PKG通路与高血压合并冠心病患者PCI治疗后血管内皮功能损伤及冠脉无复流的关系

目的:探讨PKG通路与高血压合并冠心病患者PCI治疗后血管内皮功能损伤及冠脉无复流的关系。方法:选取2019年1月—2020年12月在我院行PCI治疗的高血压合并冠心病患者120例,根据PCI术后冠脉造影结果,将PCI组分为无复流组(TIMI 0~1级,n=20)和有效灌注组(TIMI 2~3级,n=60),并将未行PCI的高血压合并冠心病患者作为对照组,即非PCI组(n=40)。比较三组患者的血管舒张功能(FMD)数值、血清中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、亚硝酸盐、蛋白激酶G(PKG)活性值及PKG通路水平。结果:与非PCI组相比,PCI组患者的FMD数值、eNOS、亚硝酸盐及PKG活性值均显著降低(P<0.05),PKG通路水平明显下调(P<0.05);与有效灌注组相比,无复流组患者的FMD数值、eNOS、亚硝酸盐及PKG活性值均进一步降低(P<0.05),PKG通路水平进一步下调(P<0.05);无复流组的冠脉无复流发生率、术后并发症发生率、住院时间、住院费用均高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:高血压合并冠心病患者PCI治疗后,血管内皮功能受损,PKG通路受抑制,这可能与冠脉无复流的发生有关。保护和激活PKG通路可能有助于改善血管内皮功能,预防和减少冠脉无复流的发生。

基于NO-cGMP-PKG信号通路探讨益母缩宫颗粒对药物不全流产大鼠阴道流血的影响

目的通过创建益母缩宫颗粒干预药物不全流产大鼠阴道流血模型,研究其对子宫组织中内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)、蛋白激酶G(PKG)水平的影响,以探讨该药物治疗模型大鼠的作用机制。方法通过联合米非司酮及米索前列醇进行药物不全流产大鼠阴道流血造模后分组,分别使用对照药物及不同剂量的益母缩宫颗粒进行干预,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠子宫组织处理后的eNOS、cGMP、PKG水平。结果缩宫素组及益母缩宫颗粒低、中、高剂量组的阴道流血时间明显短于模型组(P<0.01)。缩宫素组及益母缩宫颗粒低、中、高剂量组的eNOS、cGMP及PKG水平低于模型组(P<0.05)。益母缩宫颗粒低剂量组的eNOS、cGMP及PKG水平明显高于缩宫素组(P<0.01)。结论益母缩宫颗粒可能通过调控NO-cGMP-PKG信号通路,降低模型大鼠子宫组织中eNOS、cGMP、PKG水平,加强子宫平滑肌及血管收缩,缩短药物不全流产阴道流血时间。

基于PKG信任网关的信息共享密钥安全性检测

入侵行为种类的不断增加对网络安全造成了严重威胁,故在建立PKG信任网关模型后,针对信息共享密钥提出了一种安全性检测方法。对数据做预处理操作后,分析了两种不同入网方式下,PKG信任网关对节点的认证方式,节点只有在通过认证后才能入网。PKG信任网关与新入网的节点之间通过密钥链发送共享密钥和校验值,通过比对校验值判断共享密钥是否被篡改或攻击,校验值不同说明共享密钥被攻击,需要向PKG信任网关汇报被攻击的密钥;校验值相同说明共享密钥没有被攻击,可以解密后获得会话密钥。根据相关实验可知,所提方法可针对不同种类入侵行为实现精准检测,同时保证最高的检测效率和最低的误检率。

miR-155通过调控PKG1影响滋养细胞生物学功能并参与子痫前期的机制探讨

目的探究miR-155和环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶1(PKG1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及miR-155在核因子(NF)-κB的介导下通过抑制PKG1对滋养细胞HTR-8/SVneo功能的影响。方法收集剖宫产分娩的正常产妇(NPE组)以及子痫前期产妇(PE组)的胎盘各20个,体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,分为NC组、mimics组、inhibitor组、siRNA NC组、PKG1 siRNA组、siRNA+inhibitor组;用NF-κB抑制剂PDTC处理细胞,分为Control组、PDTC组、PDTC+NC组、PDTC+mimics组。采用qPCR检测胎盘和滋养细胞HTR-8/SVneo中miR-155和PKG1 mRNA的表达;Western blot检测PKG1蛋白的表达;分别采用CCK-8法、Transwell法、流式细胞术检测细胞的增殖、迁移、凋亡能力。结果PE组胎盘组织中miR-155的表达升高,而PKG1的表达降低(P<0.05)。体外实验表明,与NC组相比,miR-155 mimics组中PKG1的表达降低,滋养细胞迁移、增殖能力减弱,凋亡能力增强,miR-155 inhibitor组中PKG1表达则升高,滋养细胞迁移、增殖能力增强,凋亡能力减弱(P<0.05);与Control组相比,PDTC组miR-155的表达降低,滋养细胞迁移、增殖能力增强,凋亡能力减弱(P<0.05)。结论miR-155在子痫前期中表达上调,并且可在NF-κB的介导下通过下调PKG1影响滋养细胞的增殖、迁移和凋亡。

PKG抑制剂KT-5823对宫颈癌HeLa细胞活力、凋亡、自噬的影响

目的:明确宫颈癌HeLa细胞对环鸟苷酸依赖性蛋白激酶(PKG)抑制剂KT-5823的敏感性,探究KT-5823对HeLa细胞活力、凋亡和自噬的影响及机制。方法:使用不同浓度的KT-5823干预HeLa细胞24 h,CCK-8、免疫印迹试验分别测定细胞活力、PKG1表达水平,进而确定后续药物刺激浓度。将HeLa细胞分为两组,即DMSO组(对照组)和KT-5823组(实验组),流式细胞术检测细胞凋亡,GFP-LC3B荧光斑点实验检测自噬斑点形成数量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PKG1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin1 mRNA的表达水平,免疫印迹试验检测PKG1、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、自噬相关通路蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2家族蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)蛋白的表达水平。增加自噬抑制剂SBI-0206965组观察自噬在此过程中的作用。结果:与对照组相比,实验组在3~100μmol/L刺激浓度下均可导致HeLa细胞活力降低(t=10.23~14.83,均P<0.05),PKG1蛋白表达水平逐渐降低(t=10.01~14.17,均P<0.05)。最终选取3μmol/L为刺激浓度,用于后续研究。与对照组相比,细胞凋亡增加(t=10.78,P=0.004),荧光自噬斑点数量增加(t=10.12,P=0.0005),PKG1 mRNA、蛋白的表达水平降低(t=13.56,P=0.0002;t=5.461,P=0.0055)、LC3Ⅱ、Beclin1 mRNA(t=8.359,P=0.0011;t=5.782,P=0.0044)、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白(t=6.924,P=0.0023;t=11.84,P=0.0003)的表达水平增加,p-Akt/Akt(t=5.194,P=0.0065)、p-mTOR/mTOR(t=12.78,P=0.0002)、Bcl-2/Bax(t=13.79,P=0.0002)的比值降低,Caspase 3表达增加(t=9.341,P=0.0007)。与实验组相比,30、50、70、100μmol/L自噬抑制剂SBI-0206965组可增加细胞凋亡(t=7.616,P=0.0016;t=15.43,P=0.0001;t=11.01,P=0.0004;t=15.39,P=0.0001)。结论:PKG抑制剂KT-5823可有效抑制HeLa细胞增殖、促进细胞凋亡,同时可抑制Akt-mTOR通路诱导细胞发生自噬,且KT-5823诱导的自噬在此过程中起保护性作用,PKG可成为宫颈癌临床治疗的新靶点。

蛇床子素对大鼠信号通路AKT/eNOS/sGC/PKG及成骨细胞成熟分化的影响

目的研究蛇床子素(osthol)是否通过激活丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)/可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylate cyclase,sGC)/蛋白激酶G(protein kinase G,PKG)信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)矿化成熟。方法检测蛇床子素处理ROBs后,成骨性转录因子RUNX2、OSX以及AKT/eNOS/sGC/PKG信号途径蛋白表达水平、免疫荧光法观察信号通路下游蛋白核易位;检测碱性磷酸酶(alkline phosphatase,ALP)活性;用AKT特异性抑制剂MK-2206阻断AKT功能后,检测MK-2206对AKT/eNOS/sGC/PKG信号途径活性及对ROBs矿化成熟的影响,进一步评估蛇床子素促进成骨细胞矿化成熟的潜在机制。结果蛇床子素处理ROBs后,成骨性转录因子RUNX2、OSX蛋白及AKT/eNOS/sGC/PKG信号通路蛋白表达量均增加,ALP活性上升;加入AKT抑制剂后,蛇床子素不再激活AKT/eNOS/sGC/PKG信号通路,阻断了蛇床子素促进ROBs的矿化成熟。结论蛇床子素可通过激活AKT/eNOS/sGC/PKG信号通路促进成骨细胞矿化成熟。

藏猪与大约克夏猪PKG基因多态性与表达差异分析

为探究环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶(PKG)基因在藏猪与大约克夏猪中的多态性与表达差异,选取180日龄藏猪和大约克夏猪,在DNA水平上对藏猪、大约克夏猪PKG基因3′侧翼区、5′侧翼区和蛋白质编码(CDS)区进行了单核苷酸多态性(SNP)位点筛选,同时在mRNA水平上用荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测PKG基因在心脏、肺脏和脾脏组织中的相对表达量。结果表明:PKG基因在3′侧翼区有一个突变位点′T157C,并在藏猪与大约克夏猪2个品种间存在极显著差异(P<0.01);在mRNA水平上PKG基因在心脏组织中的相对表达量表现为藏猪极显著高于大约克夏猪(P<0.01),肺脏组织中的相对表达量为藏猪显著高于大约克夏猪(P<0.05),但在脾脏组织中的相对表达量为大约克夏猪极显著高于藏猪(P<0.01)。研究表明,PKG基因可能与猪低氧适应性有关,为进一步探讨猪低氧适应性能奠定了基础。

基于NO-cGMP-PKG通路探讨清腹通肠颗粒抑制术后腹腔粘连的作用机制

目的基于一氧化氮(NO)-环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)通路探讨清腹通肠颗粒对术后腹腔粘连大鼠的抑制作用。方法将48只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、清腹通肠颗粒组、马来酸曲美布汀组,每组12只。模型组、清腹通肠颗粒组、马来酸曲美布汀组采用盲肠刮擦+对应腹壁损伤+局部缺血法建立腹腔粘连模型,假手术组只开关腹。术后假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,清腹通肠颗粒组、马来酸曲美布汀组分别给予清腹通肠颗粒溶液和马来酸曲美布汀混悬液灌胃,均1次/d。分别于术后3 d、7 d、10 d灌胃后2 h,每组随机取4只大鼠,观察腹腔粘连情况并进行粘连程度评分,计算大鼠肠道推进率,HE染色观察回盲部肠管病理学改变,免疫组织化学法观察回盲部肠黏膜组织酪氨酸激酶受体(c-kit)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的阳性表达情况,ELISA法测定肠组织中NO及cGMP含量,RT-PCR法检测肠组织中PKG mRNA表达量。结果模型组大鼠术后3 d、7 d、10 d的腹腔粘连程度评分及肠组织中iNOS阳性面积比、NO及cGMP含量、PKG mRNA相对表达量均明显高于同期假手术组(P均<0.05),肠道推进率及肠组织中c-kit阳性面积比均明显低于同期假手术组(P均<0.05);肠道绒毛破坏严重、组织明显水肿。与模型组比较,清腹通肠颗粒组大鼠术后7 d、10 d的腹腔粘连程度评分及肠组织中iNOS阳性面积比、NO及cGMP含量、PKG mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05);清腹通肠颗粒组大鼠术后3 d、7 d、10 d的肠道推进率和肠组织中c-kit阳性面积比均明显增高(P均<0.05);清腹通肠颗粒组大鼠肠道损伤减轻,腺体排列较整齐。结论清腹通肠颗粒可通过促进胃肠蠕动减轻术后腹腔粘连,其作用机制可能与抑制NO-cGMP-PKG信号通路,下调iNOS表达、上调c-kit表达,从而减少Cajal间质细胞损伤有关。

芪苓益肾通络方含药血清对肾小球系膜细胞cGMP/PKG信号通路的作用机制

目的研究芪苓益肾通络方含药血清对肾小球系膜细胞环磷酸鸟苷(cGMP)/蛋白激酶(PK)G信号通路的作用机制。方法30只SD大鼠随机分为健康组(健康大鼠)、通络方组(芪苓益肾通络方干预)、西药组西药盐酸苯钠普利片(洛汀新)及格列喹酮比(糖适平干预):,每组10只,制备含药血清。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡。将HMCs细胞分为空白组(5.6 mmol/L低糖+10%健康大鼠血清)、肾病组(30 mmol/L高糖+10%健康大鼠血清)、低剂量组(30 mmol/L高糖+5%通络方组大鼠血清+5%的健康大鼠血清)、高剂量组(30 mmol/L高糖+10%通络方组大鼠血清)及对照组(30 mmol/L高糖+10%西药组大鼠血清)。MTT检测HMCs细胞OD值;流式细胞仪检测HMCs细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HMCs细胞中核转录因子(NF)-κB、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA);Western印迹测HMCs细胞中cGMP、PKG蛋白表达。结果与空白组相比,肾病组细胞OD值升高,NF-κB、MCP-1、MDA增加,SOD、cGMP、PKG降低,差异有统计学意义(P<0.05),凋亡率无明显差异(P>0.05);与肾病组相比,低剂量组细胞OD值及NF-κB、MCP-1、MDA水平降低,SOD、cGMP、PKG增加,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组与对照组细胞OD值及NF-κB、MCP-1、MDA水平降低、细胞凋亡率升高,SOD、cGMP、PKG水平增加,差异有统计学意义(P<0.05);与高剂量组相比,对照组细胞增殖、凋亡、NF-κB、MCP-1、MDA、SOD水平比较无明显差异(P>0.05),cGMP、PKG蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论芪苓益肾通络方通过刺激cGMP的表达,进而激活PKG,改善炎性及氧化应激水平,调控高糖诱导的肾小球系膜细胞的生物学行为,对肾功能起到保护作用。

适用于GlusterFS系统的多PKG广义签密方案

当前的GlusterFS分布式存储系统中的文件共享方式由于信息机密性较低且不具备身份签名机制,因此提出利用多PKG广义签密方案生成的私钥不完全依赖于第三方,在完成GlusterFS分布式存储系统中文件加密的同时还提供有效的签名,可以有效防止私钥泄露.在解密过程中,客户端可以通过对应的私钥解密GlusterFS分布式存储系统中的对应资源,获取相应的明文信息,而非集群中全部资源,可实现有效访问.在本方案中,使用随机模型下的BDH假设证明了方案选取密文攻击的安全性,与基于身份广义签密方案在分布式系统中的应用相比,具有更高的安全性.

小鼠前扣带回皮质PKG-Ⅰ介导吗啡诱导的痛敏和焦虑样行为

目的:探讨前扣带回皮质cGMP依赖的蛋白激酶-Ⅰ(PKG-Ⅰ)在吗啡诱致的小鼠痛敏及焦虑样行为中的调控作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为2组:对照组和吗啡组,在小鼠皮下每天两次、连续4 d注射吗啡建立吗啡诱致的痛敏模型。分别采用von Frey纤维丝和高架十字迷宫检测小鼠机械性痛阈变化和焦虑样行为。通过Western Blot和免疫荧光组织化学染色技术检测前扣带回皮质PKG-Ⅰ表达水平的变化。结果:长期大量皮下注射吗啡可诱致小鼠产生显著的痛觉敏化和焦虑样行为。Western Blot结果显示小鼠前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡诱致的痛敏后表达显著下调,同时免疫荧光组织化学染色结果显示前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡痛敏后的平均荧光强度显著下降。结论:前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡诱致的小鼠痛觉过敏和焦虑样行为中发挥关键作用。

标准模型下多个PKG的基于身份广义签密

广义签密是指除了能实现签密功能,还可单独实现加密和认证功能的密码机制。该文定义了不同PKG环境下基于身份的广义签密方案较为全面的安全模型,并提出一个具体方案,进而在标准模型下证明了方案的安全性。和已有的不同PKG环境下基于身份签密方案相比,文中方案的效率较高,且应用范围更为广泛。

携带人野生型PKGⅠα基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的:克隆人PKGⅠa基因,构建其重组腺病毒载体。方法:用RT-PCR方法从人肺动脉平滑肌组织中扩增PKGⅠa基因全长,经T/A克隆后,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdTrack-PKGⅠα。PmeⅠ酶切pAdTrack-PKGⅠα,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒pAdTrack-PKGⅠα转化至BJ5183感受态细菌中进行同源重组,PacⅠ酶切线性化重组质粒AdCMV-PKGⅠα后转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增。检测PKGⅠα基因的表达,并用绿色荧光蛋白(GFP)法测定其滴度。结果:用RT-PCR方法,从人肺动脉中层扩增出PKGⅠα,测序证实为人PKGⅠα基因。构建了PKGⅠα基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒保存液。结论:成功地克隆了人PKGⅠα基因,并构建其重组腺病毒载体,为进一步研究PKGⅠα基因在低氧肺血管重建中的作用提供了有效的基因转移载体。

大豆异黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马PKG和Raf-1的影响

目的:通过观察大豆异黄酮(SIF)对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织蛋白激酶G(PKG)和Raf-1蛋白的影响,探讨大豆异黄酮治疗阿尔茨海默病作用机制。方法:采用β-淀粉样蛋白(Aβ)双侧海马注射建立AD大鼠模型,分组后给予不同剂量大豆异黄酮,Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化,ELISA法测定大鼠海马组织PKG含量,免疫组化SP法观察大鼠海马组织Raf-1的表达。结果:大豆异黄酮可改善AD大鼠的学习记忆能力(P<0.05),显著降低AD大鼠海马组织PKG的含量(P<0.05),显著降低AD大鼠海马组织Raf-1的表达(P<0.05)。结论:大豆异黄酮可能通过降低AD大鼠海马PKG的含量和Raf-1的表达起到治疗AD的作用。

一个有效的多PKG环境下基于身份签密方案

多PKG环境下的签密机制是域间实体认证和保密通信的有效手段.文中提出了一个新的多PKG环境下基于身份的签密方案,方案使用了Waters基于身份加密体制及现有的基于身份签密体制的构造思想,并利用"⊕"运算和抗碰撞Hash函数消除了签密密文与明文之间的对应关系,从而保证了方案的语义安全.文中的方案实现了标准模型下的可证明CCA安全和存在不可伪造性;且当新方案退化为单个PKG环境时,与其它标准模型下的安全方案相比,该方案仍有稍高的效率.

中等强度运动对去卵巢大鼠骨量及cGMP-PKG Ⅱ-EnaC通路的影响

目的:通过中等强度跑台运动干预,探讨运动经cGMP-PKGⅡ-ENaC通路对去卵巢大鼠骨量的影响效应,为阐明有氧运动对骨量的影响及机制提供实验依据。方法:3月龄雌性SD大鼠随机分为10组:BC(基础对照组)、SHAM4、8、12(假手术4、8、12周)组;OVX4、8、12(去卵巢对照4、8、12周)组;OVX+T4、8、12(去卵巢+运动4、8、12周)组。运动组采用跑台训练,坡度5°,5d/w。以DXA测定大鼠全身骨密度(bone mineral density,BMD);以ELISA测定血清环鸟苷酸(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)含量;以Western blot和实时PCR法分别测定cGMP依赖性蛋白激酶GⅡ(cGMP dependent protein kinase,PKGⅡ)和ENa C-γ的蛋白及mRNA表达量。结果:运动组大鼠BMD呈现出随运动时间增长而增加态势,OVX+T 12组BMD显著高于同期OVX组(P<0.01),OVX+T 8和12虽仍低于同期SHAM组,但无显著性差异。与同期OVX组比较,OVX+T8、12组cGMP血清水平、股骨PKGⅡmRNA、ENaC-γ mRNA表达均显著增加(P<0.05),但仍均低于同期SHAM组。与同期OVX组比较,OVX+T4、12组PKGⅡ蛋白表达显著增加(P<0.05),但仍低于同期SHAM组(P均<0.01),运动组PKGⅡ蛋白降低程度显著减缓。OVX+T4、8、12组ENaC-γ蛋白表达均显著高于同期OVX组(P均<0.01),但仍低于同期SHAM组(P<0.05—0.01),降低程度显著减缓。结论:中等强度跑台运动干预能增加去卵巢大鼠cGMP浓度,同时上调骨PKGⅡ、ENa C-γ蛋白及mRNA的表达;中等强度跑台运动能够有效地增加去卵巢大鼠骨密度;运动增加去卵巢大鼠骨量的机制与c GMP-PKGⅡ-ENaC通路激活密切相关。

多重PKG环境中高效的身份基认证密钥协商协议

认证密钥协商协议在网络安全通信中用于实现用户之间的相互认证和密钥协商。一些大规模网络应用中通常设置了多重PKG,高层的PKG认证下属的低层级PKG的身份并负责为它们生成私钥。目前适用于多重PKG环境的身份基认证密钥协商协议大多利用双线性对设计,运算效率较低,同时还存在安全性问题。为提高已有方案的安全性和效率,基于椭圆曲线密码体制提出了一种多重PKG环境中的身份基认证密钥协商协议,该协议中多个PKG之间不是相互独立的,而是具有层级隶属关系,更贴近实际应用。对该协议进行安全性分析,分析结果表明该协议能弥补已有方案的安全漏洞,满足抗临时密钥泄露、前向安全性、抗假冒攻击等安全属性,并且协商双方的计算中均不含双线性对运算,与同类方案相比具有更高的运算效率。

MAP2K4、PKG1及ZlC1在子宫内膜癌患者组织中表达及预后价值

目的:分析子宫内膜癌患者病灶组织中丝裂原活化蛋白激酶4(MAP2K4)、PKG1及小脑锌指结构蛋白1(ZIC1)表达水平及对病情预后的预测价值。方法:将本院2012年1月-2014年1月收治的112例子宫内膜癌患者作为观察组,103例行子宫良性病变患者作为对照组;免疫组化法检测病灶组织中MAP2K4、PKG1及ZlC1水平;随访5年患者生存情况;采用logistic回归模型分析MAP2K4、PKG1及ZlC1表达与预后关系,绘制ROC曲线分析各指标水平预测患者预后价值。结果:MAP2K3、PKG1及ZIC1表达观察组高于对照组,且死亡患者高于存活患者,低表达患者生存期高于高表达患者(均P<0.05);MAP2K3、PKG1及ZIC1是影响子宫内膜癌患者预后的独立影响因素(P<0.05),预测患者预后质量的敏感度及特异度均>80.0%,且AUC均>0.9。结论:子宫内膜癌患者病灶组织中MAP2K4、PKG1及ZlC1异常高表达,可能作为评估患者病情预后质量的指标。

PKG预制底板的截面优化设计、生产与施工研究

PKG预制底板是直接在2.4～6.0 m跨PK预应力混凝土预制底板的混凝土肋上外包内卷边C型槽钢所得,其特点是工业化预制程度高,预制过程支模简单、有利于成品保护,预制底板及其叠合后的叠合楼板刚度大。由于PK预制底板受力性能均已满足规范要求,外包型钢后,其力学性能有很大富余度。本文研究了PKG板的截面参数,并编制了仅输入板跨和板宽即可进行PKG板迭代设计计算的MATLAB程序,对2.4～6 m跨PKG预制底板考虑最小用钢量时的肋高、预应力钢筋数目等进行了截面优化和规整化设计,利用程序迭代设计计算了6.3～9 m跨的PKG预制底板,最终设计出了截面合理、力学性能优异的既满足规范要求又适合于工业化生产的PKG预制底板;并对PKG叠合楼板的工业化生产与施工进行了介绍,可为PKG预制底板的设计及叠合板的生产、施工提供参考。

NO/PKG介导Ca^(2+)/Calcineurin信号通路调控血管平滑肌细胞增殖

目的研究NO/PKG介导Ca2+/钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控。方法植块法原代培养W istar大鼠VSMCs。W estern blot测定CaN表达,定磷法测定CaN活性。MTT法测定VSMCs的增殖,丫啶橙/溴化乙锭荧光染色法测定VSMCs的活性。结果SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS使苯肾上腺素(PE)诱发的VSMCs吸光度分别降低,而Rp-8-pCPT-cGMPS则可使吸光度增加。维拉帕米预处理VSMCs后,PE诱发的VSMCs吸光度降低,并且上述吸光度可以被SNAP或Sp-8-pCPT-cGMPS进一步抑制,但可被Rp-8-pCPT-cGMPS轻微升高。环胞素A预处理VSMCs后,PE诱发的VSMC吸光度降低,但是这一数值不能被SNAP、Sp-8-pCPT-cGMPS或Rp-8-pCPT-cGMPS进一步抑制或升高。SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS抑制PE诱发的CaN表达与活性。结论NO/PKG抑制血管SMCs增殖,但并不影响SMCs存活率;NO/PKG这一作用是介导SMCs内游离钙/CaN信号通路实现的。