载荷bFGF-PLGA微球的胶原海绵的制备及其体外缓释性能研究

在支架材料上引入具有控释行为的生长因子旨在结构与功能上模拟细胞外基质能.制备了一种载荷bFGF-PLGA微球的胶原海绵缓释体系,探讨其在体外对bFGF的释放性能.采用复乳溶剂挥发法制作微球,将微球与胶原海绵复合;通过扫描电镜观察微球和载荷微球胶原海绵的表面形态结构;利用ELISA法测试微球中药物的载药量和包封率,并对微球和载荷微球胶原海绵中bFGF的体外释放行为进行研究.结果表明:微球表面圆滑,载药量为0.059 9%±0.001 9%,包封率为79.9%±2.8%;载荷微球海绵的突释率为14.6%,低于微球本身20.0%的水平;而且载荷微球海绵的体外释放bFGF时间比微球本身更长.载荷bFGF-PLGA微球的胶原海绵缓释体系在体外能够稳定地缓释bFGF,具有较小的突释率,有望发展成为一种理想的组织工程支架材料.

快速膜乳化法制备载生长激素释放肽-6的PLGA微球

采用快速膜乳化法制备了聚(乳酸羟基乙酸)(PLGA)微球,得到制备PLGA微球的优化条件为:过膜压力5kPa,水相中PVA浓度19g/L,油/水相体积比1:10,该条件下所制空白微球的平均粒径约为24μm,粒径分布系数Span0.7.在此基础上制备载生长激素释放肽-6(GHRP-6)微球,油相乳化剂浓度2.5g/L、外水相中NaCl浓度10g/L条件下所制载GHRP-6微球包埋率最高可达85%,初乳制备方式对药物包埋率及体外释放行为均有较大影响,超声法制备的初乳所得微球内部结构紧密,药物包埋率较高(85%),但释药缓慢;而均质法制备的初乳所得微球内部结构疏松,药物包埋率较低(76.8%),但在体外释放更完全.

碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对许旺细胞在小肠粘膜下层增殖活性的影响

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）缓释微球对许旺细胞（SC）在小肠粘膜下层（SIS）上增殖影响。方法运用双酶两步消化法对 SC 进行体外分离、培养、纯化,将 bFGF-PLGA 缓释微球（bFGF-PLGA-MS）与 SC 及 SIS进行体外复合培养,并以游离 bFGF 组及单纯培养液组进行对比,观察 bFGF-PLGA 缓释微球对 SC 在 SIS 上增殖影响。结果运用双酶两步消化的体外原代培养方法获取的许旺细胞数量较多,细胞纯度可达90%以上。细胞的体外增殖活性良好,细胞增殖周期约为6～7d,培养后2～7d 为对数生长期,第7d 后进入生长平台期； bFGF 缓释微球能持续地促进许旺细胞在 SIS 上的增殖；细胞增殖周期缩短,细胞能较稳定地保持着良好的活性；提高了细胞增殖指数,并使 SIS 上的 SC持续保持较高的增殖活性；细胞数量与 bFGF 含量的相关系数为0.988（P =0.02）,表明两者间有明显正相关关系。结论bFGF-PLGA 微球的药物缓释促进了SC 在SIS 上持续而稳定的增殖,为以SC 复合SIS 构建人工神经提供了有利条件。

碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对许旺细胞在小肠粘膜下层细胞粘附活性的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缓释微球对许旺细胞(SC)在小肠粘膜下层(SIS)上的粘附影响。方法运用双酶两步消化法对SC进行体外分离、培养、纯化,将bFGF-PLGA缓释微球(bFGF-PLGA-MS)与SC及SIS进行体外复合培养,并以游离bFGF组及单纯培养液组进行对比,观察bFGF-PLGA缓释微球对SC在SIS上粘附影响。结果运用双酶两步消化的体外原代培养方法获取的雪旺细胞数量较多,细胞纯度可达90%以上。细胞的体外增殖活性良好,细胞增殖周期约为6～7天,培养后2～7天为对数生长期,第7天后进入生长平台期;bFGF缓释微球能持续地促进雪旺细胞在SIS上的粘附、增殖及迁移;细胞增殖周期缩短,细胞能较稳定地保持着良好的活性;提高了细胞增殖指数,并使SIS上的SC持续保持较高的增殖活性;细胞数量与bFGF含量的相关系数为0.988(P=0.02),表明两者间有明显正相关关系。结论 bFGF-PLGA微球的药物缓释促进了SC在SIS上持续而稳定的粘附,为以SC复合SIS构建人工神经提供了有利条件。

微球包裹pcDNA3-GRF(1-32)在小鼠肌肉组织的表达及对生长的影响

以乳酸 乙醇酸共聚物为载体 ,采用复乳 液中蒸发法制备载生长激素释放因子 (Growthhormonereleasingfactor,GRF)真核表达质粒pcDNA3 GRF(1 32 )微球 ,其中包封率达 6 9% ,平均粒径为 2 2 0 μm ,载药量 80 μg mg ,收率70 % ;体内转染小鼠肌肉组织 ,提取注射部位肌肉组织DNA和总RNA ,经PCR和RT PCR ,发现注射pcDNA3 GRF(1 32 )微球组的GRF表达水平最高 (UVIBANDVersion 99分析 ) ,释放的GRF表达质粒在小鼠肌肉内存在并表达的时间至少 30d。体重统计结果表明 ,30d后微球包裹质粒组累积增重与其它组相比差异极显著 (P <0 0 1 ) ,比裸质粒组、质粒和空白微球混合物组、生理盐水组分别高 1 2 87% ,1 9 72 % ,5 8 5 8% ;结论认为 ,载pcDNA3 GRF(1 32 )微球具有缓释作用 ,并可实现GRF基因体内局部基因转染、表达 ,发挥其相应的生物学效应 。

生长激素释放肽 - 6缓释微球的制备及其对动物生长的影响

以生物降解材料乳酸乙醇酸共聚物 (PL GA,L A- GA 85∶ 1 5 )为载体 ,采用复乳 -液中蒸发法制备含生长激素释放肽 - 6的乳酸乙醇酸共聚物微球 ,并通过体外药物释放试验评价载药微球的释药特征。结果得到收率、粒径大小和分布及含药量均满意的微球 ,其中包封率为 1 0 0 %,平均体积径为 3 .4 5μm ,收率为 79%。在 3 7℃、p H 7.0的生理等渗缓冲液中 ,首日释药 1 9.1 9%,其后以平均日释药 3 .2 3 %的速度释药 2 5 d。小鼠肌肉注射微球 3 0 d后 ,累积增重比注射生长激素释放肽 - 6、生理盐水分别高 2 2 .5 6 %(P<0 .0 5 )和 5 3 .1 7%(P<0 .0 1 )。结果表明 ,生长激素释放肽 -

重组人生长激素缓释微球.Ⅰ.制备与体外释放研究

采用复乳-溶媒蒸发法制备重组人生长激素(rhGH)可生物降解缓释微球,考察蛋白稳定剂泊洛沙姆407(F127)对rhGH体外释放的影响。利用均匀设计优化微球的处方和制备工艺,制得的rhGH-PLGA微球球形圆整,表面光滑致密,粒径均匀且具有较高的包封率和载药量。微球的体外释药行为呈先快后慢的两相释放模式,d30时含有F127的微球累积释药量约79%,较不含稳定剂的微球高22%。表明F127可通过抑制有机溶剂诱导的蛋白聚集而对rhGH起到稳定作用。

聚乳酸羟基乙酸-甲状旁腺激素相关蛋白复合微球的制备形态表征及生物相容性研究

目的制备聚乳酸羟基乙酸-甲状旁腺激素相关蛋白复合微球(PLGA-PTHrP)并观察其形态表征及其生物相容性。方法采用复乳溶剂挥发法制备空白聚乳酸羟基乙酸(PLGA)微球,通过表面浸提法将不同浓度的甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)装载到PLGA微球。采用冷冻干燥法制备负载有效浓度PTHrP的PLGA微球。通过扫描电镜观察PLGA微球形态并计算微球粒径,检测PLGA-PTHrP的蛋白释放量,并绘制释放曲线。将PLGA-PTHrP与大鼠全骨髓细胞共培养,分析复合微球对细胞增殖分化的影响。结果采用复乳溶剂挥发法制备得到的空载PLGA微球呈球形或类球形,表面较平整,平均粒径为(56.73±7.22)μm。载蛋白微球的体外蛋白质释放实验结果显示,蛋白质的释放速率在前100 h较快,释放时间可持续达300 h。载蛋白微球释放的蛋白质占蛋白质总量的87.3%。实验结果显示,PLGA-PTHrP对大鼠全骨髓细胞增殖活力无明显影响。结论通过复乳溶剂挥发法可制备出表面较平整,粒径较均匀的PLGA空白微球,使用表面浸提法及冷冻干燥法能制备出有效的PLGA-PTHrP缓释体系,该缓释体系能在一定时间范围内实现PTHrP的缓释作用。

可降解聚乙交酯-丙交酯缓释微球用于甲状旁腺相关肽的持续释放

采用水包油包水(W1/O/W2)复乳溶剂挥发法制备了包载甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)的聚乙交酯-丙交酯(PLGA)微球,通过核磁,红外,GPC,扫描电子显微镜等观察PLGA载药微球的结构,表明载药微球具有良好的球形结构,其平均粒径约为8μm.而体外模拟释放表明,此PLGA载药微球能实现PTHrP1-34长达25天的持续释放.并通过MTT法、碱性磷酸酶活性测定等检测负载PTHrP1-34的PLGA微球缓释系统对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖及分化的影响,结果表明PTHrP1-34浓度为1×10-9mol/L时对MC3T3-E1增殖促进效应最大,且随着药物作用时间的延长,缓释系统促进细胞增殖、分化的作用越明显.

聚乳酸乙醇酸在微球控释制剂中的研究进展

聚乳酸乙醇酸(PLGA)是生物可降解的聚合物,已取得了美国FDA的批准,用于组织工程支架和药物载体。由于其具有良好的生物相容性和生物可降解性,近20年来成为小分子药物、蛋白质和其他大分子(DNA、RNA或多肽类)化合物的缓释控释制剂研究的热点。对于PLGA微球制剂的研究主要集中在疫苗类、激素类、抗生素类、抗肿瘤类、神经营养物质类等药物控释制剂。主要介绍近5年来这些药物微球的研究情况,为进一步开发利用PLGA作为药物载体提供参考。