Pig Liver Esterase-catalyzed Hydrolysis of Three Diesters of meso-Bicyclic Dicarboxylic Acid and Three Tetraesters of Tetrahydrofuran -2,3,4,5-tetracarboxylic Acid

Three diesters of exo- syn-meso-oxabicyclo (2, 2, 1 ) -hept- 5- ene- 2, 3- dicarboxylic acid and three tetraesters of tetrahydrofuran-2, 3, 4, 5-tetracarboxylic acid were synthesized and tested with enantioselective hydrolysis catalyzed by pig liver esterase(PLE). The results of the PLEcatalyzed hydrolysis were discussed.

猪肝羧酸酯酶研究进展

羧酸酯酶(carboxylesterases,CES,E.C.3.1.1.1)属于丝氨酸水解酶类,该酯酶在哺乳动物各种器官和组织中存在,在肝脏组织和小肠组织中含量丰富,可催化水解多种内外源性物质,发挥重要的药理学和生理学作用。20世纪初就有猪肝羧酸酯酶的研究报道,但大部分研究是围绕其在有机化学合成中的应用,而对该酶的生理功能研究较少。猪肝羧酸酯酶家族成员数量多,水解特性互补,在重要组织器官内以高丰度存在,该酶家族在维持机体内环境稳态中发挥着重要的作用。有关猪肝羧酸酯酶基因家族及生理、药理、免疫等功能的报道很多,论文对猪肝羧酸酯酶的基因与同工酶、空间结构、催化水解特性及功能进行系统综述,以期为相关研究提供参考。

三相法提取猪肝酯酶及其在制备D -7-ACA中的应用

酯酶广泛存在于动物、植物和微生物中,具有作用范围广、底物特异性高等特点。该酶能够催化许多含有酯、酰胺、硫酯或乙酰基的化合物的水解与合成,在生物催化领域具有重要的用途。对来源于猪肝中的酯酶采用三相分离的方法进行了提取,并利用猪肝酯酶的水解特性,研究了其催化7-氨基头孢烷酸(7-ACA)脱乙酰基制备去乙酰基-7-氨基头孢烷酸(D-7-ACA)的过程。主要研究结果:确立了三相法分离提取猪肝酯酶的方法,考察了有机溶剂种类、有机溶剂用量、硫酸铵浓度以及体系的pH和提取温度等条件对三相法分离提取猪肝酯酶的影响。实验结果表明在硫酸铵质量分数为45%、异丁醇与水相之比为1∶1、pH7.0、温度为30℃的条件下,酶活回收率为54.84%,纯化倍数为6.32倍。以猪肝酯酶为催化剂,研究了猪肝酯酶催化7-ACA脱乙酰基制备D-7-ACA,在pH7.5、温度35℃、底物浓度2%、酶添加量30 U/mL的反应条件下,7-ACA转化率达到94.33%。

猪肝中提取纯化动物酯酶的研究

本实验探索了一种从猪肝中提取纯化动物酯酶的有效方法,从而为农药残留的动物酯酶检测提供了一种廉价酶源。将所制动物酯酶液用于检测毒死蜱的结果表明,其检测效果良好,所制动物酯酶具有实用价值。

现代媒体在体育舞蹈律动教学中的运用

将录音、录像、摄像及网络等现代媒体与传统教学方式结合起来 ,可使教学过程最优化 .该文结合作者的体育舞蹈律动教学实践 ,论述了现代媒体在体育舞蹈律动教学各环节中的作用 ,并阐明了其具体的教学过程 .

猪肝酯酶杂化“纳米花”的制备及其对菊酯类农药的水解性能研究

采用生物矿化策略,在磷酸盐缓冲液中制备了猪肝酯酶(Porcine liver esterase,PLE)杂化"纳米花"(Ca3(PO4)2-PLE)。利用扫描电镜、元素能谱分析及红外光谱对所制备的杂化"纳米花"进行了形貌和成分分析。对杂化"纳米花"制备过程中的参数进行优化,结果表明:在10 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H 7. 4)中,猪肝酯酶质量浓度为0. 3 g/L,钙离子浓度为500 mmol/L,制备温度为20℃时,所制备的Ca3(PO4)2-PLE具有最高酶活,其酶活为同等酶浓度下液酶酶活的169%。将制备的Ca3(PO4)2-PLE用于4种菊酯类农药的酶解性能研究,发现相同条件下,Ca3(PO4)2-PLE的酶解率均优于液酶。此外,制备的Ca3(PO4)2-PLE用于菊酯农药酶解循环2次后仍保持70%以上的活力。

巯基微球协助重组γ-猪肝酯酶包涵体体外复性

猪肝酯酶(PLE)是一种广泛应用于光学活性醇或羧酸合成的水解酶。大肠杆菌异体表达为大规模生产猪肝酯酶γ同工酶提供了可能,但表达过程中会形成包涵体,需经体外重折叠恢复其生物活性。针对γ-PLE含二硫键的特点,制备了三种不同巯基负载量的功能聚合物微球SG-DTT(6.1μmol·g-1、25.2μmol·g-1和143.4μmol·g-1),将其应用于协助γ-PLE包涵体体外复性,并考察了微球浓度、pH、温度和尿素浓度对复性效果的影响。复性过程需要适宜的氧化还原环境,较高的巯基负载量微球协助复性效果较好,当γ-PLE浓度为1000μg·ml-1时,微球协助复性后γ-PLE的活性可达到1885 U·L-1,比对照组提高了72%。研究表明,巯基微球能有效促进二硫键的正确配对,阻止蛋白分子间的聚集,是一种新型高效的复性添加剂。

猪肝酯酶研究进展

猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,对它的生化特性研究较早。近几年猪肝酯酶的基因克隆研究也取得了较大进展。重组酶具有选择特异性更高的特点,与生化提取方法相比成本较低廉。基因工程技术的开展使猪肝酯酶在化学工业、生物制药及相关领域中有了更加广泛的应用前景.

猪肝酯酶在甲醇酵母中的克隆与表达

猪肝酯酶(Pig Liver Esterase,PLE)是手性合成工业中最常用的三种生物催化剂之一,它的 生化提取物是多种同工酶(α、β和γ亚基)的混合物,而它的单一组分(γ亚基)有很高的手性拆分 活性。为获得重组PLE,从猪肝提取总RNA,经RT-PCR得到γ亚基目的基因,并利用pPIC9K质 粒构建成pPIC9K-PLE表达载体,转化到Pichia pastoris中,转化细胞株摇瓶发酵表达重组PLE达 450mg／L,活性染色证明分子量略低于天然酶。

猪肝酯酶催化苯乙二醇环碳酸酯水解最佳反应条件的研究

猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,在猪肝酯酶的催化下,苯乙二醇环碳酸酯发生水解,生成苯乙二醇。实验围绕影响猪肝酯酶催化反应活性的4个主要因素进行了系统研究,得到了最优的酶浓度（15g/L）、pH值（8.0）、温度（25~30℃）及有机溶剂种类和浓度（二氧六环,65%v/v）,为猪肝酯酶催化苯乙二醇环碳酸酯反应的进一步研究奠定了基础。

猪肝酯酶在不对称合成中的应用

猪肝酯酸PLE(Pig Liver Esterase)对双酯具有特殊的不对称水解性,而且可获得高产率和高光学纯的不对称水解产物。本文简要介绍PLE作为一种有效的酶催化剂,在温和的条件下,对双酯的不对称水解反应和在不对称合成中应用的近况。

固定化猪肝酯酶法制备S-4-甲基哌啶酸的研究

S-4-甲基哌啶酸是重要的药物中间体,本文考察了海藻酸钠、壳聚糖等制备固定化猪肝酯酶的工艺稳定性,确定了最适酶浓度、底物浓度、温度和pH。壳聚糖法固定化猪肝酯酶选择性水解制备S-4-甲基-哌啶甲酸,de值高达99%,固定化酶重复利用率高,工艺稳定。