血管组织中Plaur和Plat诱导血管性血友病因子释放促血栓形成

背景:目前,深静脉血栓形成的分子病因学机制及其形成的核心调控网络仍未完全阐明,对于深静脉血栓的早期诊断预测也无理想的方法。目的:观察创伤性深静脉血栓形成大鼠静脉内皮细胞中Plaur和Plat的促血栓形成作用。方法:采用股静脉钳夹联合下肢石膏制动构建大鼠创伤性深静脉血栓模型。依据取材时间及是否有血栓形成分为血栓形成前组、血栓形成组和血栓不形成组,分别于造模后2.5,25h取大鼠股静脉内皮细胞用于实验。结果与结论:基因芯片分析及real-timePCR结果均显示创伤后2.5h,大鼠股静脉Plaur、Plau及血管性血友病因子基因表达上调;血栓形成时,Plaur、Plau及血管性血友病因子基因表达上调更显著。信号通路分析显示Plaur、Plau为血管性血友病因子的上游调控基因,血管性血友病因子为触发血小板黏附、聚集及血栓形成的关键基因。提示Plaur、Plau可通过上调血管性血友病因子表达,引发血小板黏附、聚集,促进大鼠创伤性深静脉血栓形成。

PLAUR基因过表达对人结肠癌细胞株CD133^+、CD44^+细胞增殖的影响

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,PLAUR)过表达对人结肠癌细胞株CT-26中CD133+、CD44+细胞增殖的影响。方法用携带PLAUR基因的逆转录病毒载体(pMSCV-PLAUR)感染人结肠癌CT-26/CD133+以及CT-26/CD44+细胞,作为观察组(pMSCV-PLAUR/CD133+组,pMSCV-PLAUR/CD44+组);以未携带PLAUR基因的逆转录病毒载体(pMSCV)感染CT-26/CD133+、CT-26/CD44+细胞,作为对照组(pMSCV/CD133+组,pMSCV/CD44+组)。用实时定量荧光PCR和免疫印迹法分别检测细胞中PLAUR mRNA水平和蛋白表达的水平;利用平板克隆实验检测细胞增殖能力的变化。结果在观察组和对照组中PLAUR mRNA的表达情况分别为CD133+(1.02±0.20)、(0.52±0.12)和CD44+(1.15±0.09)、(0.68±0.07),观察组PLAUR蛋白表达的水平均较对照组显著增高(均P<0.05);观察组、对照组的细胞克隆形成率分别为CD133+(78.25±3.29)%,(51.45±2.53)%以及CD44+(82.45±4.56)%,(44.96±5.64)%,观察组高于对照组(P<0.05)。结论PLAUR过表达可以显著增强人结直肠癌CT-26/CD133+、CT-26/CD44+细胞的克隆形成能力,促进CD133+、CD44+细胞增殖。

LYPD8在结直肠癌中的表达及其生物学功能

目的探讨含有Ly6/Plaur结构域的高度糖基化的磷脂酰肌醇锚定蛋白8(LYPD8)在结直肠癌(CRC)中的表达及其生物学功能。方法将收集自2015年3月至2016年9月在温州医科大学附属新昌医院的40例CRC患者的CRC组织与相应的癌旁结直肠组织以及正常结直肠组织进行比较,检测不同临床分期患者CRC组织中LYPD8 mRNA表达,STAT3、p65的磷酸化水平以及IL-6、TNF-α的分泌水平;同时利用真核表达载体(pIRES2)构建过表达LYPD8的质粒DNA,检测LYPD8过表达对CRC细胞增殖和迁移的影响。结果与正常组织和癌旁组织相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期CRC患者癌组织中LYPD8 mRNA表达水平均明显降低(均P<0.05),其中Ⅲ期患者降低最明显(P<0.05)。CRC组织中STAT3/p65磷酸化水平及IL-6、TNF-α水平均明显增加(均P<0.05)。SW480细胞中LYPD8过表达,其存活凋亡百分比明显降低(P<0.05),迁移个数明显减少(P<0.05)。结论LYPD8在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者CRC组织中的表达较癌旁组织及正常组织明显降低;LYPD8在CRC细胞中通过诱导STAT3、p65去磷酸化,抑制TNF-α、IL-6的分泌,从而抑制CRC细胞的增殖和迁移。