Pirh2mRNA在原发性乳腺癌中的表达意义

目的探讨Pirh2 mRNA在乳腺肿瘤组织中的表达及其与乳腺癌发生发展的关系。方法回顾性分析湘雅医院乳腺科近10年间收治的乳腺肿瘤患者的临床资料,其中包括I,II期乳腺癌87例,III,IV期乳腺癌27例Pirh2 mRNA的表达,并以纤维瘤组织10例和正常乳腺组织6例作为对照。结果Pirh2 mRNA在乳腺癌组织中阳性表达率为43.9%(50/114),10例纤维瘤组织1例阳性,6例正常乳腺组织无表达。乳腺癌与纤维瘤和正常乳腺组织间的Pirh2 mRNA表达均有差异显著性(P=0.004)。I,II期乳腺癌和III,IV期乳腺癌中阳性率分别为37.9%(33/87)和63.0%(17/27),差异有显著性(P=0.022)。114例乳腺癌中5年内远处转移者60例,其Pirh2 mRNA阳性率为63.3%(38/60);无瘤生存≥5年者54例,其Pirh2 mRNA阳性率为22.2%(12/54),两者有差异有显著性(P=0.000)。结论Pirh2 mRNA在乳腺癌组织中呈较高表达,而在乳腺纤维瘤和正常组织中几乎不表达;在III,IV期阳性表达明显高于I,II期乳腺癌。Pirh2 mRNA可能与乳腺癌的发生发展有密切关系。

Pirh2在分化型甲状腺癌中的表达及意义

探讨Pirh2、P53在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及其意义。随机选取湖南省人民医院乳腺甲状腺外科2006.6～2011.6间DTC 64例,应用免疫组化法检测癌组织中的Pirh2、P53的表达。并以结节性甲状腺肿等良性甲状腺疾病病例作为对照,分析Pirh2、P53对DTC的可能作用。Pirh2、P53分别在64例DTC中阳性表达为68.8%(44/64)、28.1%(18/64),而在36例甲状腺良性疾病中阳性表达为25%(9/36)、16.7%(6/36)。Pirh2在DTC与良性肿瘤间的表达存在差异显著性(P<0.001)。P53在两者间的表达无差异显著性(P>0.05)。Pirh2表达与P53的表达具有正相关性(r=0.316、P<0.05)。Pirh2在DTC中呈较高表达,而在良性甲状腺疾病中表达率低,Pirh2可能与P53共同调节DTC的发生发展。

Pirh2蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Pirh2在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法检测57例喉鳞状细胞癌组织(喉癌组)及16例正常喉黏膜组织(对照组)中Pirh2蛋白表达,观察其与相应的临床病理学特征之间的关系。结果 Pirh2蛋白在喉癌组中阳性表达率为77.19%(44/57),在对照组中阳性表达率为18.75%(3/16),差异有统计学意义(P<0.01)。喉癌组Pirh2阳性表达率与年龄、性别、临床分型(肿瘤部位)、临床TNM分期和淋巴结转移均无关,与组织学分级(G1→G2+G3)有关(P<0.05)。结论 Pirh2可能与喉癌的发生和发展有关,检测Pirh2的表达可能为判断喉癌的恶性程度提供理论依据。

Pirh2、p53与乳腺癌发生发展的相关性分析

探讨Pirh2、p53在不同转移潜能乳腺癌细胞系中的表达及其与乳腺癌发生发展的相关性。应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测二者在MCF-10A、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s细胞株中的表达。Pirh2、p53在正常乳腺上皮及乳腺癌细胞系中表达差异有统计学意义(P<0.05);随着乳腺癌病变程度增加,Pirh2表达水平上升,p53表达水平下降,各组间差异有统计学意义(P<0.05),且Pirh2、p53表达呈显著负相关(P<0.01)。高表达Pirh2可能通过降解p53促进乳腺癌的发生发展。

Pirh2 shRNA增强肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性的研究

目的观察短发夹状RNA沉默泛素连接酶pirh2(P53 induced RING-H2 protein)基因表达后,肺腺癌细胞A549对顺铂敏感性及肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)表达的变化。方法构建靶向pirh2基因的短发夹状RNA(psiRNA-Pirh2)及阴性对照RNA(psiRNA-Con),并转染A549细胞,实时定量PCR和免疫印迹法检测A549细胞中pirh2基因和蛋白的表达变化。设立顺铂组(5μg/ml)、psiRNA-Pirh2转染组和顺铂(5μg/ml)+psiRNA-Pirh2组,CCK-8法检测A549细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测肺耐药蛋白的表达,以正常A549细胞为对照。结果psiRNA-Pirh2特异性抑制了A549细胞pirh2 mRNA和蛋白质的表达(均P<0.05)。顺铂及psiRNA-Pirh2组A549细胞增殖能力分别为正常对照组的(46.82±6.14)%和(37.45±6.83)%,均P<0.05,但均高于二者联合组[(28.24±6.49)%],且联合组细胞凋亡率最高,达(19.8±5.1)%,S期细胞最少,为(15.5±1.6)%(P<0.05)。顺铂处理组A549细胞LRP表达较正常对照组增强(P<0.05),但联用psiRNA-Pirh2后,LRP蛋白水平有所下降(P<0.05)。结论靶向pirh2的shRNA可特异性降低A549细胞中pirh2的表达,抑制A549细胞增殖,使其阻滞在G2/M期,诱导凋亡,下调肺耐药蛋白的表达并增强其对顺铂的化疗敏感性。

Pirh2和P27^(kip1)蛋白在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨pirh2、p27Kip1在肺癌和癌旁组织中表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测53例肺癌和17例癌旁石蜡包埋存档标本组织中pirh2和p27kip1蛋白的表达,并对其所在肺癌组织不同病理类型、分级、和临床分期及转移中的表达水平进行对统计学分析。结果pirh2蛋白在肺癌组织中呈高表达,表达率为79.2%,P27Kip1蛋白呈低表达,为22.6%,二者与癌旁组织相比(阳性表达率分别为11.8%和64.7%),差异具有显著性意义(P<0.01),但是二者与肿瘤的病理类型、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期均无明显相关关系(P>0.05)。Pirh2表达阳性的肺癌组织中,p27Kip1的阳性率较低,二者呈显著负相关。结论pirh2过表达和p27Kip1蛋白的低表达可促进肿瘤的发生;二者之间呈负性相关关系,提示降解p27Kip1蛋白可能是pirh2促进肿瘤形成的途径之一。

Pirh2和p27^(kip1)蛋白在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及意义

目的:探讨Pirh2和p27^(kip1)在皮肤恶性黑色素瘤组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测Pirh2与p27^(kip1)分别在45例皮肤恶性黑色素瘤标本与20例正常皮肤标本组织中的表达情况。结果:45例皮肤恶性黑色素瘤中Pirh2的阳性表达率为68.89%(31/45),p27^(kip1)的阳性表达率为17.78%(8/45);20例正常皮肤组织中Pirh2的阳性表达率为0%,p27^(kip1)的阳性表达率为75.00%(15/20)。正常皮肤组与皮肤恶性黑色素瘤组间比较,Pirh2与p27^(kip1)的表达差异有统计学意义,且皮肤恶性黑色素瘤组的Pirh2与p27^(kip1)的表达呈负相关(P<0.01)。结论:Pirh2在皮肤恶性黑色素瘤组织中的表达增加,与p27Kip1的表达呈负相关,提示两者可能参与了皮肤黑色恶性素瘤的发生和发展。

Pirh2和Naked2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析乳腺癌组织中Pirh2和Naked2的表达情况及其临床意义。方法:随机选取在2011年1月—2013年12月期间收治的96例乳腺癌标本作为观察组,同时选取癌旁组织作为对照组,应用免疫组织化学方法对Pirh2和Naked2表达情况进行检测,分析Pirh2和Naked2表达与乳腺癌病理分级的关系及Pirh2和Naked2两者的相关性。结果:Pirh2在乳腺癌组织中高表达,癌旁组织中低表达,Naked2在乳腺癌组织中低表达,癌旁组织中高表达(P<0.05);年龄、肿瘤大小与癌中Pirh2和Naked2的表达无关(P>0.05);肿瘤病理分级和淋巴结转移与Pirh2和Naked2的表达相关(P<0.05);Pirh2和Naked2的表达呈负相关。结论:Pirh2和Naked2对乳腺癌的生物学行为的判断及预后有一定的提示作用。

PIRH2在肾细胞癌中的表达及其意义

目的检测PIRH2蛋白在肾细胞癌中的表达,探讨其与临床病理特征间的关系。方法利用免疫组化SP法分别检测肾癌及对应癌旁正常肾组织(各56例)中PIRH2的表达情况,以软件SPSS 17.0进行统计分析。结果 PIRH2在肾癌组织和癌旁正常肾组织中的阳性表达率分别为55.4%和16.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。肾癌中PIRH2的高表达与临床分期、病理分化程度有关(P<0.05),而与病理类型、性别、年龄等无关(P>0.05)。结论 PIRH2可能参与了肾癌的发生发展过程,靶向抑制PIRH2表达有望成为晚期肾癌治疗的新方法。

MicroRNA-320a靶向Pirh2调控非小细胞肺癌细胞增殖、迁移研究

目的:探究miR-320a靶向Pirh2对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移的调控作用。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC癌组织、癌旁组织和细胞株中miR-320a mRNA表达水平。采用miR-320a mimics质粒转染,CCK8法检测NSCLC细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,TargetScan生物信息学软件预测miR-320a与Pirh2的相互关系,并通过荧光素酶报告基因验证。采用siRNA干扰细胞内Pirh2表达,观察Pirh2基因沉默后细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过共转染miR-320a mimics和pcDNA3.1-Pirh2质粒,观察Pirh2表达增加后对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:人NSCLC癌组织和细胞株中miR-320a表达水平降低。过表达miR-320a明显抑制NSCLC细胞增殖和迁移。TargetScan生物信息学软件预测显示miR-320a与Pirh2的3′UTR存在结合位点,荧光素酶报告实验显示miR-320a mimics显著降低WT-Pirh23′UTR的荧光素酶活性。Pirh2基因干扰后细胞增殖和迁移能力显著降低,共转染miR-320a mimics和pcDNA3.1-Pirh2质粒后,细胞增殖和迁移能力显著高于转染miR-320a mimics+pcDNA3.1细胞。结论:miR-320a通过下调Pirh2抑制NSCLC细胞增殖和迁移。

泛素连接酶Pirh2与恶性肿瘤相关性的研究进展

泛素连接酶Pirh2(p53-induced RING-H2 protein)是一种具有E3连接酶活性的新蛋白,能促进p53发生泛素化而降解,从而使p53抑制肿瘤生长的功能减弱或消失,导致肿瘤发生和进一步恶化。近年来研究发现,多种恶性肿瘤中Pirh2蛋白的表达量有明显变化,这提示Pirh2在恶性肿瘤的发生、发展中可能具有重要的作用;Pirh2可能作为一个癌基因,在肿瘤发生过程中调节一些信号转导通路。因此,推测Pirh2可作为肿瘤基因治疗的一个潜在靶点。本文就Pirh2与恶性肿瘤相关性的最新研究进展作一简要综述。

Pirh2 mRNA,Her-2,VEGF,MVD及TNF-α对Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌预后的影响

目的探讨Pirh2 mRNA,Her-2,VEGF,MVD及TNF-α等因素在Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌中劣性生物学行为的意义。方法随机选取湘雅医院乳腺科近10年间获得随访的Ⅰ,Ⅱ期(按2003年AJCC的TNM分期)女性乳腺癌87例,应用原位杂交法检测癌组织中的Pirh2 mRNA的表达;免疫组化SABC法检测Her-2,VEGF,MVD和TNF-α的表达。结合临床病理参数,采用多因素Cox比例风险模型分析Pirh2 mR-NA,Her-2等对乳腺癌预后的影响。结果术后5年内出现远处转移者40例(A组),无瘤生存5年以上者47例(B组)。A组中Pirh2 mRNA的表达(57.5%)明显高于B组(21.3%)(P=0.0009)。Pirh2 mRNA表达与Her-2无相关性,(r=0.020,P=0.856)。Kaplan-Meier的生存分析显示:Pirh2 mR-NA,Her-2,VEGF,MVD和TNF-α阳性表达以及腋窝淋巴结阳性患者的预后比阴性患者明显为差(均为P<0.05)。多因素Cox回归模型分析提示Pirh2 mRNA,Her-2,VEGF,MVD和TNF-α为Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌的独立预后因素。结论Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌患者的Pirh2 mRNA,Her-2,VEGF和TNF-α等呈阳性表达,提示预后差。

Pirh2对人肝细胞肝癌细胞增殖的影响

目的探讨泛素连接酶Pirh2对人肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖的影响。方法流式细胞仪测定血清饥饿释放过程中SMMC-7721和Hep3B细胞的周期分布情况,并用Western blot检测增殖过程中Pirh2及p27Kip1蛋白表达。在SMMC-7721和Hep3B细胞中转染Pirh2shRNA,cellcounting kit-8(CCK-8)和流式细胞分析检测转染后细胞增殖的能力,Western blot检测细胞周期调控因子的表达。结果细胞饥饿72h,两种细胞周期进程停滞在G1/G0期,血清释放后增殖到S期。在此过程中,Pirh2表达上调,p27Kip1表达下调。转染Pirh2shRNA组相较于对照组和转染空载体质粒组,CCK-8和流式细胞分析显示细胞的增殖能力下降及细胞的周期进程明显受到抑制(P<0.05)。结论 Pirh2参与HCC细胞的周期进程调控,有望成为HCC治疗的新靶点。

肾透明细胞癌组织中泛素连接酶Pirh2蛋白的表达及其临床意义

目的探讨肾透明细胞癌组织中泛素连接酶Pirh2蛋白（p53-induced RING—H2 protein，Pith2）的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法肾透明细胞癌标本92例，G1 29例、G2 36例、G3 24例、G4 3例，T1 55例、T2 16例、T3 20例、T4 1例；正常肾组织标本20例作为对照组。采用免疫组织化学方法检测两组标本组织中Pirh2蛋白的表达，并结合临床资料进行分析。结果正常肾组织中Pith2蛋白表达率为20．0％（4／20），肿瘤组织为52．2％（48／92），且随组织病理分级和分期增加，Pirh2蛋白表达量逐渐增高。Pirh2蛋自在G1、G2、G3、G4组织中的高表达阳性率分别为24．1％、30．6％、75．0％和66．7％，T1、T2、T3、T4期肿瘤组织中高表达阳性率分别为25．5％、50．0％、75．O％和100．0％，分级问分期问差异有统计学意义（P=0．001）。随访7～70个月，平均42个月，复发10例，复发组与未复发组中Pirh2蛋白高表达阳性率分别为80．0％和36．6％，差异有统计学意义（P=0．022）。Kaplan．Meier曲线显示，Pith2蛋白高表达组与低表达组患者术后总生存率（71．1％与94．4％）和无复发生存率（78．9％与96．3％）比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Pirh2蛋白高表达与肾透明细胞癌的恶性程度及预后相关，Pirh2与肾透明细胞癌的发生和发展存在相关性。

人PIRH2b与ARF4相互作用的初步研究

目的利用酵母双杂交技术筛选PIRH2b的相互作用蛋白。方法以PIRH2b为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术筛选人胎肝cDNA文库,用GST-pull down验证PIRH2b与ARF4在体外的相互作用,并用绿色荧光蛋白标记PIRH2b,红色荧光蛋白标记ARF4,观察两者在肝癌细胞株Hep3B中的亚细胞定位。结果利用酵母双杂交筛选到一个能与PIRH2b相互作用的蛋白ARF4,GST-pull down验证了两者在体外的相互作用,荧光标记共定位结果显示两个蛋白共定位于Hep3B细胞的核周区域。结论首次发现并证实了PIRH2b与ARF4的相互作用,PIRH2b对ARF4的功能可能有重要影响。

Pirh2与p53在甲状腺癌中的研究进展

甲状腺癌来源于甲状腺滤泡上皮细胞,是最常见的甲状腺恶性肿瘤,约占全身恶性肿瘤的1.3%-1.5%,且近年来有增长趋势。p53基因的突变、缺失、重组和失活在人类许多肿瘤的形成和发展过程中起重要作用。泛素连接酶Pirh2是一种具有E3连接酶活性的新蛋白,能促进p53发生泛素化而降解,从而使p53抑制肿瘤生长的功能减弱或消失,导致肿瘤发生和进一步恶化。随着对肿瘤基因的深入研究,找到与甲状腺癌发生、发展、转归相关的癌基因,为肿瘤的诊治提供临床依据,成为目前研究热点。本文就Pirh2与p53在甲状腺癌中研究进展进行综述。

泛素连接酶Pirh2在肿瘤中的研究进展

泛素连接酶Pirh2是体内E3泛素连接酶的一种，可通过泛素一蛋白酶体途径介导p53降解，抑制p53的生物学功能。近来研究表明Pirh2在人体多种肿瘤细胞中呈过度表达，提示其可能参与肿瘤发生和发展过程，将来可能作为肿瘤基因治疗的一个潜在靶点。

泛素连接酶PIRH2和p53蛋白在胃癌中的表达关系及意义

目的研究PIRH2和p53蛋白在胃癌组织中的表达水平及其与胃癌生物学行为和预后的关系。方法应用免疫组化方法检测84例胃癌组织中PIRH2和p53蛋白的表达水平。结果 PIRH2和p53蛋白表达之间呈显著负相关(P<0.05)。PIRH2和p53蛋白表达水平与胃癌淋巴结转移、远处转移和pTNM分期均密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、组织类型、浸润深度无显著相关(P>0.05)。PIRH2+/p53-组的胃癌患者3年生存率显著低于其他组(PIRH2-/p53-,PIRH2+/p53+,PIRH2-/p53+)(P=0.002,0.013,0.005)。且多因素生存分析显示,PIRH2和p53蛋白水平是独立的预后因素(P=0.003)。结论 PIRH2和p53蛋白表达与胃癌淋巴结转移及预后有关;PIRH2蛋白表达阳性和p53蛋白表达阴性提示胃癌不良预后。

Impact of siRNA targeting pirh2 on proliferation and cell cycle control of the lung adenocarcinoma cell line A549

The aim of this study was to investigate the role of pirh2(p53-induced RING-H2)protein in the proliferation,apoptosis and cell cycle control of the lung cancer cell line A549.Pirh2 expression was detected by immunofluores-cence,Western blot analysis and real-time polymerase chain reaction(PCR).Cell proliferation was assessed by cell counting kit-8(CCK-8).Cell cycle control and apoptosis were analyzed by flow cytometry.The results showed that pirh2 was expressed in the cytoplasm of A549 cells.The inhi-bition of pirh2 expression by siRNA(psiRNA-pirh2)resulted in reduced cell proliferation and increased apoptosis.In addition,the number of G0/G1 phase cells was increased but G2/M cells were not affected significantly.Taken together,the inhibition of pirh2 expression in the lung adenocarcinoma cell line A549 resulted in reduced tumor cell growth via the inhibition of cell proliferation,the activation of apoptosis and the interruption of cell cycle transition.