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抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
李淑珍
刘莹
+5 位作者
陈苗
柳晓兰
唐小波
高建恩
朱大岭
孙启鸿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期389-392,共4页
目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-3...
目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-32a-PLA2G13(即PLA2G13-His)。PLA2G13-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb和鼠mAb。采用Western blot鉴定兔抗人PLA2G13 pAb的特异性。采用Western blot和Immunohistochemistry鉴定鼠抗人PLA2G13 mAb的特异性。结果:PLA2G13-GST和PLA2G13-His融合蛋白在均大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。Western blot鉴定表明,兔抗人PLA2G13 pAb可特异地识别HepG2细胞系中相对分子质量(Mr)约19700的蛋白,与文献报道中PLA2G13的实际Mr相符。通过筛选共获得8株可稳定分泌抗PLA2G13的杂交瘤细胞株,Western blot鉴定表明6株可识别重组人PLA2G13蛋白,免疫组织化学鉴定显示2株可特异性识别正常肝组织中的PLA2G13蛋白。结论:成功地制备了抗人PLA2G13兔pAb和鼠mAb,为进一步研究PLA2G13的功能提供了特异性检测工具。
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关键词
pla2g13
原核表达
融合蛋白
抗体制备
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职称材料
题名
抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
1
1
作者
李淑珍
刘莹
陈苗
柳晓兰
唐小波
高建恩
朱大岭
孙启鸿
机构
蛋白质组学国家重点实验室
安徽医科大学基础医学院
哈尔滨医科大学药学院生物制药研究室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期389-392,共4页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2006CB910803)
国家自然科学基金青年科学基金项目(30600738)
文摘
目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-32a-PLA2G13(即PLA2G13-His)。PLA2G13-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb和鼠mAb。采用Western blot鉴定兔抗人PLA2G13 pAb的特异性。采用Western blot和Immunohistochemistry鉴定鼠抗人PLA2G13 mAb的特异性。结果:PLA2G13-GST和PLA2G13-His融合蛋白在均大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。Western blot鉴定表明,兔抗人PLA2G13 pAb可特异地识别HepG2细胞系中相对分子质量(Mr)约19700的蛋白,与文献报道中PLA2G13的实际Mr相符。通过筛选共获得8株可稳定分泌抗PLA2G13的杂交瘤细胞株,Western blot鉴定表明6株可识别重组人PLA2G13蛋白,免疫组织化学鉴定显示2株可特异性识别正常肝组织中的PLA2G13蛋白。结论:成功地制备了抗人PLA2G13兔pAb和鼠mAb,为进一步研究PLA2G13的功能提供了特异性检测工具。
关键词
pla2g13
原核表达
融合蛋白
抗体制备
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定
李淑珍
刘莹
陈苗
柳晓兰
唐小波
高建恩
朱大岭
孙启鸿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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