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黄瓜质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白基因(SOS1)的克隆与序列分析 被引量:4
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作者 王澍 任晴雯 樊国盛 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2012年第3期6-10,共5页
采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从黄瓜Cucumis sativusL.中克隆出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(CsSOS1),该cDNA全长3 638bp,其中开放阅读框为3 435bp,编码1 145个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,CsSOS1氨基酸序列... 采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)方法从黄瓜Cucumis sativusL.中克隆出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(CsSOS1),该cDNA全长3 638bp,其中开放阅读框为3 435bp,编码1 145个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,CsSOS1氨基酸序列与水稻OsSOS1和拟南芥AtSOS1的氨基酸序列同源性较高,分别为64%和58%,而与液泡型的Na+/H+逆向转运蛋白氨基酸序列亲缘关系较远。蛋白质跨膜结构分析表明CsSOS1包含11个完全跨膜片段。激光共聚焦显微镜显示CsSOS1基因的编码区与YFP基因融合后,定位在细胞膜上。酵母功能互补试验结果显示CsSOS1参与Na+与H+的转运,表明该基因转化酵母后可以补充酵母SOS1的缺失。 展开更多
关键词 黄瓜 质膜型na+/h+逆向转运蛋白基因(sos1) CDna克隆 亚细胞定位 酵母功能互补
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胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H_2O_2信号途径的调控 被引量:1
2
作者 王美娟 王洋 +7 位作者 申泽丹 马旭君 撒刚 邓澍荣 刘丹丹 张玉红 沈昕 陈少良 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第2期79-91,98,共14页
【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量... 【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。 展开更多
关键词 胡杨 盐胁迫 转基因拟南芥 质膜na+/h+逆向转运蛋白(sos1) h2O2信号 K+/na+平衡 离子流
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表达谱芯片对灰绿藜和水稻NHX1基因在转基因拟南芥中表达差异的研究 被引量:1
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作者 郭继娜 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-6,F0003,共7页
【目的】基因芯片作为高通量、高效率的DNA分析技术,已被广泛地用于植物抗逆性功能基因的分析之中。为探讨盐生植物和甜土植物NHX1基因调控盐应答过程和亲水性C端的功能研究提供借鉴,进一步揭示盐生植物和甜土植物耐盐机制的差异,为植... 【目的】基因芯片作为高通量、高效率的DNA分析技术,已被广泛地用于植物抗逆性功能基因的分析之中。为探讨盐生植物和甜土植物NHX1基因调控盐应答过程和亲水性C端的功能研究提供借鉴,进一步揭示盐生植物和甜土植物耐盐机制的差异,为植物耐盐机理的实际应用提供依据。【方法】利用Affymetrix拟南芥表达谱芯片对过表达盐生植物灰绿藜和甜土植物水稻NHX1基因及缺失部分C端基因的转基因拟南芥进行基因表达差异的分析。【结果】在盐胁迫的转基因拟南芥组织中,筛选出在四组转基因型拟南芥中共同差异表达的基因有394条,占筛选基因总数的1.64%,其中上调表达的基因有177条,下调表达的基因有217条。将这些差异基因初步分为12类,包括非生物性与生物性刺激的应答过程、胁迫应答过程、电子转移和能量途径、信号转导和转录等功能类别。【结论】表明植物耐盐过程是一个多基因参与的复杂的变化过程,涉及到许多相关基因的变化。联系两两比较散点图和聚类分析结果从理论上说明,转基因拟南芥cgNHX1,cgNHX1dc,osNHX1和osNHX1dc耐盐性有依次减弱的趋势。 展开更多
关键词 表达谱芯片 灰绿藜 水稻 NhX1 植物耐盐
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Comparative Study on Growth Performance of Transgenic(Over-Expressed OsNHX1) and Wild-Type Nipponbare under Different Salinity Regimes 被引量:3
4
作者 Nurul Kahrani ISHAK Zohrah SULAIMAN Kushan U.TENNAKOON 《Rice science》 SCIE CSCD 2015年第6期275-282,共8页
Transgenic Nipponbare which over-expressed a Na+/H~ antiporter gene OsNHX1 was used to compare its growth performance, water status and photosynthetic efficiency with its wild type under varying salinity regimes. Chl... Transgenic Nipponbare which over-expressed a Na+/H~ antiporter gene OsNHX1 was used to compare its growth performance, water status and photosynthetic efficiency with its wild type under varying salinity regimes. Chlorophyll content, quantum yield and photosynthetic rate were measured to assess the impact of salinity stress on photosynthetic efficiency for transgenic and wild-type Nipponbare. Effects of salinity on water status and gas exchange to both lines were studied by measuring water use efficiency, instantaneous transpiration rate and stomatal conductance. Dry shoot weight and leaf area were determined after three months of growth to assess the impacts of salinity on the growth of those two lines. Our study showed that both lines were affected by salinity stress, however, the transgenic line showed higher photosynthetic efficiency, better utilization of water, and better growth due to low transpiration rate and stomatal conductance. Reduction of photosynthetic efficiency exhibited by the wild-type Nipponbare was correlated to its poor growth under salinity stress. 展开更多
关键词 growth performance salinity stress na/h antiporter gene OsNhX1 transgenic rice photosynthetic efficiency water status
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大叶补血草Na^+/H^+逆向转运蛋白基因(SOS1)的克隆与序列分析 被引量:10
5
作者 周玲玲 祝建波 曹连莆 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1353-1358,共6页
用RT-PCR及RACE方法从盐生植物大叶补血草Limonium gmelinii(Willd.)Kuntze中分离出Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(LgSOS1,GenBank登录号EU780458),LgSOS1的cDNA全长为3910bp,5′非翻译区为79bp,3′非翻译区为376bp,开放阅读框为3455bp... 用RT-PCR及RACE方法从盐生植物大叶补血草Limonium gmelinii(Willd.)Kuntze中分离出Na+/H+逆向转运蛋白基因的cDNA(LgSOS1,GenBank登录号EU780458),LgSOS1的cDNA全长为3910bp,5′非翻译区为79bp,3′非翻译区为376bp,开放阅读框为3455bp,编码1151个氨基酸,推测分子量为126kD。氨基酸同源性分析表明,LgSOS1与冰叶午时花、沙拐枣、番茄、盐芥和拟南芥质膜型Na+/H+逆向转运蛋白的一致性分别为69.02%,64.42%,61.96%,60.12%和59.62%。预测分析表明,LgSOS1有12个跨膜结构区域。系统发育分析表明该蛋白与质膜型的Na+/H+逆向转运蛋白的亲缘关系较近,与液泡型的Na+/H+逆向转运蛋白亲缘关系较远。 展开更多
关键词 大叶补血草 质膜型na+/h+逆向转运蛋白基因(sos1) CDna克隆 序列分析
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獐茅耐盐基因SOS1的克隆及序列分析 被引量:6
6
作者 王鹤 张高华 +3 位作者 王旭达 丰明 李怀梅 李树英 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期28-33,共6页
采用RT-PCR和RLM-RACE方法从单子叶盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆了质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AlSOS1,JN936862),并对其基因序列进行了分析。Southern杂交试验显示:AlSOS1基因在獐茅基因组中以单拷贝形式存在... 采用RT-PCR和RLM-RACE方法从单子叶盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆了质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AlSOS1,JN936862),并对其基因序列进行了分析。Southern杂交试验显示:AlSOS1基因在獐茅基因组中以单拷贝形式存在。AlSOS1基因cDNA全长3 641bp,其中编码区3 420bp,编码一个1 139氨基酸的蛋白。AlSOS1编码蛋白与芦苇、水稻质膜Na+/H+逆向转运蛋白亲缘关系最为接近,达到82%和77%,与双子叶植物拟南芥的亲缘关系仅为58%;系统发育分析显示AlSOS1基因编码蛋白与其他植物质膜型Na+/H+逆向转运蛋白属于同一分支,而与液泡型Na+/H+逆向转运蛋白属于不同的分支;疏水性分析显示AlSOS1基因编码蛋白N-末端具有12个跨膜结构域,C-末端具有一个很长且面向质膜内腔的亲水尾部。这是獐茅SOS1基因编码区首次被完整克隆,将进一步应用于单子叶农作物耐盐性状改良的基因工程之中。 展开更多
关键词 獐茅 耐盐基因 质膜na+/h+逆向转运蛋白基因(sos1) CDna克隆 序列分析
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几种盐生植物与甜生植物NHX1生物信息学分析 被引量:1
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作者 郭晓农 魏芳 +2 位作者 柏家林 马忠仁 王锁民 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期6651-6660,共10页
为了研究盐生植物与甜土植物Na^+/H^+逆向转运蛋白1 (NHX1)在结构及功能方面的差异,本研究采用生物信息学方法预测和分析甜土植物(拟南芥,水稻,小麦)与盐生植物(角果碱蓬,滨藜,盐角草)的Na^+/H^+逆向转运蛋白1 (NHX1)的基本性质、亲疏... 为了研究盐生植物与甜土植物Na^+/H^+逆向转运蛋白1 (NHX1)在结构及功能方面的差异,本研究采用生物信息学方法预测和分析甜土植物(拟南芥,水稻,小麦)与盐生植物(角果碱蓬,滨藜,盐角草)的Na^+/H^+逆向转运蛋白1 (NHX1)的基本性质、亲疏水性、N-糖基化位点、磷酸化位点、跨膜结构及其同源性关系。结果显示,盐生植物与甜土植物NHX1基因基本理化性质基本相同,都是稳定蛋白,氨基酸组成、亲疏水性差异不明显。但是N-糖基化位点、磷酸化位点、跨膜结构、多重序列比对分析存在明显的差异。上述研究结果可以为后续耐盐碱作物的分子植物育种提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 盐生植物 甜土植物 na^+/h^+逆向转运蛋白1(NhX1) 生物信息学分析
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