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PKC-mTOR通路对糖尿病大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制
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作者 范秀娟 蔡英兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1797-1805,共9页
目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA... 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA)组、diabetes+0.2μmol/L PMA组、diabetes+0.5μmol/L PMA组、diabetes+2μmol/L双吲哚马来酰亚胺I(GF109203X)组、diabetes+5μmol/LGF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组,每组各9只。体外高糖环境下培养大鼠原代胃平滑肌细胞分为对照(CK)组、0.1μmol/L PMA处理组、0.2μmol/L PMA处理组、0.5μmol/L PMA处理组、2μmol/L GF109203X处理组、5μmol/L GF109203X处理组和10μmol/L GF109203X处理组。采用离体肌条实验技术检测胃窦平滑肌的自发性收缩,HE染色和流式细胞术检测大鼠胃平滑肌的病理变化及细胞凋亡,Western blot检测SCF、c-Kit、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1、caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达变化。结果:(1)与control组相比,diabetes组胃窦平滑肌收缩性下降(P<0.05),胃平滑肌萎缩,细胞凋亡率增加(P<0.01),SCF、c-Kit和p-mTOR表达均下降(P<0.05或P<0.01)。(2)与diabetes组相比,diabetes+0.1μmol/L PMA组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+0.2μmol/L PMA组(P<0.05)和diabetes+0.5μmol/L PMA组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著增强,diabetes+0.2μmol/L PMA组和diabetes+0.5μmol/L PMA组mTOR、p70S6K(T421/S424)和p70S6K(T389)的磷酸化水平升高(P<0.05),diabetes+0.5μmol/L PMA组4E-BP1的磷酸化水平升高(P<0.05)。(3)与diabetes组相比,diabetes+2μmol/L GF109203X组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+5μmol/L GF109203X组(P<0.05)和diabetes+10μmol/L GF109203X组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著减弱,diabetes+5μmol/L GF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组mTOR、p70S6K(T389)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+10μmol/L GF109203X组p70S6K(T421/S424)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+GF109203X(2、5和10μmol/L)组4E-BP1的磷酸化水平均下降(P<0.05)。(4)与CK组相比,GF109203X(2、5和10μmol/L)处理组大鼠胃平滑肌细胞凋亡率增加(P<0.01),PMA(0.1、0.2和0.5μmol/L)处理组Bax和caspase-3表达均下降(P<0.05),Bcl-2的表达增加(P<0.05)。结论:在糖尿病大鼠胃平滑肌PKCmTOR信号通路的下调通过调节Bax/Bcl-2和caspase-3导致胃平滑肌细胞凋亡,并下调SCF和c-Kit,这可能会在糖尿病胃动力障碍中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 胃平滑肌 糖尿病胃动力障碍 pkc-mTOR信号通路 干细胞因子 细胞凋亡
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BDNF经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号通路调控气道ASMC炎症反应
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作者 聂颖 徐辉甫 +3 位作者 王丹 张领领 邵会 乔静(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期531-536,共6页
目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号影响气道细胞收缩及炎症反应的分子机制。方法:建立TNF-α诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)炎症模型,采用BDNF-siRNA和BDNF重组蛋白对模型进行干预,测定各组ASMC炎症因子IL-17、Eota... 目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号影响气道细胞收缩及炎症反应的分子机制。方法:建立TNF-α诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)炎症模型,采用BDNF-siRNA和BDNF重组蛋白对模型进行干预,测定各组ASMC炎症因子IL-17、Eotaxin水平及BDNF、TrkB浓度、PKC活性变化及Ca^(2+)、三磷酸肌醇(IP3)浓度变化。结果:与正常组相比,模型组细胞异常增殖,细胞内炎症因子IL-17、Eotaxin增加,BDNF、TrkB蛋白和转录水平明显升高,同时引起其下游PKCIP3-Ca^(2+)信号上调。结论:BDNF可能通过激活下游PKC信号通路诱发气道重塑,参与气道高反应形成。 展开更多
关键词 BDNF TrkB-pkc-Ca^(2+)信号 ASMC 气道炎症反应
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PKC-α和PKC-δ在不同发育阶段小鼠睾丸中的差异性表达 被引量:5
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作者 冯晨 付伟 +3 位作者 赵咏梅 陈菲 宗志宏 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期780-782,共3页
Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse tes... Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse testis were identified by Western blotting and RT\|PCR. The expression of both PKC isoenzymes in the developing mouse testis was also examined. In testes of mouse at various developmental stages, both the protein and the mRNA of PKC\|α were uniformity; but the PKC\|δ expression occurred in the testes of 3\|week old, perhaps even relatively late in spermatid development. The results suggest that each isoenzyme may have different roles in processing and modulating physiological cellular responses of spermatogenesis. 展开更多
关键词 pkc-Α pkc-δ 发育阶段 小鼠睾丸 差异性表达
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三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡对PKC-ε的影响 被引量:7
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作者 范玉华 杭鹏洲 杜智敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期782-786,共5页
目的探讨三氧化二砷诱导新生乳鼠心室肌细胞(NRVCs)凋亡过程中对PKC-ε的影响。方法 NRVCs随机分为6组:正常组(Ctrl)、三氧化二砷高、中、低剂量组(10、5、2μmol.L-1)、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)+三氧化二砷(5μmol.L-1)组、PKC-ε... 目的探讨三氧化二砷诱导新生乳鼠心室肌细胞(NRVCs)凋亡过程中对PKC-ε的影响。方法 NRVCs随机分为6组:正常组(Ctrl)、三氧化二砷高、中、低剂量组(10、5、2μmol.L-1)、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)+三氧化二砷(5μmol.L-1)组、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)组。采用MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色和TUNEL法检测细胞凋亡。应用Western blot技术检测PKC-ε蛋白表达水平。结果三氧化二砷(5、10μmol.L-1)孵育24 h剂量依赖性地降低NRVCs活力,诱导NRVCs凋亡。此外,三氧化二砷(5μmol.L-1)增加PKC-ε蛋白的表达。而抑制PKC-ε能够进一步促进三氧化二砷降低NRVCs活力,并加重NRVCs凋亡。结论三氧化二砷上调PKC-ε蛋白水平,而抑制PKC-ε促进三氧化二砷加重心肌细胞凋亡。本研究表明三氧化二砷能够引起PKC-ε表达异常改变,提示PKC-ε可能参与三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡的病理过程。 展开更多
关键词 三氧化二砷 pkc-ε 凋亡 pkc-ε抑制肽 心室肌细胞 Hoechst 33342 TUNEL
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Rottlerin在哮喘气道重塑模型中对PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路的影响 被引量:12
5
作者 李良昌 金光玉 +3 位作者 郑明昱 秦向征 李光昭 延光海 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期588-592,共5页
目的探讨PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路在喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法 40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只,分别为正常对照组;哮喘模型组;PKCδ抑制剂Rottlerin治疗组;mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)治疗组。... 目的探讨PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路在喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法 40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只,分别为正常对照组;哮喘模型组;PKCδ抑制剂Rottlerin治疗组;mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)治疗组。在末次激发24 h后小鼠肺组织行HE染色、PAS染色。用图像分析软件测定支气管壁厚度(WAt/Pbm)、支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm)及杯状细胞百分比。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5、IL-13含量以及用Western blot检测肺组织PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达。结果哮喘模型组小鼠与正常对照组小鼠相比较BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平增高;肺组织WAt/Pbm、WAm/Pbm、杯状细胞百分比和PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。Rottlerin和Rapamycin治疗组与哮喘模型组相比较BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平降低;肺组织WAt/Pbm、WAm/Pbm、杯状细胞百分比和PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。而Rottlerin治疗组和Rapamycin治疗组之间上述各指标无显著性差异(P>0.05)。结论 Rottlerin抑制哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能部分是通过抑制PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路而实现的。 展开更多
关键词 气道重塑 pkc-δ MTOR NF-κB
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大鼠视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达 被引量:4
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作者 蔡艳 张恩东 +4 位作者 王晓晟 伍校琼 王慧 杨静 罗学港 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期251-255,共5页
为了探讨视神经切断后视网膜内部是否存在突触可塑性改变,本实验采用大鼠视神经切断模型,通过免疫组织化学方法检测视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达变化。结果显示:正常视网膜中,PKC-α和recoverin阳性产物主要见于... 为了探讨视神经切断后视网膜内部是否存在突触可塑性改变,本实验采用大鼠视神经切断模型,通过免疫组织化学方法检测视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达变化。结果显示:正常视网膜中,PKC-α和recoverin阳性产物主要见于视网膜内核层、内网层及节细胞层,另外外核层也可见少量recoverin阳性细胞。视神经切断后3d,大鼠视网膜内网层高倍镜下可见PKC-α和recoverin免疫阳性终末的数量开始增加,14d时增至最高,21d、28d呈现逐渐减少的趋势。本研究结果提示视神经切断后视网膜双极细胞与节细胞之间的突触可能存在早期增生,后期溃变的可塑性变化。 展开更多
关键词 视神经切断 pkc-Α RECOVERIN 视网膜 大鼠
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PKC-βⅡ、NF-κBp50在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义 被引量:7
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作者 孟伟 石雨薇 +3 位作者 顾霞 王富强 叶子茵 谢心苗 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期56-59,共4页
目的研究蛋白激酶C-βⅡ(Protein kinase C-βⅡ,PKC-βⅡ)、核因子κBp50(Nuclear factor of kappa Bp50,NF-κBp50)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况与其意义。方法采用免疫组化方法检测68例D... 目的研究蛋白激酶C-βⅡ(Protein kinase C-βⅡ,PKC-βⅡ)、核因子κBp50(Nuclear factor of kappa Bp50,NF-κBp50)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况与其意义。方法采用免疫组化方法检测68例DLBCL,7例淋巴结反应性增生中PKC-βⅡ、NF-κBp50的表达。结果 PKC-βⅡ、NF-κBp50在68例DLBCL的阳性表达率分别为77.94%(53/68)和70.59%(48/68)。PKC-βⅡ在DLBCL亚型中表达的差异有统计学意义(P<0.001),NF-κBp50在DL-BCL亚型中表达的差异具有统计学意义(P<0.05),PKC-βⅡ、NF-κBp50在DLBCL中non-GCB(非生发中心型)中表达高于GCB(生发中心型)。它们在性别、民族、年龄、部位方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。PKC-βⅡ与NF-κBp50在DLBCL中的表达呈正相关(rs=0.429,P<0.001)。结论 PKC-βⅡ和NF-κBp50在DLBCL不同亚型之间表达的差异,可能有助于DLBCL亚型的诊断和预后的判断。PKC-βⅡ对NF-κBp50表达有正向调节作用,在DLBCL的发生和发展中起着重要的作用。 展开更多
关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 pkc-βⅡ NF-ΚBP50 免疫组织化学
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肺癌组织中PKC-α蛋白的表达与肺癌临床病理特征的关系 被引量:8
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作者 宋兴福 黄骥 王燕燕 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期490-492,共3页
目的检测肺癌组织中PKC-α(protein kinase C-alpha)蛋白的表达,探讨PKC-α蛋白与肺癌的组织类型、分化程度肺癌临床病期和淋巴结转移的关系.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)和荧光染色、激光扫描共聚焦技术,检... 目的检测肺癌组织中PKC-α(protein kinase C-alpha)蛋白的表达,探讨PKC-α蛋白与肺癌的组织类型、分化程度肺癌临床病期和淋巴结转移的关系.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)和荧光染色、激光扫描共聚焦技术,检测60例肺癌组织(肺癌组)、17例肺良性病变的正常肺组织(对照组)中PKC-α蛋白表达.结果肺癌组和对照组PKC-α蛋白表达的阳性率分别为76.7%(46/60)和17.6%(3/17),两组间差异具有高度显著性(P<0.01).PKC-α蛋白表达在肺癌不同病理类型即鳞癌和腺癌中,差异无显著性(P>0.05).在高分化、中分化和低分化肺癌之间比较,PKC-α蛋白表达阳性率差异亦无显著性(P>0.05).PKC-α蛋白在IA+IB、IIA+IIB和ⅢA+ⅢB期阳性率分别为50.0%、82.6%和90.5%,阳性率随TNM分期而上升,差异有显著性(P<0.05).PKC-α阳性率在N0和N1~3肺癌分别为42.1%、92.7%,两者差异有高度显著性(P<0.01).41例伴有淋巴结转移的病例中,PKC-α蛋白表达在肺原发灶和淋巴结转移灶之间比较,差异无显著性(P>0.05).结论肺癌组织中存在PKC-α蛋白的高表达;PKC-α蛋白的高表达与肺癌组织类型和分化程度无关,而与肺癌病期、淋巴结转移有密切关系. 展开更多
关键词 肺肿瘤 pkc-Α 免疫组化 激光共聚焦显微镜
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P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义 被引量:6
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作者 金晶 吴绪峰 陈惠祯 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第3期325-329,共5页
目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵... 目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵巢癌组织中阳性率分别为48.0%、56.0%、60.0%,显著高于正常卵巢和良性肿瘤(P<0.05);P-gp和PKC-α表达存在密切的相关关系(P<0.01);卵巢癌P-gp、PKC-α和MRP表达阳性者的化疗反应率分别为25.0%、25.0%、33.3%,低于阴性表达组(P<0.05);复发患者P-gp和PKC-α阳性表达率明显高于未复发的患者(P<0.05),MRP表达与复发无关(P>0.05)。单因素分析表明,P-gp、PKC-α和MRP与卵巢癌患者的生存期和不良预后有关。多因素分析表明,P-gp及三个指标共同表达与患者的生存率有关。结论卵巢恶性肿瘤中P-gp、PKC-α和MRP阳性表达与临床化疗耐药有关,并影响患者的生存率。联合检测三个指标对临床化疗疗效判断和患者预后估计具有积极的指导作用。 展开更多
关键词 P—gp pkc-Α MRP 卵巢肿瘤 免疫组织化学 预后
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植物表达载体pKC-3的构建及大分子DNA连接策略 被引量:7
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作者 范钦 邱国华 +1 位作者 许新萍 李宝健 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第4期1-3,共3页
以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌... 以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌农杆菌LBA4 4 0 4 ,可进一步用于水稻抗虫基因转化的研究。载体构建过程采用多次的大分子DNA片段连接 ,总结出了一套适合大片段连接转化的可行策略。 展开更多
关键词 植物表达载体 pkc-3 构建 大分子D2A连接
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PKC-α、PKA-Ⅰ反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长增殖的影响 被引量:4
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作者 祝葆华 黄培春 +1 位作者 鲍波 陈锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期494-498,共5页
目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPK... 目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKA -ⅠasODN ;③ 0 5 0 μmol/LPKC -αasODN +0 5 0 μmol/LPKA -ⅠasODN。对照组 :相应浓度的随机序列 (rODN)。用免疫组化法检测CNE - 2Z细胞PKC -α和PKA -Ⅰ的表达 ,MTT法检测其生长指数 (growthin dex ,GI) ,软琼脂克隆形成率检测其体外增殖能力。结果 :PKC -αasODN或 /和PKA -ⅠasODN均可阻断其相应PKC-α或PKA -Ⅰ的表达 (P <0 0 5 )。PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN均能显著降低CNE - 2Z细胞GI和软琼脂克隆形成率 (P <0 0 5 ) ,且具有量效依赖关系。PKC -αasODN +PKA -ⅠasODN共同作用可使其GI和软琼脂克隆形成率非常显著降低 (P <0 0 1) ,无明显量效依赖关系 ,两者对CNE - 2Z生长抑制作用强于PKC -αasODN或PKA -Ⅰa sODN(P <0 0 5 ) ,对其软琼脂克隆形成率的抑制作用与PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PKC -αasODN和PKA -ⅠasODN均可抑制CNE - 2Z细胞体外生长和增殖 ,两者具有协同作用。 展开更多
关键词 pkc-Α PKA-I 反义核酸 鼻咽癌 CNE-2Z细胞 蛋白激酶C 免疫组化法
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PKC-β抑制剂LY333531对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响 被引量:2
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作者 雷少青 苏娃婷 +4 位作者 徐金金 刘慧敏 夏中元 夏正远 徐波 《临床和实验医学杂志》 2014年第16期1305-1308,共4页
目的观察PKC-β抑制剂LY333531(LY)对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)及糖尿病LY治疗组。4周后生化检测血浆甘油三酯(TG)、炎症因子TNF-α与IL-6水平,心脏超声评价心... 目的观察PKC-β抑制剂LY333531(LY)对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)及糖尿病LY治疗组。4周后生化检测血浆甘油三酯(TG)、炎症因子TNF-α与IL-6水平,心脏超声评价心脏功能,Western Blot分析心肌组织Cav-1、Cav-3,PKC-β2蛋白表达水平。结果与C组比较,D组大鼠血浆TG、TNF-α与IL-6水平均增高,心脏舒张功能降低,心肌组织p-PKC-β2、Cav-1表达水平增加而Cav-3表达水平降低。与D组比较,LY除了不能降低糖尿病大鼠血浆TNF-α与IL-6水平外,均可明显抑制上述变化。结论 PKC-β抑制剂LY明显改善糖尿病心肌舒张功能,其机制可能与抑制PKC-β2过度活化并恢复Caveolins蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病 pkc-β抑制剂 LY333531 心肌功能 Caveolins
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PKC-θ在胃肠间质瘤中的表达及意义 被引量:8
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作者 梁建芳 郑绘霞 《诊断病理学杂志》 CSCD 2007年第1期56-59,共4页
目的探讨PKC-θ在胃肠间质瘤(GIST)中的表达及意义。方法对87例GIST、2例平滑肌瘤、2例平滑肌肉瘤、5例神经鞘瘤、6例恶性神经鞘瘤、3例胸腺瘤及精原细胞瘤、5例肾透明细胞癌、5例恶性黑色素瘤进行CD117、PKC-θ染色。结果87例GIST中77... 目的探讨PKC-θ在胃肠间质瘤(GIST)中的表达及意义。方法对87例GIST、2例平滑肌瘤、2例平滑肌肉瘤、5例神经鞘瘤、6例恶性神经鞘瘤、3例胸腺瘤及精原细胞瘤、5例肾透明细胞癌、5例恶性黑色素瘤进行CD117、PKC-θ染色。结果87例GIST中77例PKC-θ(+),72例CD117(KIT)(+);15例CD117阴性的GIST中12例PKC-θ(+),其中11例上皮样细胞型中9例PKC-θ表达与CD117表达无相关性(P>0.05),其阳性表达例数与Fletcher分级和进行性疾病(PD)呈正相关关系(P<0.01)。在除神经鞘瘤和恶性神经鞘瘤的其他类型肿瘤中CD117均(+),而PKC-θ除神经鞘瘤3例和恶性神经鞘瘤2例(+)外,在其他类型肿瘤中均(-)。结论PKC-θ可能是GIST的又一标记物,尤其是对于PDGFRA基因突变的上皮样细胞型和CD117阴性的病例,PKC-θ与KIT联合检测能使大多数GIST确诊。 展开更多
关键词 pkc-θ CD117 胃肠间质瘤
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2类多巴胺受体通过促进PKC-ε转位参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡 被引量:3
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作者 李鸿珠 高君 +2 位作者 郝晓敏 张丽敏 陈俊亭 《中国医刊》 CAS 2014年第9期60-63,共4页
目的以蛋白激酶C-ε(PKC-ε)转位为切入点,探讨2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后适应抑制细胞凋亡中的作用及可能机制。方法复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧和缺血后适应模型。MTT检测心肌细胞的存活率;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡... 目的以蛋白激酶C-ε(PKC-ε)转位为切入点,探讨2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后适应抑制细胞凋亡中的作用及可能机制。方法复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧和缺血后适应模型。MTT检测心肌细胞的存活率;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡;Western blotting检测Bcl-2、caspase-3、caspase-9、PKC-ε蛋白的表达和细胞色素C(Cyt c)的释放;免疫共沉淀检测PKC-ε和DR2的相互作用。结果与正常组比较,缺氧/复氧组细胞存活率降低,细胞凋亡增加,促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达增加,抑凋亡因子(Bcl-2)表达亦增加,PKC-ε没有转位到细胞膜,PKC-ε和DR2不存在相互作用。与缺氧/复氧组比较,缺血后适应明显升高细胞存活率,降低细胞凋亡,抑制促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达,促进抑凋亡因子(Bcl-2)表达,PKC-ε转位到细胞膜,PKC-ε和DR2存在相互作用。与缺血后适应组比较,DR2激动剂进一步增加缺血后适应的保护作用,而DR2抑制剂则取消了DR2激动剂的作用。结论DR2参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡,其机制与DR2促进PKC-ε转位及DR2和PKC-ε存在相互作用有关。 展开更多
关键词 2类多巴胺受体 心肌缺血后适应 细胞凋亡 pkc-ε转位
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红景天苷抑制胃癌细胞SGC7901增殖及对PKC-α的影响 被引量:4
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作者 王海燕 王刚 +3 位作者 张晓岩 李菊英 贺菊香 贾霜凯 《青海医学院学报》 CAS 2014年第3期178-182,共5页
目的观测红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖和PKC-α表达的影响,为红景天苷治疗恶性肿瘤提供实验依据。方法采用细胞形态学方法及MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用;Western Blot法检测对照组、... 目的观测红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖和PKC-α表达的影响,为红景天苷治疗恶性肿瘤提供实验依据。方法采用细胞形态学方法及MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用;Western Blot法检测对照组、红景天苷10-40μmol/L各组PKC-α蛋白表达水平。并对上述结果做相关分析。结果红景天苷作用SGC7901细胞24 h后细胞变圆,贴壁生长状态变差,死亡细胞数增多。MTT示红景天苷浓度在10-100μmol/L时,细胞死亡率随药物浓度增加而增多,细胞生存率与红景天浓度呈负相关。流式细胞术结果显示,红景天干预后凋亡细胞随着药物浓度增加而增多(P〈0.05)。Western blot检测结果示PKC-α蛋白的表达随红景天苷浓度(10、20、40μmol/L)的增加逐渐降低(P〈0.05)。结论红景天苷对胃癌细胞SGC7901具有抑制增殖并诱导凋亡的作用。红景天苷对SGC7901细胞有抑制PKC-α蛋白表达的作用。红景天苷对恶性肿瘤具有相关治疗作用。 展开更多
关键词 红景天苷 肿瘤 SGC7901 pkc-Α
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SDF-1通过活化PKC-ζ趋化人表皮干细胞定向迁移的实验研究 被引量:1
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作者 郭锐 曹川 +4 位作者 王珍祥 李喆 甘露 柴琳琳 李世荣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期335-338,共4页
目的探讨信号蛋白PKC-ζ在间质细胞衍生因子1(stromal-derived factor 1,SDF-1)趋化人表皮干细胞定向迁移中的作用及机制。方法Ⅳ型胶原快速分选,无血清培养基(DK-SFM)培养表皮干细胞,免疫组化染色观察表皮干细胞β1整合素(β1 integrin... 目的探讨信号蛋白PKC-ζ在间质细胞衍生因子1(stromal-derived factor 1,SDF-1)趋化人表皮干细胞定向迁移中的作用及机制。方法Ⅳ型胶原快速分选,无血清培养基(DK-SFM)培养表皮干细胞,免疫组化染色观察表皮干细胞β1整合素(β1 integrin)和角蛋白19(K19)的表达;Transwell实验观察SDF-1对钙和DAG依赖性和非依赖性PKC亚型抑制剂(chelerythrine chloride)、钙和DAG依赖性PKC亚型抑制剂(staurosporine)和PKC-ζ特异性抑制剂(PS-ζ)处理后人表皮干细胞的趋化作用;Western blot法检测SDF-1诱导后不同时段的人表皮干细胞PKC-ζ的磷酸化水平变化;采用Phal-loidin-Rhodamine显示细胞骨架,激光共聚焦显微镜观察PS-ζ对人表皮干细胞极化的影响。结果体外分离培养出人表皮干细胞,免疫组化染色显示,细胞质中β1整合素及K19均呈阳性表达。Transwell实验表明chelerythrine chloride和PS-ζ能够抑制SDF-1趋化的表皮干细胞运动,与阳性对照组比较差异有显著性(P<0.05)。SDF-1作用表皮干细胞能够引起PKC-ζ的磷酸化水平变化,随时间增加逐渐增强;激光共聚焦扫描显示SDF-1处理过的表皮干细胞骨架明显变化,经PS-ζ预处理后细胞骨架变化不明显。结论 SDF-1通过诱导信号蛋白PKC-ζ的磷酸化,影响细胞肌动蛋白的极化,趋化人表皮干细胞的定向迁移。 展开更多
关键词 pkc- ζ趋化运动 人表皮干细胞 间质细胞衍生因子1
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大肠癌PKC-α、CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系 被引量:4
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作者 陈爱军 孟庆华 刘文明 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第1期55-57,共3页
目的:探讨大肠癌PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法对PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果:PKC-α在大肠癌组织中阳性表达率31/47(66.0%)与大肠正常组织3/15(20.0%)及腺瘤10/21(47.... 目的:探讨大肠癌PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法对PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果:PKC-α在大肠癌组织中阳性表达率31/47(66.0%)与大肠正常组织3/15(20.0%)及腺瘤10/21(47.6%)对比有显著性差异(P<0.05),与大肠癌分化程度,Dukes分期,淋巴结转移及CEA水平明显相关(P<0.05)。CyclinD1和Cdk4在大肠癌中阳性表达率分别为26/47(55.5%),28/47(59.6%),与正常组织中表达2/15(13.3%),1/15(6.70%)及腺瘤组织中表达8/21(38.1%),9/21(42.9%)相比呈递增趋势(P<0.05)。大肠癌中CyclinD1阳性表达与肿瘤分化程度,Dukes分期,淋巴结转移呈正相关关系(P<0.05),而与CEA水平关系不大(P>0.05);Cdk4阳性表达则与分化程度,Dukes分期有关(P<0.05),与淋巴结转移及CEA水平关系不密切(P>0.05)。结论:PKC-α,Cy-clinD1和Cdk4的高表达与大肠癌分化程度,Dukes分期呈明显相关,对判断大肠肿瘤恶性程度具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 pkc-Α CYCLIND1 CDK4 结直肠癌
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二十味沉香丸增强低氧性肺动脉高压大鼠肺组织PKC-α表达 被引量:2
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作者 王海燕 王刚 +3 位作者 张晓岩 李菊英 贺菊香 李生花 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第6期844-846,共3页
慢性高原病是青藏高原特有的常见病,表现为低氧血症、红细胞增生和肺动脉高压。二十味沉香丸是根据藏医学原理,采用天然沉香、丁香等20味藏药合成(藏药名:阿嘎尔尼秀日布),具有改善心肌缺血、肺功能等作用。
关键词 低氧性肺动脉高压 二十味沉香丸 pkc-Α 大鼠肺组织 慢性高原病 青藏高原 低氧血症 细胞增生
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PKC-α在肝癌组织中的表达及与术后复发和生存的关系 被引量:2
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作者 牛志鹏 杨会锋 +1 位作者 王春雨 冯新献 《临床心身疾病杂志》 CAS 2018年第1期12-15,共4页
目的 探讨PKC-α在肝癌组织中的表达水平及与肝癌术后复发和生存的关系.方法将106例肝癌患者作为研究对象,于术后分别取肿瘤组织(观察组)和癌旁组织(对照组),采用荧光定量PCR和Western blot分析组织中PKC-αmRNA和蛋白质水平变化,比较P... 目的 探讨PKC-α在肝癌组织中的表达水平及与肝癌术后复发和生存的关系.方法将106例肝癌患者作为研究对象,于术后分别取肿瘤组织(观察组)和癌旁组织(对照组),采用荧光定量PCR和Western blot分析组织中PKC-αmRNA和蛋白质水平变化,比较PKC-α表达阳性率,分析PKC-α表达水平与术后复发和生存的关系.建立PKC-α敲低HepG2稳定细胞系,分析PKC-α对细胞侵袭能力的影响.结果观察组肝癌组织中PKC-αmRNA和蛋白质表达水平显著高于对照组(P<0.05).免疫组化分析显示对照组PKC-α阳性率显著低于观察组阳性率(P<0.05),PKC-α阳性患者术后累积复发率显著高于阴性患者(P<0.05),而累积生存率显著低于阴性患者(P<0.05).体外实验证实PKC-α敲低的HepG2细胞侵袭能力显著低于对照细胞(P<0.05).结论PKC-α在肝癌组织中表达升高,对肝癌患者术后复发及生存率有一定影响. 展开更多
关键词 pkc-Α 肝癌 复发 生存
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PKC-β在糖尿病肾病中的作用 被引量:2
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作者 杨婷婷 扬翼 +1 位作者 朱圣炜 潘晓燕 《四川生理科学杂志》 2017年第1期49-51,共3页
本文全面综述了蛋白激酶C-β(Protein kinase C-β,PKC-β)Ⅰ和Ⅱ两种亚型的分子特点和功能,PKC-β在糖尿病肾病的发生及发展过程中所起的作用,以及糖代谢改变、血流动力学异常、血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth fact... 本文全面综述了蛋白激酶C-β(Protein kinase C-β,PKC-β)Ⅰ和Ⅱ两种亚型的分子特点和功能,PKC-β在糖尿病肾病的发生及发展过程中所起的作用,以及糖代谢改变、血流动力学异常、血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β,TGF-β1)等因素对PKC-β的表达的影响。 展开更多
关键词 pkc-βⅠ pkc-βⅡ 糖尿病肾病
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