乳腺浸润性导管癌组织中Pin1、CyclinD1蛋白表达变化及意义

目的观察Pin1和CyclinD1蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测108例乳腺浸润性导管癌和30例正常乳腺组织石蜡切片中Pin1和CyclinD1蛋白表达,分析二者表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果 Pinl蛋白在正常乳腺组织中不表达,在乳腺癌组织中阳性表达定位于细胞核,微弱表达时胞核少许轻微着色,过表达时胞核和胞质均着色。Pinl蛋白在55.6%(60/108)乳腺浸润性导管癌患者癌组织中呈阳性或强阳性表达。Pin1蛋白表达与患者组织学分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与年龄、肿瘤大小、临床分期无关(P均>0.05)。CyclinD1蛋白在正常乳腺组织中不表达。CyclinD1蛋白在乳腺癌组织中阳性表达定位于细胞核,65例表达阳性,阳性表达率为60.2%。CyclinD1蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床分期无关(P均>0.05)。在浸润性导管癌组织中Pin1与CyclinD1蛋白表达呈正相关(r=0.224,P<0.05)。结论 Pin1和CyclinD1蛋白在浸润性乳腺癌组织中呈高表达;二者可能在乳腺浸润性导管癌侵袭和转移中发挥作用。

PIN蛋白在生长素极性运输中的作用

PIN蛋白是生长素流出载体,它在细胞中的不对称分布决定细胞间生长素流方向。PIN蛋白网络系统决定生长素的极性运输,为植物体各部位的细胞提供了特异的位置和方向信息。从细胞水平上介绍PIN蛋白在生长素极性运输中的作用及对PIN蛋白功能调节的研究进展。

蓖麻生长素外输载体PIN蛋白家族的生物信息学分析

PIN蛋白家族是植物重要的生长素外输载体,通过介导细胞间的生长素极性运输来调控生长素在植物组织间的差异分布,从而调控植物的生长发育。目的:分离鉴定出蓖麻中PIN蛋白家族成员,为蓖麻生长素极性运输机制的研究奠定基础。方法:利用生物信息学分析软件,以拟南芥PIN基因家族序列为模板,在蓖麻基因组数据库中进行PIN基因鉴定,并对鉴定到的候选基因进行序列分析、所编码蛋白的结构域分析、信号肽预测、磷酸化位点分析以及系统进化分析。结果:蓖麻中共鉴定到7条编码PIN蛋白的同源序列,平均长度为537个氨基酸残基,平均分子量为58.64 ku,均属于脂溶性较好的碱性蛋白,结构稳定,具有9至10个跨膜结构域。系统进化分析结果表明,蓖麻PIN基因与同属于大戟科的木薯、橡胶树和麻风树的PIN基因进化关系较为密切。利用蓖麻基因表达数据库对鉴定到的RcPIN基因的表达模式进行了分析,并利用RT-PCR进行了验证,结果表明,RcPIN1-1和RcPIN1-2在根、叶、雌花和胚中表达水平较高,RcPIN2主要在根中表达,RcPIN3、5、6和8在所有检测的组织均有表达。

PIN2蛋白在水稻根尖细胞中定位方法的优化

PIN2蛋白作为生长素外排蛋白,在植物根的向地性生长中起重要作用。免疫定位法是一种可以将蛋白在植物细胞中快速准确定位的方法。本研究利用改良的免疫荧光定位法,对PIN2蛋白在水稻根尖细胞中的定位进行了观察,并与前人的两种方法进行比较。结果表明,与已有的方案比较,改良免疫荧光定位法可使PIN2蛋白在水稻根尖细胞中的位置快速准确地被观察到,且简化了操作步骤,操作方便快速,可广泛应用于植物其他蛋白的定位研究。

大豆GmPIN2家族基因调控根系发育功能初探

生长素作为重要的植物激素之一。生长素的转运参与了植物各组织器官发育调控。在拟南芥中,生长素转运调控主要由PIN家族蛋白所介导,其中拟南芥AtPIN2主要通过介导生长素向基运输调控根的向重力性。大豆中PIN2家族蛋白及其功能研究尚未有报道。本研究通过构建系统进化树和蛋白质结构域分析发现,大豆GmPIN2a和GmPIN2b为AtPIN2的同源基因。组织表达分析研究发现,GmPIN2a和GmPIN2b在根、根瘤原基和根瘤等组织中高表达。GmPIN2a和GmPIN2b在根部主要表达在根尖表皮和外部皮层细胞,在根瘤中GmPIN2a、GmPIN2b均定位于根瘤基部维管束区,此外,GmPIN2a定位在根瘤顶部表皮及外皮层。利用基因编辑技术CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats/CRISPR associated 9)同时敲除GmPIN2a和GmPIN2b后发现,Gmpin2ab突变体根具有明显的重力缺失表型。与野生型相比,Gmpin2ab和35S::GmPIN2b的根面积和侧根长度显著降低,Gmpin2ab侧根夹角显著上升,而35S::GmPIN2b侧根夹角不变。综上所述,GmPIN2a和GmPIN2b通过介导生长素向基运输对大豆根型调控具有重要作用。本研究为深入探究大豆PIN蛋白介导生长素极性运输在根形态建成的作用机制奠定了一定研究基础。

生长素极性输出载体PIN的研究进展

生长素极性运输几乎参与植物生长发育的每一个阶段,生长素在时间和空间上的动态分布主要依赖于生长素极性输出载体PIN-FORMED(PIN)蛋白的极性定位和输出活性.着重从磷酸化调控、极性锚定、胞内运输等方面介绍最近5年有关PIN蛋白极性定位领域中所取得的最新进展.归纳总结PIN蛋白极性定位和输出活性的分子调控机制,为进一步剖析PIN介导的生长素极性运输机制提供新的见解和思路.

PinX1在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨Pin2/TRF1结合蛋白X1(PinX1)与食管癌发生发展及与临床病理特征的关系。方法采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术方法(FCM)检测50例原发性食管癌患者的癌组织及食管切缘正常黏膜(距离癌5 cm以上)中PinX1的表达。结果 PinX1mRNA和蛋白在食管癌组织中表达显著低于食管正常组织(P<0.01)。且在食管癌中的表达与癌细胞分化程度、浸润深度及淋巴结转移呈负相关(P<0.05),但与患者年龄、性别无关(P>0.05)。结论 PinX1作为一种潜在的抑癌基因,其表达下调可能参与了食管鳞状细胞癌的发生和发展,是判定癌分化程度、浸润转移和判定预后的分子标志物。

PinX1基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析Pin2/TRF1结合蛋白X1(Pin2/TRF1-interacting protein X1,PinX1)基因在非小细胞肺癌组织中表达,探讨PinX1基因在肺癌发生发展中的作用及其临床意义。方法对56例肺癌组织及癌旁正常组织应用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测其中的PinX1的mRNA表达水平,应用端粒重复序列扩增(telomeric repeat anplication protocol,TRAP)-酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测其中的端粒酶活性。结果 PinX1在不同病理类型的肺癌组织中表达无显著性差异,与临床分期和预后之间呈显著相关性,与端粒酶活性呈负相关。结论 PinX1的下调可能与肺癌的发生、发展过程中端粒酶激活有关。检测PinX1的表达水平对评价肺癌预后有重要的临床价值。

pin1基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及与Cyclin D1、Ki67的关系

目的探讨卵巢恶性肿瘤组织中pin1、Cyclin D1、Ki67的表达水平以及三者相互关系。方法应用免疫组织化学法检测53例卵巢肿瘤组织病理切片中pin1、Cyclin D1、Ki67的表达水平,其中卵巢恶性肿瘤组31例,对照组22例为卵巢良性肿瘤。收集研究对象的临床资料,应用logistic回归模型分析指标间的相关性。结果卵巢恶性肿瘤组pin1高表达21例(67.74%),Ki67阳性表达27例(87.10%),Cyclin D1高表达19例(61.29%),对照组中pin1高表达1例(4.54%),Ki67阳性表达3例(13.64%),Cyclin D1高表达2例(9.10%),两组差异有统计学意义(均P<0.05)。经统计学分析,卵巢恶性肿瘤不同临床分期及有无淋巴结转移之间pin1、Ki67、Cyclin D1的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)。pin1高表达分别与Ki67阳性表达及Cyclin D1高表达有相关性(均P<0.05)。结论pin1基因在卵巢恶性肿瘤组织中表达上调;pin1基因的表达与卵巢恶性肿瘤的临床分期和淋巴结转移无明显相关性;卵巢恶性肿瘤组织中pin1基因表达水平与Ki 67、Cyclin D1表达水平相关,提示pin1基因可能参与细胞周期、细胞增殖的调控。

植物生长素极性运输及调控机制的研究进展

植物生长素的生物合成、运输方式、信号转导一直是植物学研究的热点,生长素的极性运输导致其在植物体内呈不同浓度的梯度分布,从而特异性地调节植物几乎全部的重要发育进程。本文系统阐述了生长素极性运输与非极性运输的运输方式、运输特点、运输机理,介绍了生长素极性运输在植物胚胎发育、花分生组织形成、侧根形态建成、向性生长运动等方面的生理作用,并讨论了生长素输入载体(AUX1蛋白)与输出载体(PIN蛋白家族)对生长素极性运输的综合调控机制,为进一步揭示生长素运输调控的作用机理提供参考。

生长素的外输载体PIN蛋白家族研究进展

生长素作为第一个被发现的植物激素,在植物许多发育过程中扮演着重要角色,如顶端优势、花序和叶序的发育、胚的发育、主根的发育、侧根和不定根的发生、向性生长以及维管组织的分化等,这些过程都依赖于生长素浓度梯度的建立。生长素的浓度梯度是由生长素的合成和极性运输共同建立的。生长素极性运输依赖于内输载体AUX/LAX家族、外输载体PIN蛋白家族和ABCB/PGP蛋白家族。该文将主要综述PIN蛋白家族的研究进展,介绍PIN蛋白的定位和功能研究、转录和转录后调控研究以及其胞内循环运输过程等方面的研究进展。

拟南芥突变体在生长素信号传导中的研究进展

近年来,在植物激素的信号传导研究上已取得突破性进展.生长素的信号传导通路研究除了在生长素结合蛋白(ABP)上有所进展外,在生长素应答基因(Aux IAA),生长素调节因子(ARF)以及感应突变体的研究上也取得较大进展.对生长素运输通路及PIN1蛋白的功能和其抑制剂的研究也使对生长素信号传导的认识更清楚.生长素应答基因(Aux IAA)是生长素处理后快速诱导的基因.Aux IAA蛋白具有组织特异性(例如SAU蛋白)可以用来研究外源激素对植物生长发育的影响.生长素调节因子(ARF)与生长素应答基因的启动子序列具有特异性结合,Aux IAA蛋白与生长素调节因子(ARF)相互作用,并引发一系列蛋白质降解.使用转基因的拟南芥突变体,能有效地研究生长素在植物体内的特异性分布.借助运输载体抑制剂,可以对生长素的极性运输有更深入的了解.已经证明PIN蛋白参与生长素运输并与肌动蛋白有关.而且生长素参与了赤霉素介导的植物伸长反应.

生长素信号传导研究进展(综述)

近年来,植物激素的信号传导研究已取得突破性进展。本文就生长素的信号传导通路研究,包括生长素应答基因(Aux/IAA),生长素调节因子(ARF)以及感应突变体的研究进行综述。

茉莉酸诱导侧根形成缺陷突变体asa1-1抑制子(soa)的鉴定与遗传分析

外源茉莉酸处理野生型拟南芥能够促进侧根的形成,而在asa1-1突变体中茉莉酸抑制侧根的形成,这与在该突变体背景下茉莉酸显著降低PIN2蛋白水平密切相关。为了进一步研究茉莉酸诱导PIN2蛋白水平下调的分子机制,文章采用正向遗传学的方法筛选asa1-1抑制子soa,期望获得茉莉酸处理后侧根发育恢复的突变体。通过筛选鉴定获得2个突变体:soa563和soa856。这2个突变体在10μmol/L茉莉酸甲酯处理条件下都能够恢复侧根发育,而且茉莉酸处理后PIN2蛋白水平降低的现象在soa563中被完全抑制,在soa856中被部分抑制。这些结果表明这两个突变基因可能影响了茉莉酸调控的PIN2蛋白水平下调途径,并且参于了茉莉酸对侧根发生的调控。对这两个基因的分离和功能研究将为阐明茉莉酸与生长素互作调控侧根发生的分子机制提供新的知识积累。

生长素极性运输中PIN蛋白磷酸化修饰研究进展

生长素在植物生长发育过程中具有重要功能,调控其生长发育的诸多过程。生长素通过极性运输建立浓度梯度,维持植物组织器官形成、生长以及形态建成。而PIN蛋白作为生长素运输载体在细胞膜上不对称分布,决定生长素流向,形成浓度梯度,为植物体内各部位细胞的生长发育提供特异的位置和方向信息。在此过程中PIN蛋白磷酸化/去磷酸化修饰以及网格蛋白所介导的胞吞作用等影响着PIN蛋白的极性分布,从而调控植株的形态建成。本研究主要讨论了PIN蛋白磷酸化修饰在生长素极性运输中作用机制,为深入剖析生长素极性运输中PIN蛋白磷酸化机制提供新的见解,也为进一步揭示生长素运输调控的作用机理提供理论参考。

生长素及其运输蛋白对植物铝胁迫的响应

铝对植物的毒害作用主要表现为抑制根尖生长,而根尖生长与生长素及其运输密切相关,铝可能影响了生长素及其代谢过程,但目前尚不清楚生长素及其运输蛋白如何参与植物应对铝胁迫响应。本文通过分析、总结前人研究,并结合自己的前期研究结果,初步阐述生长素或其运输蛋白对植物铝胁迫的响应,即铝影响生长素代谢的相关基因,干扰根尖生长素运输蛋白在细胞内分布及其囊泡运输,调控生长素的极性运输,进而抑制根尖生长。另一方面,生长素或其运输蛋白又参与了植物应对铝胁迫过程,这主要体现在参与了植物铝毒信号传递、根系铝内置化过程和减缓铝诱导的氧化胁迫。最后,本文提出了生长素及其运输蛋白对植物铝胁迫响应的可能模型。

蛋白酶抑制剂基因真空渗入法转化不结球白菜获得抗虫性材料

菜青虫及小菜蛾是危害白菜生产的主要害虫,为了获得新的抗虫白菜种质,以生长45天、花苔抽出时的“49菜心”Brassicarapassp.chinensisvar.utilisTsenetLee为材料,通过根癌农杆菌介导的真空渗入法,将马铃薯蛋白酶抑制剂基因(pinII)导入该植物基因组中。在142株处理株的后代种子中,采用除草剂Basta筛选,获得41株生长良好的抗性植株。经氯酚红试验、PCR以及植物基因组Southern杂交鉴定,证实目的基因已经整合入植物基因组中。对小菜蛾PlutellaxylostellaL.进行了转基因材料离体叶片的连续饲喂,调查了自1龄幼虫至化蛹、羽化的动态变化。结果表明,受试的转基因植株对小菜蛾的生长发育有明显的抑制作用。

生长素输出载体PIN家族研究进展

生长素极性运输调控植物的生长发育。生长素极性运输主要依赖3类转运蛋白:AUX/LAX、PIN和ABCB蛋白家族。生长素在细胞间流动的方向与PIN蛋白在细胞上的极性定位密切相关。PIN蛋白由1个中心亲水环和2个由中心亲水环隔开的疏水区组成。中心亲水环上含多个磷酸化位点,其为一些蛋白激酶的靶点。PIN蛋白受多方面调控,包括转录调控、转录后修饰以及胞内循环与降解,以响应内源和外源信号。目前,利用全基因组测序方法在禾谷类作物水稻(Oryzasativa)、玉米(Zea mays)和高粱(Sorghum bicolor)中分别鉴定出12、15和11个PIN基因,但仅有少数PIN基因的功能被报道。该文从蛋白结构、活性调控和功能验证等方面综述了PIN蛋白在拟南芥(Arabidopsis thaliana)和禾谷类作物中的研究进展,以期为探究PIN蛋白家族介导的生长素极性运输过程提供新的思路与线索。