天然产物通过抑制PI3K信号通路抗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是慢性肝损伤的一种内在反应,其特征是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的合成、降解和沉积失衡,会导致肝细胞受损和肝脏正常结构被破坏。而肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的异常激活被认为是驱动肝纤维化的关键因素。在肝损伤的过程中,HSCs能够活化并向肌成纤维细胞转化进而产生过量的ECM。炎症和氧化应激在HSCs的激活中发挥重要作用,而HSCs凋亡则有利于肝纤维化的消退。抑制磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)信号通路可降低炎症反应、氧化应激,诱导HSCs凋亡,从而改善肝纤维化。来源于植物的天然产物,包括黄酮类和萜类可以抑制PI3K信号通路,对肝纤维化的发生发展起到抑制作用。该文旨在综述PI3K信号通路在肝纤维化中的作用,总结近年来黄酮类化合物和萜类化合物通过抑制PI3K信号通路抗肝纤维化作用的证据,为进一步开发能有效防治肝纤维化的药物提供参考。

IRS1/PI3K信号通路在T2DM骨骼肌胰岛素抵抗中的相关研究进展

胰岛素抵抗(IR)主要发生于骨骼肌等胰岛素敏感组织,是2型糖尿病(T2DM)的关键病理环节与主要发病机制。PI3K信号通路作为胰岛素调控血糖主要途径在传导障碍时会引发IR,是T2DM相关研究的热点,且相关实验颇多,但其对IR发病与治疗的干预机制目前尚未被完全阐明。PI3K信号通路主要涉及胰岛素受体(INsR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及葡萄糖转运体4(GLUT4)等调节因子,即IRS1/PI3K通路。从IRS1/PI3K通路干预骨骼肌IR的作用机制角度去探晰IR的发病机制,对临床探寻其防治靶点具有重要意义。文章对近年来IRS1/PI3K相关通路参与T2DM骨骼肌IR的相关研究进行了整理与归纳,以期为IR相关实验与临床防治提供文献理论参考与新思路。

miR-10b-5p靶向JARID2及PTEN/Akt/PI3K信号通路调控人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力

目的探讨miR-10b-5p靶向Jumonji富含AT结合结构域2(JARID2)及磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(Akt)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路调控人乳腺癌M.D.Anderson和MB代表转移性乳腺癌-231(MDA-MB-231)细胞增殖和迁移的影响。方法培养人正常乳腺细胞密歇根癌症基金会-10A(MCF-10A)及人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用Real-time聚合酶链式反应(PCR)法检测两种细胞中miR-10b-5p表达。将MDA-MB-231细胞分为对照组(Lip2000处理后正常培养细胞)、上调拟似物组(Lip2000+miR-10b-5p拟似物mimic转染)、上调转染组(Lip2000+mimic-miR-10b-5p共转染)、下调拟似物组(Lip2000+miR-10b-5p拟似物inhibitor转染)、下调转染组(Lip2000+inhibitor-miR-10b-5p共转染)。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组细胞增殖情况,Transwell检测各组细胞迁移能力,Western blot法检测各组中JARID2及PTEN/Akt/PI3K信号通路蛋白表达。结果MDA-MB-231细胞中miR-10b-5p表达量高于MCF-10A细胞(P<0.05)。上调转染组增殖抑制率低于对照组,下调转染组增殖抑制率高于对照组(P<0.05);上调拟似物组和下调拟似物组增殖抑制率与对照组比较差异无统计学意义。上调转染组细胞数量少于对照组,下调转染组细胞数量多于对照组(P<0.05);上调拟似物组和下调拟似物组与对照组细胞数量比较差异无统计学意义。上调转染组JARID2、PTEN蛋白表达量均高于对照组,PI3K、Akt蛋白表达均低于对照组(P<0.05);下调转染组JARID2、PTEN蛋白表达量均低于对照组,PI3K、Akt蛋白表达均高于对照组(P<0.05)。结论miR-10b-5p可靶向JARID2及PTEN/Akt/PI3K信号通路表达,影响人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移能力。

PI3K信号通路对哮喘小鼠调节性T细胞与Th17失衡的调控作用

目的:探讨PI3K信号通路对哮喘小鼠T细胞中辅助性T细胞17(Th17)与CD4+CD 25+调节性T细胞(Treg)失衡的调控作用。方法:尼龙毛柱法分选对照组和哮喘组BALB/c小鼠脾脏T细胞,进而在细胞水平分组:对照组(A组)分为2个亚组:空白对照组(A1),PI3K抑制剂LY294002对照组(A2);哮喘组(B组)继续分为4个亚组:哮喘组(B1),5μmol/L PI3K抑制剂LY294002组(B2),10μmol/L PI3K抑制剂LY294002组(B3),20μmol/L PI3K抑制剂LY294002组(B4),共培养72 h,采用流式细胞仪检测CD4+CD 25+Treg的数量,酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清中白细胞介素(IL)-10和IL-17水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转录因子Foxp3和RORγt的mRNA水平。结果:(1)分选后获得的T细胞纯度为(74.12±3.08)%,细胞存活率为(92.82±3.21)%;(2)Treg的数量B1组较A1组显著降低(P<0.01);A2组显著高于A1组(P<0.05);B3和B4组较B1组显著增高(均P<0.01);(3)IL-17水平和RORγt mRNA表达B1组较A1组显著增高(P<0.01);A2组显著低于A1组(P<0.01,P<0.05);B2、B3、B4组均显著低于B1组(均P<0.01),呈剂量依赖性降低;而IL-10水平和Foxp3 mRNA表达B1组显著低于A1组(P<0.01);A2组显著高于A1组(P<0.01);B2、B3和B4组均显著高于B1组(P<0.01),且呈浓度依赖性增高;(4)RORγt/Foxp3 mRNA的比值B1组显著高于A1组(P<0.01);A2组显著低于A1组(P<0.01);B2、B3和B4组显著低于B1组(P<0.01),且呈浓度依赖性降低;RORγt/Foxp3 mRNA比值与IL-17水平呈正相关(r=0.89,P<0.01);RORγt/Foxp3 mRNA比值与IL-10呈负相关(r=-0.86,P<0.01)。结论:哮喘小鼠存在Th17/Treg失衡,PI3K信号通过调控Treg/Th17失衡而参与哮喘发病过程。

洋参御糖丸对糖尿病大鼠脂肪组织PI3K信号通路的调控作用

目的:观察洋参御糖丸对糖尿病(DM)大鼠胰岛素PI3K信号通路的调节作用。方法:高糖高脂饮食联合STZ建立DM大鼠模型,洋参御糖丸干预4周后,检测血糖、血清胰岛素,HE染色观察脂肪组织结构,免疫组化检测脂肪IRS-1、GLUT-4蛋白,western blot检测脂肪组织PI3K-p85蛋白。结果:模型组大鼠血糖、血清胰岛素与空白组比较明显增高(P<0.05),脂肪IRS-1、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达较空白组显著降低(P<0.05);洋参御糖丸高、低剂量组及二甲双胍组血糖、血清胰岛素较模型组不同程度降低(P<0.05),脂肪IRS-1、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达较模型组显著提高(P<0.05)。结论:洋参御糖丸可能通过增加DM大鼠脂肪组织IRS-1、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达,增强胰岛素PI3K信号转导,进而发挥降糖和改善IR作用。

PI3K信号通路对胃癌细胞P27磷酸化蛋白分布表达的影响

目的:研究PI3K信号通路对胃癌BGC-823细胞中P27与磷酸化P27(p-P27)蛋白表达分布的影响。方法:LY294002处理BGC-823细胞,流式细胞术测定处理前后两组细胞周期分布。Western blotting测定两组细胞总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白中P27与p-P27(Thr187、Thr157及Ser10)蛋白含量及分布特点。结果:处理后G_1期细胞数明显增加(83.9%vs.67.6%,P<0.01)P27在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋白中表达均显著增加(P<0.01,P<0.01,P<0.01);p-P27(Ser10)在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋白中表达均显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01);p-P27(Thr157)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均显著下降(P<0.01,P<0.01),在核蛋白中下降不明显(P=0.482);p-P27(Thr187)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均下降,在核蛋白中表达增高,均无显著性差异(P=0.254,P=0.70,P=0.223)。结论:阻断PI3K通路可增加胃癌细胞P27蛋白表达,降低p-P27蛋白表达,改变P27和p-P27蛋白的核浆分布,可以使细胞周期停滞于G_1期,诱导细胞凋亡。

PI3K信号通路中LCK、LAT、SYK、PKC基因在特发性眼眶炎性假瘤中差异表达分析

目的分析特发性眼眶炎性假瘤患者与单纯眼眶海绵状血管瘤患者病变泪腺标本组织中LCK、LAT、SYK、PKC的差异表达情况,为特发性眼眶炎性假瘤发病机理提供参考。方法采用全基因组表达谱芯片技术检测特发性眼眶炎性假瘤患者病变泪腺组织与单纯眼眶海绵状血管瘤患者瘤体组织中信号通路的差异性基因表达。采用PCR扩增技术,免疫组织化学染色方法及Western blot法检测特发性眼眶炎性假瘤患者病变泪腺组织中LCK、LAT、SYK、PKC的mRNA及蛋白质表达情况,并以单纯眼眶海绵状血管瘤患者瘤体组织标本作对照。结果经基因芯片检测分析,实验组与对照组相比较,PI3K信号通路(PI3Ksignaling pathway)表达显著上调,其中LCK、LAT、SYK、PKC 4个基因差异性表达最为明显(P<0.05)。经PCR扩增技术检测、免疫组织化学方法及Western blot检测,IOIP组LCK、LAT、SYK、PKC的mRNA及蛋白表达均呈阳性,眼眶海绵状血管瘤组表达均呈阴性。结论PI3K信号通路中LCK、LAT、SYK、PKC因子高表达在眼眶特发性炎性假瘤的发生发展中起重要作用。

高铝暴露通过PI3K信号通路致大鼠糖耐量异常的作用及机制

目的 探讨高铝暴露对大鼠糖代谢、胰岛素抵抗水平及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路的影响。方法 SPF级Wistar大鼠60只,随机分为高铝暴露组和对照组各30只,高铅暴露组予三氯化铝,对照组予生理盐水尾静脉注射,后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及高胰岛素正葡萄糖钳夹(HECT)试验,同时Western印迹法测定肝脏组织胰岛素受体(IR)-β、胰岛素受体底物(IRS)-1及IRS-1Ser307磷酸化蛋白的表达情况。结果 OGTT结果显示,高铅暴露组30、60、120min血糖水平均明显高于对照组(P<0.01),曲线下面积(AUC)显著高于对照组(P<0.05)。在HCET中,高铅暴露组外周组织葡萄糖输注率(GIR)明显低于对照组(P<0.01)。高铅暴露组肝脏中IR-β、IRS-1表达下降,而IRS-1ser307表达升高(P<0.05)。结论 高铝暴露可诱导大鼠糖耐量异常发生,其机制可能与PI3K通路受抑制有关。

洋参御糖丸调控糖尿病大鼠肝脏胰岛素PI3K信号通路的机制研究

目的:观察洋参御糖丸对DM大鼠肝脏胰岛素PI3K信号通路的调节作用。方法:4周龄Wistar大鼠50只,选取10只作为空白组,给予普通饲料,其余40只给予高脂高糖饲料,喂养8周,腹腔注射STZ,做成糖尿病大鼠模型,分为模型组、二甲双胍组、洋参御糖方高剂量组、洋参御糖方低剂量组,每组10只。各组给予相应药物灌胃,每日一次,给药剂量:洋参御糖丸低剂量组1.35 g·(kg·d)-1,高剂量组2.7 g·(kg·d)-1,二甲双胍组70 mg·(kg·d)-1。模型组和空白组给予等体积蒸馏水灌胃。各组继续给予高糖高脂饲料,药物干预4周末,进行肝脏取材。血糖仪测定各组大鼠尾静脉空腹血糖;放免法测定空腹血清胰岛素;氧化酶法测定肝糖原含量;结果:①模型组大鼠血糖、血清胰岛素与空白组比较明显增高(P<0.05);洋参御糖丸高、低剂量组及二甲双胍组血糖及血清胰岛素较模型组不同程度降低,(P<0.05);二甲双胍组上述指标降低程度优于洋参御糖丸高、低剂量组(P<0.05);②模型组大鼠肝糖原含量较空白组明显降低(P<0.05);洋参御糖丸高剂量组和二甲双胍组肝糖原含量较模型组显著升高,(P<0.05);洋参御糖丸低剂量组肝糖原含量与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);③模型组大鼠肝脏IRS-1、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达与空白组相比显著降低(P<0.05);洋参御糖丸高剂量组及双胍组IRS-1、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达与模型组比较显著提高(P<0.05);而洋参御糖丸低剂量组与模型组相比上述指标无明显差异(P>0.05)。结论:洋参御糖丸可能通过增加DM大鼠肝脏IRS-2、GLUT-4和PI3K-p85蛋白表达,增强胰岛素PI3K信号转导,抑制肝糖输出,发挥降糖和改善IR作用。

表皮生长因子对胰岛素-PI3K信号通路的影响及机制

目的:研究表皮生长因子(epidermal growthf actor,EGF)对胰岛素-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路的影响及其可能涉及的机制.方法:肝癌细胞系Hep G2用含10%胎牛血清的DMEM培养.细胞刺激试验前过夜血清饥饿,EGF和胰岛素刺激不同的时间,裂解细胞后提取蛋白,Western blot检测相关信号蛋白水平.结果:胰岛素可以导致肝癌细胞系蛋白激酶B(Akt)的磷酸化.当EGF短时间刺激后,胰岛素对PI3K信号通路的调节没有受到明显的影响.当EGF刺激4 h后,胰岛素对Akt的激活效应受到抑制,而当Hep G2细胞转染质粒磷酸酶域突变型质粒p Sv EGFP-PTEN C124S或PI3K调节亚基的p85 N末端缺失序列p50后,EGF预先刺激产生的对Akt的抑制效应消失.结论:EGF和胰岛素的相互作用对肝癌细胞PI3K-Akt信号通路具有抑制效应,其抑制机制涉及到PTEN和调节亚基p85.当两基因突变后,这种抑制作用则消失.

益肾安胎中药对肾虚型复发性流产母胎界面PI3K信号通路的影响

目的:阐述磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的相关分子的表达和肾虚型复发性流产的关系,探讨益肾安胎中药对母胎界面PI3K信号通路主要相关分子表达的影响。方法:选择30例肾虚型复发性流产的患者为实验组,30例同期正常早期妊娠的孕妇要求人工流产者为对照组。原代人蜕膜细胞培养,益肾安胎中药处理人蜕膜细胞为中药组,同期设空白对照组。免疫组化法检测PI3K在子宫蜕膜中的表达。RT-PCR分别检测两组子宫蜕膜组织以及两组蜕膜细胞中PI3K信号通路上相关分子血清和糖皮质激素激酶(SGK1)、透明质酸合成酶(HAS1、HAS2、HAS3),透明质酸酶(Hyal-1、Hyal-2、Hyal-3)mRNA相对表达量。结果:PI3K SGK1、HAS1、HAS3和Hyal-2在肾虚复发性流产组子宫蜕膜组织中的相对表达量显著低于正常妊娠对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。HAS2在肾虚复发性流产组子宫蜕膜组织中的相对表达量低于正常妊娠组,差异具有统计学意义(P<0.05)。益肾安胎中药处理蜕膜细胞,PI3K在中药组中的相对表达量明显高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.01),SGK1、HAS1和Hyal-2在中药组中的相对表达量高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肾虚型复发性流产与子宫蜕膜中PI3K信号通路的下调相关,益肾安胎中药能上调母胎界面PI3K信号通路。

抑制PI3K信号通路促进TRAIL诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对癌细胞有独特的细胞毒性作用,而对正常细胞没有影响.但乳腺癌细胞耐受TRAIL诱导凋亡.本研究探索磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞耐受TRAIL的影响.采用MTT法、显微照相以及DAPI染色观察TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用以及诱导细胞凋亡状况;流式细胞分析细胞凋亡的情况;激光共聚焦显微镜观察多聚ADP核糖多聚酶-1(poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)的迁移和定位;Western印迹分析死亡受体、caspase-3/8、磷酸化的AKT[pAKT(Ser473)]、Src和PARP-1等蛋白质表达.结果显示,小剂量TRAIL(<80 nmol/L)和Ly294002(<40μmol/L)对MCF-7细胞生长没有显著的抑制作用,但是大剂量TRAIL(160 nmol/L)和Ly294002(80μmol/L)则能抑制MCF-7细胞生长;低剂量Ly294002协同TRAIL抑制MCF-7细胞生长,并诱导细胞凋亡;Ly294002和TRAIL共同作用能促进PARP-1从胞浆进入细胞核;蛋白质表达分析显示,MCF-7细胞均表达死亡受体DR4、DR5、诱骗受体DcR1和DcR2、以及caspase-8,但是不表达caspase-3;Ly294002和TRAIL共同作用也能抑制pAKT(Ser473)和Src的表达,并且导致PARP-1断裂.本研究结果提示,抑制PI3K信号可增加MCF-7细胞对TRAIL诱导的敏感性;MCF-7细胞通过PI3K/AKT途径促进Src的表达耐受TRAIL的细胞毒性作用;Ly294002联合TRAIL是一种新的药物组合方式治疗乳腺癌.

特发性眼眶炎性假瘤中PI3K信号通路中LCK、LAT、SYK、PKC基因的差异表达研究

目的 探讨PI3K信号通路中SYK、LCK、PKC以及LAT基因在特发性眼眶炎性假瘤中的表达差异.方法 选择特发性眼眶炎性假瘤患者15例为研究对象,再选择同期收治的16例单纯眼眶海绵状血管瘤患者为对照组,运用全基因组表达谱芯片技术对两组信号通路的差异性基因表达进行检测,对比分析两组的检测情况.结果 经基因芯片检测分析,与对照组相比,观察组的PI3K信号通路表达上调明显,其中PKC、SYK、LAT以及LCK基因具有明显的差异性表达(P<0.05);同时,经Western blot、免疫组织化学方法以及PCR扩增技术检测,对照组的PKC、SYK、LAT以及LCK的蛋白和mRNA表达均为阴性,而观察组则为阳性.结论 特发性眼眶炎性假瘤的发生和发展与PI3K信号通路中的LAT、PKC、LCK以及SYK基因高表达有关.

参乌胶囊和二苯乙烯苷对衰老大鼠海马神经生长因子及PI3K信号通路的影响

目的：观察增龄大鼠海马神经生长因子（NGF）及其受体后磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）信号转导通路的变化，并应用参乌胶囊（SW）及二苯乙烯苷（TSG）对老年大鼠进行干预，为揭示药物防治老年性痴呆的作用机理提供多方面的实验依据。方法：雄性SD大鼠，按月龄分为1、3、6、18和24月龄。24月龄老年大鼠分为对照组、SW组、TSG组。从21月龄开始，分别给予SW和TSG灌胃，至24月龄．应用免疫组织化学染色方法观察海马CA1区神经元NGF及其受体TrkA、胰岛素受体底物-1（IRS-1）、PI3K、丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B（Akt／PKB）、磷酸化的70KDa S6核糖体蛋白激酶（P-p70S6K）表达情况。应用Western blot方法对上述部分因子进行半定量分析，并进一步检测了磷酸化的cAMP反应元件结合蛋白（p—CREB）。结果：神经元存活信号转导通路相关因子的蛋白质表达呈现随增龄变化趋势，表现为幼年期表达水平较低，逐渐升高至青中年期表达达高峰，进入老年期表达下降；但其中不同因子的表达各具特点，通路起始部位的因子NGF、TrkA、IRS-1和通路末端的因子p—p70S6K、p—CREB随增龄变化明显，而中间的因子Akt变化不大。SW和TSG可以上调老年大鼠海马神经元NGF、TrkA、IRS-1、PI3K、p—p70S6K、p—CREB的表达水平。结论：参乌胶囊和二苯乙烯苷具有上调老年大鼠海马神经元NGF及TrkA受体、激活老年大鼠海马神经元PI3K信号转导通路的作用。

脑胶质瘤中miR-7与EGFR/PI3K信号通路相关基因蛋白表达的关系

目的观察脑胶质瘤组织、U251细胞中miR-7、EGFR/PI3K信号通路相关基因蛋白(EGFR、PI3K和AKT2)的表达关系。方法 42例脑胶质瘤患者,手术切除取肿瘤组织,其中8例选取癌旁正常脑组织。培养脑胶质瘤U251细胞,分为空白对照组(仅加入脂质体)、无义序列组(加入无义序列和脂质体)、miR-7转染组(转染miR-7基因片段)。采用RT-PCR法检测脑胶质瘤组织、各组U251细胞中的miR-7;免疫组化法检测胶质瘤组织中的EGFR、PI3K和AKT蛋白,RT-PCR和Western blotting法分别检测各组U251细胞EGFR、PI3K、AKT2 mRNA和蛋白。结果脑胶质瘤和正常脑组织中的miR-7 mRNA表达分别为1.47±0.27和3.47±0.15,两者比较,P<0.05。随着脑胶质瘤WHO级别的增加,miR-7表达逐渐减少,EGFR、PI3K和AKT2表达增加(P均<0.05)。脑胶质瘤组织中miR-7与EGFR、PI3K、pAKT表达呈负相关(r分别为-0.754、-0.528、-0.467,P均<0.05)。U251细胞转染miR-7后EGFR、PI3K和AKT表达降低(P均<0.05)。结论脑胶质瘤组织中miR-7表达减少,与EGFR/PI3K通路成员表达呈负相关;U251细胞转染miR-7后EGFR、PI3K和AKT表达降低。EGFR/PI3K通路可能是miR-7调控胶质瘤发生发展的重要机制之一。

CD151-整合素复合体激活PI3K信号通路促进内皮细胞迁移

目的研究CD151-整合素复合体在CD151促进人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移中的作用及机制。方法包装携带CD151、CD151-整合素结合突变体(CD151-AAA)和GFP的重组腺相关病毒,转染HUVECs。利用改良的Boyden趋化小室检测细胞迁移能力;Western blot检测各转染组细胞中CD151、磷脂酰肌醇(-3)激酶(PI3K)蛋白的表达;免疫共沉淀法检测各组细胞CD151和整合素α3的结合能力。结果 (1)CD151组较Control组及GFP组显著促进细胞的迁移,而CD151-AAA组细胞的迁移能力较CD151组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)CD151高表达促进PI3K信号通路激活,而CD151-AAA组PI3K信号通路的激活被减弱。(3)免疫共沉淀结果显示CD151与整合素α3结合形成复合体,但CD151-AAA突变破坏了CD151和整合素α3的结合。结论 CD151促进细胞迁移依赖于与整合素结合形成复合体,而破坏该复合体形成则导致CD151促细胞迁移能力显著减弱;该作用与PI3K信号通路的激活有关。

滑胎安胎协定方调节PI3K信号通路对肾虚型复发性自然流产子宫内膜蜕膜化的影响

目的:阐述肾虚型复发性自然流产中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-血清和糖皮质激素激酶1(SGK1)通路的相关分子表达的变化,探讨滑胎安胎协定方对妊娠早期子宫内膜蜕膜化的作用机制。方法:选择26例正常早期妊娠要求人工流产者为正常对照组,26例肾虚型复发性自然流产者为实验组。实验组蜕膜细胞分组,滑胎安胎协定方处理为中药组,并设同期对照组。Real-time PCR检测蜕膜组织及蜕膜细胞中PI3K信号通路下游分子3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)、SGK1、SGK2、SGK3、泌乳素(PRL)以及归巢细胞黏附分子CD44和其拼接变异体CD44v6的mRNA相对表达量。结果:肾虚型复发性自然流产蜕膜组织中SGK1、SGK2、SGK3和PRL的mRNA表达量显著低于正常对照组(P<0.01)。滑胎安胎协定方提高蜕膜细胞中SGK1的相对表达(P<0.05),并上调其下游子宫内膜蜕膜化标志分子PRL的相对表达(P<0.01)。结论:滑胎安胎协定方可通过PI3K-SGK1通路调节妊娠早期子宫内膜蜕膜化进程,从而影响肾虚型复发性自然流产的发生。

H_2S通过抑制TLR4/MyD88/PI3K信号通路减轻尿源性脓毒血症诱导的急性肾损伤

目的:探讨硫化氢(H_2S)减轻尿源性脓毒血症诱导的急性肾损伤的作用机制。方法:40只新西兰白兔随机分为对照组、假手术组、脓毒血症模型组、脓毒血症模型Na HS处理组和脓毒血症模型Na HS联合TAK-242(TLR4抑制剂)处理组,每组8只。各组分别按分组处理72 h后,采用HE染色观察兔肾组织病理学变化;使用全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)水平;采用ELISA法检测血液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)、降钙素原(PCT)以及炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用Western blot检测TLR4/MyD88/PI3K信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,脓毒血症兔肾组织呈现明显损伤,Na HS处理后肾脏病理明显改善,且血液中BUN、SCr、NGAL、KIM-1、PCT、IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著提高(P <0.05),但Na HS处理或联合TAK-242处理后显著降低;脓毒血症兔肾脏组织中的TLR4、MyD88、p-PI3K和p-Akt蛋白水平显著升高;Na HS处理或抑制TLR4则显著抑制TLR4/MyD88/PI3K信号通路激活。结论:H_2S可能通过抑制TLR4/MyD88/PI3K信号通路减少炎症因子及肾损伤因子的释放,从而有效减轻尿源性脓毒血症诱导的急性肾损伤。

投喂频率对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)PI3K信号通路及糖代谢相关酶基因表达的影响

适宜的投喂频率能提高对虾的代谢和免疫能力,加快生长,实现提质增效的目标。为探讨不同投喂频率对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)糖代谢及相关信号通路的影响,以(7.6±1.0)g的凡纳滨对虾为实验材料,设置2、3、4、6次/d,共4个投喂频率处理组,每组设3个平行,实验持续14 d,实验结束时取样,测定PI3K信号通路相关因子PI3K、Akt、HIF-1α、mTOR,代谢酶基因中HK、PFK、GAPDH、PK、FBP、PEPCK,葡萄糖转运蛋白GLUT1、GLUT2 mRNA表达水平的变化。结果发现:随着投喂频率的增加,PI3K信号通路关键基因表达的水平显著上升(P<0.05),其中6次/d投喂组PI3K、Akt、HIF-1α和mTOR表达水平显著高于2次/d投喂组(P<0.05),4次/d投喂组mTOR表达水平显著高于2次/d投喂组(P<0.05);代谢关键酶基因HK、PFK、GAPDH、PK、FBP、PEPCK的表达水平随投喂频率的增加而增加,其中6次/d投喂组糖酵解HK、PFK、GAPDH、PK酶基因表达水平显著高于2次/d投喂组(P<0.05),3、4和6次/d投喂组糖异生酶FBP表达水平显著高于2次/d投喂组(P<0.05),葡萄糖转运蛋白GLUT2在2、3、6次/d投喂频率处理组显著高于4次/d频率投喂组(P<0.05)。得出结论认为较高的投喂频率可以通过激活凡纳滨对虾糖代谢酶基因、糖转运蛋白及PI3K信号通路的表达来提高糖代谢水平。

射干麻黄汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织的保护作用及对EGFR/PI3K信号通路的调节

目的研究射干麻黄汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠内皮生长因子受体(EGFR)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信号通路的调节及气道平滑肌保护作用。方法75只SD大鼠按照随机数字表法分为5组,分别为对照组,模型组,射干麻黄汤低、中、高剂量组,每组15只。除对照组外其余大鼠均建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型,射干麻黄汤低、中、高剂量组分别灌胃给予大鼠10、20、40 g/kg的射干麻黄汤,1次/d。8周后,测定大鼠肺泡灌洗液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-1β水平、肺指数、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平、大鼠肺组织及气道组织病理学变化、肺组织中PI3K、EGFR mRNA水平及PI3K、EGFR蛋白水平。结果与模型组比较,射干麻黄汤各剂量组大鼠肺泡灌洗液TNF-α、IL-6及IL-1β水平、肺指数、肺组织MDA水平及PI3K、EGFR mRNA水平及PI3K、EGFR蛋白水平均显著降低,肺组织SOD活性显著升高(P<0.05),肺组织及气道平滑肌组织病理学明显改善。结论射干麻黄汤明显降低慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡灌洗液炎症因子水平,改善大鼠肺组织氧化应激损伤及气道平滑肌病理学变化,其机制可能与调节EGFR/PI3K信号通路有关。