补脾益气中药对ICAM-1的表达和PLA_2含量的影响

目的 :探讨细胞间粘附分子 (ICAM- 1)和磷脂酶 A2 (PL A2 )在哮喘发病过程中的作用及机理。方法 :采用卵蛋白等致敏大鼠哮喘模型 ,观察支气管肺泡上皮细胞 ICAM- 1的表达情况及支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中PL A2 和血浆中 PL A2 活性变化 ,以及 BAL F中细胞总数及细胞分类情况 ,及三者之间的关系。结果 :与对照组比哮喘组支气管上皮细胞 ICAM- 1表达显著增强 ,BAL F中 PL A2 活性显著性增高 ,血浆中 PL A2 活性也增高 ,但未达显著水平 ;哮喘组 BAL F中细胞计数显著升高 ,尤其是嗜酸性粒细胞增多更为显著。将哮喘组中 ICAM- 1的阳性面积、BAL F中 PL A2 活性和 BAL F中细胞计数进行相关分析 ,结果三者显著相关。结论 :ICAM- 1和 PL A2 在哮喘大鼠的气道炎症细胞浸润过程中有很重要的作用 ,二者之间又有很密切的联系。

北方汉族人PLA2R1基因多态性与脑梗死关系的研究

目的探讨中国北方汉族人群PLA2R1基因多态性与脑梗死的关系。方法选取年龄、性别匹配的中国北方汉族脑梗死患者212人,健康对照组179人,采用PCR技术和限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)的方法检测基因型。结果PLA2R1基因SNP的等位基因和基因型在脑梗死组和对照组的频数分布差异无显著性(P>0.05)。结论中国北方汉族人群中PLA2R1基因多态性与脑梗死的发病可能无关。

肺腺癌患者PLA2G1B表达情况与预后的相关性

目的基于数据挖掘分析PLA2G1B基因在肺腺癌患者中的表达特征、预后特征、免疫特征以及潜在的治疗方案影响。方法通过对TCGA以及GEO数据库中的肺腺癌患者RNAseq表达谱数据以及临床信息进行分析,对比PLA2G1B高表达和低表达在肺腺癌患者的预后差异,并通过CIBERSORT计算患者的免疫细胞浸润程度,对比PLA2G1B高低表达组之间的浸润程度差异。并通过p RRophetic算法分析2组之间的药物敏感性差异。结果PLA2G1B基因在肺腺癌组织中相比癌旁表达量显著降低,且表达量越低其患者的预后总生存越差,在TCGA以及2个GEO的独立验证数据集中均表现出一致的统计学差异,经多因素校正之后证明PLA2G1B低表达为差预后的独立因素(P<0.05),且在预后较差的样本中其免疫浸润水平更低,主要表现为Bcellmemory,Tcell CD4+memoryresting,Monocyte,Myeloiddendriticcell,Mastcellactivated细胞类型。但差预后的样本对多种化疗药物的敏感性要显著更好。结论PLA2G1B低表达为肺腺癌独立的差预后风险因素,且低表达患者中整体免疫浸润水平显著更低。

冷冻与石蜡肾活检标本中PLA2R1表达的临床诊断意义比较

目的探讨磷脂酶A2受体1(PLA2R1)在肾脏穿刺的冷冻标本及石蜡标本中的表达,分析不同标本中阳性率的临床病理诊断意义。方法收集2013年1月~2019年2月江门市中心医院行肾脏穿刺患者的标本及临床病理资料,其中同时有肾活检冷冻标本及石蜡标本的患者215例,仅有石蜡标本的患者785例。分别利用免疫荧光及免疫组化法检测PLA2R1在肾活检冷冻和石蜡标本中的表达,并分析PLA2R1表达与临床病理特征的相关性。结果在215例冷冻标本中,PLA2R1阳性率为19.1%;在1000例石蜡标本中,PLA2R1阳性率为32.9%,两组中PLA2R1的阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。在冷冻和石蜡标本中,PLA2R1表达与患者性别、年龄及临床分期无关,与病理类型相关。在冷冻和石蜡标本中,PLA2R1阳性均集中于特发性膜性肾病(72.0%和79.8%),但非特发性膜性肾病中,则分别为3.0%和19.4%。结论肾活检冷冻及石蜡标本中PLA2R1表达均与特发性膜性肾病相关,但冷冻标本在特发性膜性肾病诊断中更有价值。

Pla a 1序列分析及三维结构建模

联合运用多种方法预测Pla a 1的亲水性及其二级结构,利用同源建模法建构Pla a 1的三维结构模型,在nb数据库中进行BLAST并构建同源进化树,在Scan Prosite数据库中进行Motif预测,对Pla a 1进行序列分析并进行三维结构建模。该蛋白是一个主要为α+β结构的亲水性蛋白,预测其具有一个蛋白激酶C的磷酸化位点,一个N豆蔻酰化位点和三个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。Pla a 1具有较强的信号转导作用,且与拟南芥的果胶(甲)酯酶抑制剂在进化上具有较近的亲缘关系;所预测的三维结构基本能反映出Pla a 1真实的空间构象,这将为今后进一步理解和掌握Pla a 1结构和功能上的关系打下理论基础。

水稻类树状突变体pla1-5的鉴定与基因克隆

在粳稻品种台北309经60 Co-γ辐射诱变的后代中发现了一份类树状突变体pla1-5,该突变体表现为植株矮化、叶片小且数量增多、分蘖数减少、高位分蘖、穗分化受阻等特征。遗传分析表明,该性状受一对隐性核基因控制。利用图位克隆技术将目的基因定位在第10染色体长臂上两个分子标记CHR1027和CHR1030之间,物理距离为58kb,并与SSR标记CHR1028和CHR1029共分离。根据水稻基因组序列的注释,该区域内存在5个完整的预测基因。测序分析表明pla1-5突变体中一个编码细胞色素P450CYP78A11的释义基因LOC_Os10g26340第1外显子内缺失了一个碱基T,导致移码突变和翻译提前终止。据此,初步推测细胞色素P450CYP78A11基因为PLA1-5的候选基因。

Pla a 1的抗原表位分析

[目的]预测Pla a 1抗原的免疫原性及B细胞表位。[方法]联合运用多种方法预测Pla a 1的二级结构并预测其表面特性,如亲水性、可塑性及抗原表位。[结果]该蛋白是一个分子量约19 kDa,pI值约8.7,主要为α-螺旋的结构紧凑的球形蛋白。预测其亲水性区域:32-42,55-59,76-78,88-89,92-98,110-112,118-127,140-151,157-163;预测其可塑性区域:28-40,49-57,76-80,87-98,109-114,121-125,137-139,144-151,154-162;预测其蛋白质抗原表位区域:29-42,49-60,75-78,86-100,107-114,116-130,134-152,156-164;预测其转角结构区域:39-42,51,55,88-89。[结论]Pla a 1抗原蛋白具有较强的免疫原性;其主要的抗原表位集中于29-42,49-60,86-100,而这些预测结果为进一步寻求梧桐花粉变态反应的防治方法提供了依据。

PLA2R1相关性特发性膜性肾病的诊治进展

众所周知,特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)是成人肾病综合征中最为常见的一种病理类型[1],其发病率在中国的增长更是疾风迅雷。曾有文献报道,截止到1997年,IMN发病率已从之前的6. 48%显着上升至22. 79%。特别是在2009年~2011年期间,IMN已成为中国继IgA肾病(IgAN)后第二常见的原发性肾小球疾病[2]。

PLA2R1基因位点rs3749117和rs3749119单核苷酸多态性与特发性膜性肾病的易感性的Meta分析

目的本文旨在评价两种单核苷酸多态与特发膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)的易感性之间的关系。方法通过系统检索PubMed、Embase等英文数据库以及中国知网、万方数据库、中国生物医学数据库(CBM)等中文数据库中关于rs3749117和rs3749119分别与IMN易感性的所有相关中英文文章。检索时限为建库至2020年10月。以OR和95%CI作为效应量,通过仔细严格的文献初筛和复筛,选择与本文主题相关的文献,以纽卡斯尔-渥太华量表(the Newcastle-Ottawa scale,NOS量表)为准进行文献评价,然后提取资料和数据,并通过stata软件进行数据处理,进行系统评价。结果本文总共纳入了7篇病例对照研究,其中有6组原始数据描述了SNP rs3749117与IMN的易感性之间的相关性,病例组1750例,对照组1593例,通过分析5种遗传模型发现,rs3749117与亚洲人IMN的易感性存在一定的相关性,基于当前纳入的研究,可以认为致病基因为T[C/T:OR=0.528,95%CI(0.372-0.749),P<0.001]。其次,6组原始数据描述了SNP rs3749119与IMN的易感性之间的相关性,并且rs3749119与亚洲人IMN易感性之间也存在明显的相关性,基于当前的研究,可以认为基因C为致病基因[C/T,OR=2.019(1.405-2.903),P<0.001]。结论PLA2R1基因位点rs3749119与rs3749117与亚洲人IMN易感性之间存现明显相关性,其中rs3749119的致病基因为C,rs3749117的致病基因为T。

黏质沙雷氏菌磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS对宿主菌细胞膜的影响及亚细胞定位

为证明黏质沙雷氏菌磷脂酶A_(1)辅助蛋白PlaS在大肠杆菌BL21(DE3)异源表达中对细胞膜有明显的破坏作用,探究了细胞膜特性的变化,并采用气相色谱-质谱联用技术鉴定了其对细胞膜脂肪酸的影响,通过激光共聚焦显微镜验证了亚细胞水平定位。结果显示:PlaS异源表达后,宿主菌内外膜通透性明显提高、细胞膜流动性与表面疏水性严重下降,表明细胞膜功能已经丧失;脂肪酸饱和程度下降,即直链饱和脂肪酸和反式单不饱和脂肪酸相对含量降低,以及顺式单不饱和脂肪酸相对含量增加、膜刚性增强、流动性减少,细胞膜组分与结构表现异常导致细胞易死亡。激光共聚焦显微镜显示,在宿主细胞膜上发现明显荧光。综上所述,PlaS属于膜蛋白,在大肠杆菌异源表达中会破坏宿主菌细胞膜的结构与功能,表现生长抑制现象,这将为进一步PlaS抑制机理的研究与其功能开发提供一定支持。

糖蛋白Ⅲa的PlA1/A2多态性与心肌梗死易感性关系研究

目的:分析糖蛋白(GP)Ⅲa的PlA1/A2多态性与心肌梗死易感性的关系。方法:选取2020年9月—2021年9月广州中医药大学第五临床医学院收治的70例急性心肌梗死(AMI)病人作为AMI组,同期选取70名体检健康志愿者作为对照组。收集AMI一般风险指标,采集研究对象血样并提取DNA样本,使用聚合酶链式反应、酶切反应测定GPⅢa的PlA1/A2多态性,分析GPⅢa的PlA1/A2多态性与AMI易感性的关系。结果:AMI组糖尿病史、高血压史占比明显高于对照组(P<0.05),且AMI组三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平均高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。两组性别、年龄、体质指数(BMI)等资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。AMI组基因型分布:PlA1/A1占20.00%、PlA1/A2占24.29%、PlA2/A2占55.71%,PlA1、PlA2等位基因频率分别为34.29%、65.71%。与对照组比较,AMI组PlA2/A2基因型明显增加,而PlA1/A1基因型明显减少,同时等位基因PlA2频率增加,PlA1频率则减少(P<0.05),PlA1、PlA2等位基因突变与AMI发病有相关性。AMI组PlA2/PlA2基因型病人的TG、TC、LDL-C、CK-MB、cTnI及NT-proBNP水平均明显高于其他基因型病人,而HDL-C水平明显低于其他基因型病人,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:GPⅢa的PlA1/A2多态性与AMI的发病有关,PlA2等位基因可能是AMI发病的易感基因。

基于分子对接和药效团的磷脂酶PLA2G1B抑制剂的虚拟筛选

磷脂酶PLA2G1B与饮食诱导肥胖及相关代谢紊乱密切联系,研究表明一些天然类黄酮化合物对磷脂酶有抑制作用.采用整合分子对接和药效团策略筛选PLA2G1B靶向小分子抑制剂.对5种类黄酮化合物与PLA2G1B靶标进行分子模拟对接,分析其相互作用,建立基于配体分子共同特征(HipHop)的药效团模型,应用该模型对ZINC数据库中小分子化合物进行筛选,并对匹配评分良好的化合物进行类药性和药代动力学性质(ADME)预测分析.结果表明,山柰酚、木犀草素、槲皮素、杨梅素和表没食子儿茶素没食子酸酯与PLA2G1B均能较好结合,结合能为-7.17~-6.17 kJ/mol;所构建的药效团模型含有3个氢键供体和1个氢键受体4个特征元素;通过对ZINC数据库中10897个小分子的筛选,共得到722个分子,命中率为6.6%.其中匹配评分>2.5的29个化合物均满足Lipinski规则,大部分化合物的ADME参数良好.研究结果为PLA2G1B抑制剂设计及先导化合物发现提供了参考数据.

PBAT/PLA复合膜结合1-MCP处理对金玉兰菜保鲜效果的影响

为研究金玉兰菜新型可降解保鲜包装及保鲜新技术,以聚苯乙烯(expanded polystyrene,EPS)泡沫箱包装作为对照,采用聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯/聚乳酸[poly(butyleneadipate-co-terephthalate)/polylactic acid,PBAT/PLA]复合膜包装结合1.0μL/L 1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对金玉兰菜进行处理,分析测定贮藏期间[(4.0±0.5)℃],金玉兰菜呼吸强度、色差、总酚含量、多酚氧化酶活性、营养物质含量等指标的变化。结果表明,采用PBAT/PLA复合膜包装的金玉兰菜在贮藏24 d后,硬度仍保持了1.98 kg/cm^(2),感官评分平均值维持在3.425,高于对照组(1.15);PBAT/PLA+1-MCP能够延迟呼吸高峰的出现时间,并降低呼吸峰值10.72 mg CO_(2)/(kg·h),褐变指数较未添加1-MCP的处理组降低了2.3~5.7,有效抑制了营养物质的损耗。PBAT/PLA复合膜结合1-MCP处理能够有效提高金玉兰菜冷藏过程中的品质,在拓宽可降解包装材料在农产品保鲜中的应用及提高金玉兰菜保鲜技术水平方面具有潜在应用前景。

磷脂酶A1(Lecitase Ultra)催化水解油脂机理研究(Ⅰ)——磷脂酶A1(Lecitase Ultra)组成及酶学特性

采用凝胶色谱、凝胶电泳和生物质谱分析了磷脂酶A1（Lecitase Ultra）（PLA1）的主要组成，结果表明PLA1主要由4种同工酶组成，这4种同工酶在氨基酸序列上与棉状嗜热丝孢菌（Thermomyces lanuginosus）的脂肪酶高度吻合。测得PLA1水解大豆油的最适pH为6．8，最适温度为40℃。PLA1在pH4～8之间，温度低于45℃下具有良好的稳定性，在pH3以下和pH10以上不稳定。

磷脂酶A1(Lecitase Ultra)催化水解油脂机理研究(Ⅱ)——立体选择性及水解进程

通过比较磷脂酶A1(Lecitase Ultra)(PLA1)和胰脂酶(pancreatic lipase,PL)水解大豆油释放出的脂肪酸组成,推断PLA1催化水解甘油三酯(TAG)具有Sn-1,3位立体选择性。测定了PLA1催化水解大豆油的水解平衡常数。通过分析不同水解时间水解产物的变化,推断反应初期TAG按照1,2-DAG(甘油二酯)水解路线水解,DAG中以1,2-DAG含量为主,随着1,2-DAG含量增加,水解同时按1,3-DAG路线进行,1,3-DAG含量开始增加。在反应后期由于1,3-DAG更容易水解,1,3-DAG浓度逐渐下降,水解反应以1,3-DAG路线水解为主。

不同治则中药复方对胆汁淤积性肝纤维化大鼠PAI-1影响的研究

目的:观察补益肝肾、活血化瘀方剂二至丸、失笑散及其组合对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织PAI-1mRNA的影响。方法:采用胆管结扎复制胆汁淤积性肝纤维化模型。术后1周,造模组随机分模型组、优思弗、二至丸、失笑散及合方组;各药物干预组分别给予相应药物灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,至4周末处死全部动物取材。观察内容包括一般情况、肝功能(ALT、AST、ALP、TBil)、肝组织病理、PAI-1mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠ALT、AST、ALP、TBil、纤维化程度均显著升高;与模型组比较,3个复方均能降低胆汁淤积性肝纤维化大鼠血清ALP、ALT、AST水平(P<0.01),失笑散及合方能降低TBil(P<0.01);合方改善ALP、ALT优于两个单方。3个复方均能不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度(P<0.01),合方优于两个单方。优思弗能降低ALT、AST水平,但对肝脏纤维化无明显改善作用。与模型组比较,失笑散组、二至丸组及合方组PAI-1mRNA表达显著降低(P<0.01),3个中药复方组之间比较,合方组最低,二至丸组次之,再次为失笑散组。结论:补益肝肾和活血化瘀中药复方二至丸、失笑散及其组合均不同程度地干预胆汁淤积性肝纤维化形成的作用,合方作用优于两个单方,其机制可能与调控PAI-1mRNA表达有关;不同治则的中药复方对PAI-1mRNA调控的强度不同。

PLA-g-MAH增容改性PLA/PETG共混物的结构与性能

采用熔融法制备聚乳酸接枝马来酸酐(PLA-g-MAH)用于增容改性聚乳酸/聚对苯二甲酸乙二醇酯-1,4-环己烷二甲醇酯(PLA/PETG)共混物,通过傅里叶转换红外光谱(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)和力学性能测试,考察了共混物的结构和力学性能。SEM结果显示,加入增容剂PLA-g-MAH后,PLA/PETG共混物两相间的界面明显变得模糊,说明PLA-g-MAH对共混物具有一定的增容作用;增容剂的引入,使共混物的拉伸强度和弯曲模量略有下降,但冲击强度略有提高,断裂伸长率显著提高(PLA的为6.9%,而加入3%增容剂共混物的为21.9%,提高到纯样的3倍左右),表现出良好的性能。

2型糖尿病并大血管病变患者血浆纤溶酶原激活物抑制剂1及凝血酶激活的纤溶抑制物水平变化及意义

目的:探讨2型糖尿病(DM)并大血管病变患者血液中纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、D-二聚体(D-D)以及血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)水平的变化及临床意义。方法:分别应用ELISA及乳胶免疫分析测定DM患者血浆PAI-1、t-PA、TAFI、D-D活性;并与糖尿病无大血管并发症组和健康对照组比较。结果:DM组PAI-1、t-PA、D-D和TAFI含量分别为(48.36±7.92)ng/mL、(12.52±3.17)ng/mL、(0.75±0.58)mg/L和60.82%±14.71%,与健康对照组相比有显著差异(P<0.01);其中糖尿病大血管病变组PAI-1、t-PA及D-D水平与糖尿病无大血管病变组有显著差异(P<0.01)。结论:糖尿病患者血液中PAI-1、t-PA、D-D、TAFI水平与血管损伤和功能变化的进程有显著相关性,联合检测上述指标对糖尿病及其并发症的诊断、治疗和病情观察有重要的临床意义。

嗜中性粒细胞胞质因子1基因C923T多态性与长沙市汉族人群脑出血的相关性研究

目的:探讨嗜中性粒细胞胞质因子1(NCF1)基因第10外显子C923T(A la308Val)多态性与湖南省长沙市汉族人群脑出血的关系。方法:采用PCR-单链构象多态技术和DNA直接测序法检测湖南省长沙市汉族人群脑出血患者110例、10个脑出血家系成员110例和健康对照者100名的NCF1基因第10外显子C923T多态性;同时检测各组血脂水平。结果:湖南省长沙市汉族人群NCF1基因第10外显子C923T多态存在CC,CT,TT 3种基因型,脑出血组及其各亚型组C923T(A la308Val)多态基因频率分布与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);脑出血家系组中患病组和未患病组及脑出血组的C923T多态分布与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);脑出血组中各基因型血脂水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:湖南省长沙市汉族人群NCF1基因C923T多态性可能与脑出血的易患性无关。

成人特发性膜性肾病肾组织M型磷脂酶A2受体1抗原的检测

目的检测在成人特发性膜性肾病患者肾组织中M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)抗原的阳性率及其与特发性膜性肾病关系。方法选取经肾活检证实的108例肾小球疾病患者,其中包括41例特发性膜性肾病、2例乙型肝炎病毒相关性膜性肾病、8例V型狼疮肾炎、27例Ig A肾病、19例微小病变性肾病、5例轻度系膜增生性肾小球肾炎和6例局灶节段性肾小球硬化。应用间接免疫荧光法检测患者肾组织中PLA2R1抗原。结果 41例特发性膜性肾病患者中35例肾组织PLA2R1抗原阳性,阳性率为85.37%。其中PLA2R1沿着肾小球毛细血管襻呈细颗粒状沉积。在V型狼疮性肾炎、乙型肝炎病毒相关性膜性肾病及其他肾小球疾病肾组织中均未发现PLA2R1抗原沉积。特发性膜性肾病PLA2R1阳性患者与PLA2R1阴性患者相比较,年龄、血肌酐、血清白蛋白、24 h尿蛋白定量均无统计学差异(P>0.05)。结论在成人特发性膜性肾病患者肾组织中应用间接免疫荧光法证实PLA2R1抗原的阳性率为85.37%,PLA2R1阳性与阴性患者在临床表现上无统计学差异。