头穴丛刺对AD大鼠cAMP-PKAc-CREB及胆碱能的影响

观察头穴丛刺对AD大鼠cAMP、PKAc、CREB及血清Ache、CHAT含量的影响。方法:采用Aβ1-42双侧海马区注射建立AD大鼠模型,随机将大鼠分为空白组、模型组、头穴丛刺组、传统头针组和体针组。每组各12只,通过western blot及放免法观察大鼠海马区cAMP、PKAc、p-CREB/CREB的变化,采用固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清Ache、CHAT含量。结果:各治疗组与模型组相比cAMP、P-CREB/CREB、PKAc/β-action表达均具有显著性差异(P<0.05),cAMP水平上:体针组与头穴丛刺组相比具有统计学差异(P<0.05),头穴丛刺组与传统头针组相比有上升趋势,但无显著性差异(P>0.05),体针组与传统头针组比较无显著性差异(P>0.05);在p-CREB/CREB水平上:体针组与头穴丛刺组相比具有显著性差异(P<0.05),头穴丛刺组与传统头针组相比有上升趋势,但无显著性差异(P>0.05),体针组与传统头针组比较具有统计学差异(P<0.05);在PKA/β-actin水平上:传统头针组、体针组与头穴丛刺组相比具有统计学差异(P<0.05),体针组与传统头针组比较无显著性差异(P>0.05)。头穴丛刺组、传统头穴组、体针组与模型组相比(P<0.05),Ache、CHAT表达具有统计学差异;Ache水平上:体针组与头穴丛刺组相比(P<0.05),具有统计学差异,头穴丛刺组与传统头针组相比有下降趋势,但(P>0.05),两者比较无显著性差异,体针组与传统头针组比较(P>0.05),两者比较无显著性差异;在CHAT水平上:体针组与头穴丛刺组相比(P<0.05),具有统计学差异,头穴丛刺组与传统头针组相比(P<0.05),两者比较有显著性差异,体针组与传统头针组比较(P>0.05),无统计学差异。结论:头穴丛刺可以提高c AMP、PKAc、p-CREB/CREB水平,明显降低血清中Ach E的活性,增强Ch AT的活性,进而改善大鼠学习记忆能力。

益肾达络饮对EAE小鼠PKAC-a、RhoA表达的影响

目的研究PKA-RhoA信号传导通路在EAE发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制,以及对EAE小鼠中枢神经损伤后神经再生的作用。方法采用Western blot方法测定各组小鼠脑和脊髓组织中PKAC-a、RhoA的含量,旨在了解PKAC-a、RhoA在EAE发生后的作用以及益肾达络饮对神经再生的作用情况。结果检测脑组织中PKAC-a表达显示,正常组和模型组、中药组、激素组均有差异(P值均<0.05);模型组和抑制剂组、中药组、激素组均有显著性差异(P值均<0.05);中药组和激素组有极显著性差异(P值<0.01)。RhoA根据多项比较组间P值可知:脊髓组织中,正常组和模型组、激素组、中药+激素组、抑制剂组均有差异(P值均<0.05);模型组和抑制剂组有显著性差异(P值<0.05),和中药组、激素组、中药+激素组有极显著性差异(P值<0.01);脑组织中,模型组和中药+激素组有显著性差异(P<0.05),和中药组有极显著性差异(P值<0.01)。结论 cAMP-PKA-RhoA信号通路与p38MAPK的表达有关,多发性硬化(MS)在中枢神经系统中存在发病部位的区别,中药益肾达络饮和激素醋酸泼尼松在促进中枢神经再生时均有疗效,作用大小不同。

大麻素对脑出血大鼠皮质内PKAC-β、c-fos及BDNF表达量的影响

目的探讨大麻素(WIN55,212-2)对大鼠局灶性脑出血后同侧大脑皮质内PKAC-β、c-fos和BDNF mRNA及蛋白质表达量的影响。方法采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型,术后0.5h后腹腔注射药物,均在24h后取脑组织;采用免疫组化方法定位PKAC-β、c-fos和BDNF蛋白;采用RT-PCR检测各组大脑皮质内PKAC-β、c-fos和BDNF mRNA的表达;采用Western blot检测各组大脑皮质内PKAC-β和BD-NF蛋白质的表达。结果WIN55,212-2上调同侧大脑皮质内BDNF mRNA和蛋白质的表达,同时也上调c-fos mRNA表达量,但抑制PKAC-β mRNA和蛋白质的表达;免疫组化结果显示PKAC-β,c-fos和BDNF蛋白分别位于神经元胞膜、细胞核或胶质细胞的胞质中。结论WIN55,212-2促进大脑皮质内BDNF蛋白的合成,为其临床上治疗脑血管病提供理论依据。

二苯乙烯苷对脑缺血再灌注大鼠神经保护的作用机制

目的:探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用机制。方法:雄性SD大鼠96只,随机分为4组:对照组,模型组,小剂量[60mg/(kg·d)]TSG组,大剂量[120mg/(kg·d)]TSG组,每组24只。TSG或生理盐水灌胃7d后应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,术后6,24,48h及7d观察动物神经行为学变化并评分,免疫组织化学法检测神经生长因子(NGF)、生长相关蛋白(GAP)-43和蛋白激酶A催化亚基(PKAc)蛋白的表达。结果:神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除6h时间点外,两个剂量TSG治疗组其余各时间点神经功能评分明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,两个剂量TSG组各时间点NGF,GAP-43及PKAc蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。NGF,GAP-43及PKAc蛋白表达两两之间呈正相关。结论:TSG可能通过诱导大鼠脑缺血-再灌注损伤后NGF蛋白表达上调,激活PKA通路,增加轴突再生标志物GAP-43蛋白的表达,从而起到神经保护作用。

DNA依赖蛋白激酶在鼻咽癌病变中的表达及意义

[目的]研究DNA依赖蛋白激酶(DNA-PKcs)在鼻咽部正常黏膜、鼻咽炎、鼻咽非典型增生及鼻咽癌中的表达,并探讨DNA-PKcs表达与鼻咽癌临床病理参数间的关系。[方法]应用免疫组化EnVision法检测10例鼻咽部正常黏膜、10例鼻咽炎、21例鼻咽非典型增生和53例鼻咽癌组织中DNA-PKcs蛋白的表达水平,并结合临床病理特征进行分析。[结果]DNAPKcs蛋白在正常鼻咽黏膜及鼻咽炎组织中呈低表达,在鼻咽非典型增生及鼻咽癌组织中呈高表达,阳性表达率分别为0、20.00%、71.42%和64.15%;其表达与鼻咽癌组织分化类型相关(P=0.023),与性别、年龄、临床分期及淋巴结转移无明显相关性(P均>0.05)。[结论 ]DNA-PKcs在鼻咽癌病变过程中可能发挥一定的作用。