可能与上调IRS-1/PI3K/Akt/GLUT4通路蛋白表达有关。

基于PI3K/Akt信号通路探讨苍附导痰汤对肥胖型多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢增殖和凋亡的影响

目的研究苍附导痰汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的改善作用及机制。方法40只雌性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、苍附导痰汤组及二甲双胍组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养和0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,其余各组给予高脂饲料喂养联合来曲唑1.0 mg/(kg·d)(溶于0.5%羧甲基纤维素钠)灌胃,连续21 d。模型建立成功后,苍附导痰汤组给予苍附导痰汤1.625 g/(kg·d),二甲双胍组给予二甲双胍200 mg/(kg·d),正常组和模型组给予等体积生理盐水,分别灌胃4周。测量各组大鼠体质量和空腹血糖;苏木精-伊红(HE)染色法检测卵巢组织病理学变化;酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测血清激素的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测卵巢中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量增加[(392.52±7.67)g比(322.17±8.76)g,P<0.05],血糖升高[(11.42±1.82)mmol/L比(4.90±0.41)mmol/L,P<0.05],卵泡刺激素(FSH)降低[(7.40±0.33)mIU/mL比(10.43±0.26)mIU/mL,P<0.05],黄体生成素(LH)升高[(36.50±0.67)mIU/mL比(21.00±0.65)mIU/mL,P<0.05],睾酮(T)升高[(61.70±1.06)nmol/L比(46.27±0.76)nmol/L,P<0.05];卵巢呈现多囊样改变;PI3K、Akt、PCNA蛋白表达降低[PI3K:(0.23±0.02)比(1.04±0.01);Akt:(0.73±0.01)比(1.03±0.02);PCNA:(0.47±0.01)比(1.16±0.01),P均<0.05],Bax蛋白表达升高[(0.89±0.02)比(0.57±0.02),P<0.05]。与模型组比较,苍附导痰汤组和二甲双胍组体质量减轻[(362.42±8.05)g、(375.41±4.60)g比(392.52±7.67)g,P均<0.05],血糖降低[(6.70±0.42)mmol/L、(8.54±0.56)mmol/L比(11.42±1.82)mmol/L,P均<0.05],FSH升高[(9.57±0.41)mIU/mL、(8.24±0.09)mIU/mL比(7.40±0.33)mIU/mL,P均<0.05],LH降低[(26.23±0.66)mIU/mL、(31.53±0.40)mIU/mL比(36.50±0.67)mIU/mL,P均<0.05],T降低[(47.73±0.37)nmol/L、(54.10±0.80)nmol/L比(61.70±1.06)nmol/L,P均<0.05];卵巢形态改变部分恢复。与模型组比较,苍附导痰汤组PI3K、Akt、PCNA升高[PI3K:(1.03±0.01)比(0.23±0.02);Akt:(0.86±0.01)比(0.73±0.01);PCNA:(0.59±0.01)比(0.47±0.01),P均<0.05],Bax降低[(0.42±0.01)比(0.89±0.02),P<0.05];与模型组比较,二甲双胍组PI3K升高[(0.72±0.01)比(0.23±0.02),P<0.05],Bax降低[(0.53±0.01)比(0.89±0.02),P<0.05]。与二甲双胍组比较,苍附导痰汤组体质量、血糖降低,FSH升高,LH、T降低,PI3K、PCNA升高,Bax降低(P<0.05)。结论苍附导痰汤可能通过激活PI3K/Akt通路,抑制卵巢细胞凋亡,促进细胞增殖而对PCOS有治疗效果。

LncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路对多囊卵巢综合征大鼠性激素和卵巢功能的影响

目的 探究LncRNA TMPO-AS1对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的影响以及其对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关分子的调控作用。方法 选取36只SPF级SD雌性大鼠,按照随机数字表法分为模型组(A组)、空白质粒组(B组)、TMPO-AS1过表达质粒组(C组)共3组,每组12只大鼠。采用来曲唑注射法制备大鼠PCOS模型,于造模第1天起,B、C组大鼠尾静脉注射空白质粒及TMPO-AS1过表达质粒,A组注射等量0.9%氯化钠溶液,连续注射21 d。比较各组大鼠的性激素[促黄体生成素(LH)、睾酮、卵泡刺激素(FSH)]水平、卵巢功能(卵巢重量/体重比例、成熟卵泡数量、黄体数量)、卵巢组织的PI3K、Akt mRNA和蛋白表达量以及子宫容受性[白血病抑制因子(LIF)蛋白和整合素β3(ITG β3)]、代谢功能[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR]水平。结果 C组大鼠的性激素LH、睾酮水平、卵巢重量/体重比例、成熟卵泡数量、FBG、FINS、HOMA-IR水平均高于A、B组,FSH水平、黄体数量均低于A、B组,同时C组大鼠的PI3K、Akt mRNA及蛋白表达量、LIF、ITG β3水平均低于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05);但A组、B组间各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LncRNA TMPO-AS1能够加重PCOS大鼠性激素水平和代谢功能紊乱和卵巢功能受损,降低子宫容受性,可能与下调PI3K、Akt mRNA和蛋白表达有关。

桂枝茯苓丸联合西医药物治疗多囊卵巢综合征的疗效及对PI3K/AKT/mTOR通路的调节作用

目的 研究桂枝茯苓丸联合西医药物治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的疗效及对PI3K/AKT/mTOR通路的调节作用。方法 将92例PCOS患者随机分为观察组和对照组,两组均给予调整月经周期、调整代谢的西医药物治疗,观察组加用桂枝茯苓丸,两组均连续治疗6个月经周期。评价疗效,采用B超监测排卵情况及卵巢体积,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平,计算胰岛素抵抗指数HOMA-IR。结果 观察组治疗的总有效率、排卵率高于对照组(χ^(2)=5.232,P<0.05);治疗后,2组患者的FBG、FINS、HOMA-IR、LH、FSH、T水平均低于治疗前,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的FBG、FINS、HOMA-IR、LH、FSH、T水平均低于对照组,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 桂枝茯苓丸联合西医药物治疗PCOS能够改善疗效、促进排卵、调节性激素水平及胰岛素抵抗,激活PI3K/AKT/mTOR通路可能是与之相关的分子机制。

金荞麦通过PI3K/Akt信号通路对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织的影响

目的:金荞麦水剂用于治疗急性呼吸窘迫综合征大鼠,观察治疗前后肺组织及PI3K/Akt信号通路相关炎性因子的变化。方法:将30只SD雄性大鼠随机分出20只气管内滴注3.00mg·kg-1LPS 100μl进行造模,造模后随机分成模型组10只,金荞麦组10只;剩余10只作为空白组滴注同等剂量生理盐水;空白组、模型组给予每日早晚灌胃生理盐水12ml/kg,金荞麦组灌胃同剂量金荞麦水剂,连续3天治疗后收集肺组织进行分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺组织中可见炎性细胞浸润,存在较多的淋巴细胞和中性粒细胞,并且湿干比(W/D)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)均升高,肺组织中Akt mRNA和Gsk-3β mRNA含量明显降低,p-Akt、p-Gsk-3β蛋白表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,金荞麦组可见少量淋巴细胞和中性粒细胞浸润,W/D、TNF-α、IL-6、IL-10均下降,Akt mRNA和Gsk-3β mRNA含量明显升高,p-Akt、p-Gsk-3β蛋白增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:金荞麦水剂可能是通过PI3K/Akt信号通路减轻大鼠肺组织炎症介质释放来治疗急性呼吸窘迫综合征的。

PIK3CD基因突变致PI3K-δ过度活化综合征1例报告并文献复习

目的了解PI3K-δ过度活化综合征的临床特征及致病基因。方法回顾分析1例PI3K-δ过度活化综合征患儿的临床资料。结果患儿,男,3岁10个月,反复呼吸道感染,肝脾肿大,发育落后。提取患儿及父母外周血DNA,通过全外显子组测序及Sanger验证,证实患儿PIK3CD基因存在错义变异c.3061G>A(E1021K),先证者父母PIK3CD基因均未发现上述变异,为新生变异。该突变使PIK3CD基因发生功能获得性突变,导致编码的p110δ活性增强,PI3K-PIP3-AKT-mTOR信号通路过度激活,诱导细胞分化增殖,致疾病发生,为致病性突变。结论 PI 3 K-δ过度活化综合征为罕见的常染色体显性遗传免疫缺陷病,基因检测可协助诊断。

PIK3CD基因变异致儿童PI3Kδ过度活化综合征1型1例报告并文献复习

目的总结PI3Kδ过度活化综合征(APDS)的临床诊治。方法总结1例APDS1型患儿的临床表现、实验室检查以及基因检测结果和治疗经过。结果女性患儿,4岁3个月,主要表现为反复出现呼吸道感染、脾大、淋巴结肿大、肠病,高IgM综合征、T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞比例下降。经全外显子测序诊断为APDS1型,予以抗感染和丙种球蛋白治疗,临床症状明显改善。结论APDS可表现为反复呼吸道感染、淋巴增殖性疾病、肠病以及高IgM综合征等,基因检测可明确诊断。抗感染和丙种球蛋白替代治疗有效。

基于网络药理学及动物实验探讨补肾活血方治疗多囊卵巢综合征的作用机制

目的基于网络药理学及动物实验探讨补肾活血方治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制。方法通过TCMSP、GeneCards、OMIM、CTD数据库获取疾病靶点,构建PPI网络、“药材-成分-靶点”网络,对关键靶点进行GO、KEGG分析,并对关键活性成分与靶点进行分子对接。通过动物实验验证补肾活血方对多囊卵巢综合征的作用靶点。结果网络药理学表明,补肾活血方的关键成分为槲皮素、山柰酚、谷甾醇、异补骨脂查耳酮、阿魏酸,治疗多囊卵巢综合征的关键靶点为EGFR、SRC、JUN,主要通过PI3K/Akt、MAPK、Rap1、Ras、Ca^(2+)等信号通路发挥作用。动物实验表明,与模型组比较,补肾活血方能降低胰岛素水平,增加各级卵泡数和黄体数,降低LH、T水平,升高E2、FSH水平,改善卵巢组织病理形态,颗粒细胞层数变多且规则排列,升高卵巢组织PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达。结论补肾活血方具有多成分、多靶点、多途径特性,可能通过PI3K/Akt信号通路改善胰岛素抵抗治疗多囊卵巢综合征。