Research Progress on Targets and Selective Inhibitors of Polo-like Kinase-1(PLK-1)

In this paper,the biological function of PLK-1,the correlation between PLK-1 and tumors,and the latest research progress on PLK-1 inhibitors under study are reviewed,in order to provide references for the research and development of PLK-1 inhibitors.

PLK-1在急性白血病细胞中的表达及意义

为了探讨急性白血病细胞中plk-1基因及其蛋白的表达情况和意义,并初步了解PLK-1蛋白在急性白血病细胞中的分布情况,通过抽取急性白血病患者、骨髓良性增生者及正常人的骨髓或外周血单个核细胞作为研究对象,应用RT-PCR技术及流式细胞术检测plk-1mRNA和PLK-1蛋白在急性白血病细胞中的表达,用荧光显微镜观察PLK-1蛋白在急性白血病细胞中的分布。结果表明:急性白血病细胞plk-1在基因水平及蛋白质水平上表达均明显增高;荧光显微镜检查显示细胞分裂间期PLK-1蛋白较高浓度地、均匀地散在分布于急性白血病细胞内,在有丝分裂过程中,姊妹染色单体拉开至细胞两极时PLK-1蛋白主要分布在姊妹染色单体之间。而正常骨髓细胞和良性增生骨髓细胞plk-1在基因水平和蛋白质水平几乎均不表达。结论:PLK-1蛋白对急性白血病细胞的异常增殖可能起重要作用,其表达的高低与恶性程度有关。PLK-1蛋白或其基因有可能作为抗瘤药物新的靶点,并可作为判断急性白血病疗效及预后的有效指标之一。

Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺组织中的表达及临床意义

目的本研究从蛋白水平分析Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同阶段乳腺组织中的表达情况,探讨三者在乳腺癌发生、发展中可能的作用。方法收集正常乳腺组织、导管上皮不典型增生及乳腺癌标本共176例,采用罗氏全自动免疫组化染色法检测Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺组织中的表达,比较其差异并分析Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺疾病中的表达情况以及与主要病理学特征的关系。结果①Mel-18在正常乳腺组织中的表达明显高于乳腺癌,差异显著(P<0.05);Notch-1和PLK-1在乳腺癌中的表达要明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。②Notch-1的过表达与组织学分级、临床分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与年龄和肿瘤直径之间无明显相关性(P>0.05)。PLK-1的表达仅与肿瘤的组织分级呈正相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、临床分期及淋巴结转移之间无明显相关性(P>0.05)。结论 Mel-18为乳腺癌的肿瘤抑制基因,由于乳腺癌中Notch-1通路的激活使得乳腺增殖加速,细胞的分化状态降低。PLK-1蛋白的过量表达引起乳腺细胞的分裂和增殖,促进了乳腺癌的形成。联合检测3个指标对判定乳腺癌的预后有重要意义。

过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响。方法①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平。②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变。③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力。结果①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因。RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性。

吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及PLK-1表达的影响

目的研究吉西他滨对胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡以及PLK-1表达的影响。方法将0、1、2、5、10μmol/L吉西他滨分别加入人胰腺癌SW1990细胞中,培养3 d,检测细胞存活率。测定0、2和5μmol/L吉西他滨处理的SW1990细胞凋亡情况、PLK-1 mRNA和蛋白表达情况。结果不同浓度吉西他滨处理24、48和72 h对SW1990细胞存活率和凋亡率均有影响,与0μmol/L比较差异均有统计学意义(P<0.05),吉西他滨对SW1990细胞抑制作用随着浓度的升高而更加明显。5μmol/L吉西他滨处理24、48和72 h PLK-1、mRNA、蛋白表达水平均高于0μmol/L(P<0.05)。结论吉西他滨能够有效诱导胰腺癌细胞凋亡,其机制与SW1990细胞的PLK-1 mRNA和蛋白表达水平有关。

Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌中的表达

目的探讨Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌中的表达。方法收集乳腺组织89例,其中正常乳腺组织40例,浸润性乳腺组织49例,采用免疫组化法检测Mel-18、Notch-1及PLK-1在正常乳腺组织和浸润性乳腺组织中的表达情况,并分析Mel-18、Notch-1及PLK-1与浸润性乳腺癌临床病理参数(患者年龄、组织学分级、淋巴结转移、临床分期)的相关性。结果 Mel-18在正常乳腺组织中的阳性率为77.5%,在浸润性乳腺组织中的阳性率为34.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05);Notch-1在正常乳腺组织中的阳性率为42.5%,在浸润性乳腺组织中的阳性率为71.4%,两者差异有统计学意义(P<0.05);PLK-1在正常乳腺组织中的阳性率为22.5%,在浸润性乳腺组织中的阳性率为77.6%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。Mel-18的表达与淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05),与患者年龄和组织学分级无关(P>0.05),Notch-1和PLK-1的表达均与组织学分级、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。结论 Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌的发生发展中具有一定的作用,与淋巴结转移和临床分期密切相关,可能是影响浸润性乳腺癌预后的重要指标。

急性白血病患者骨髓形态特征及K562细胞系Plk-1的表达水平分析

目的观察急性白血病( AL)患者骨髓形态特征,分析 AL 患者骨髓细胞与 K562 细胞系中 Plk-1 的表达特征。方法选取在本院接受治疗的急性髓细胞白血病患者( AML)和急性淋巴细胞白血病患者( ALL),通过穿刺法观察骨髓细胞学形态特征;K562 传代细胞与 AL 骨髓细胞标本进行 PCR扩增及 Western Blot 表达鉴定。结果 ALL 与 AML 骨髓细胞均呈现类圆形或不规则形,细胞核呈圆形或类圆形;ALL 骨髓细胞相对 AML 较小,胞浆少,无明显颗粒及核仁, AML 胞浆丰富,有明显颗粒及核仁;AL 患者骨髓细胞组与 K562 细胞系的组间表达丰度值没有明显差异;有 AL 家族史、红细胞和血小板计数下降、血尿酸水平上升、没有 AL 用药史的患者 Plk-1 表达显著升高。结论 AL 骨髓细胞形态特征符合肿瘤恶转的特点,Plk-1 mRNA 在 AL 患者中发生了特异性表达。

乳腺癌组织中FOXM1和PLK1的表达及意义

目的探讨叉头框转录因子M1(FOXM1)及Polo样激酶1(PLK1)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测FOXM1及PLK1蛋白在803例乳腺浸润性导管癌和乳腺癌旁组织中的表达情况及其与乳腺癌组织临床病理特征间的关系。结果 FOXM1及PLK1在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率分别为59.78%(480/803)和27.90%(224/803),显著高于其在乳腺癌旁组织中的表达(29.89%,0),差异具有统计学意义(χ~2=145.011,χ~2=260.307,P=0.000)。FOXM1及PLK1蛋白的表达与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期相关,而与肿瘤大小无关,且二者表达具有正相关关系(r=0.414,P<0.01)。结论 FOXM1及PLK-1可能协同参与了乳腺癌的发生、发展,并可能成为乳腺癌预后评估的重要指标。

保罗样激酶1mRNA及蛋白质在胃癌中的表达意义

目的探讨保罗样激酶1(plk1)在胃癌组织中mRNA及蛋白质的表达,并探讨其表达水平与临床病理指标的关系。方法采用实时定量多聚酶链反应及免疫印迹(W estern blot)分别检测了6 0例胃癌患者新鲜切除胃癌组织及其对应正常胃粘膜组织中plk1 mRNA及蛋白质的表达。结果胃癌组织中plk1mRNA及蛋白质水平均明显高于正常组织(P<0.0 5,P<0.0 1);并且其水平与胃癌的分化程度和浸润深度有关(P<0.0 5);蛋白质表达水平与胃癌的分化有关(P<0.0 5)。结论plk1的过表达可能在胃癌发生发展中起促进作用;其表达程度可望作为胃癌的某些生物学行为新的判定指标。

叶酸缺乏协同保罗样激酶1小干扰RNA抑制胃癌细胞株生长的研究

目的探讨叶酸缺乏和保罗样激酶1(PLK-1)小干扰RNA(siRNA)的联合作用对胃癌肿瘤细胞的影响。方法 PLK-1 siRNA用Lipofectamine TM 2000作载体转染胃癌细胞株SGC7901和BGC823,real-time PCR和Western blot验证转染效果;然后将转染的SGC7901和BGC823细胞株,继续在叶酸缺乏和正常叶酸浓度培养基中培养72 h,检测细胞增殖、凋亡、周期和蛋白Bcl-2的变化情况。结果叶酸缺乏与PLK-1 siRNA具有协同抑制SGC7901、BGC823细胞增殖,促进凋亡和使细胞周期停滞在G2/M期的作用,二者能协同抑制SGC7901、BGC823 Bcl-2蛋白表达。结论叶酸缺乏和PLK-1 siRNA均能抑制胃癌细胞SGC7901、BGC823的生长,两者具有协同效应。该效应可能与Bcl-2蛋白的抑制有关。