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利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究 被引量:7
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作者 张玉兰 柯晓静 +4 位作者 郭红敏 谷新晰 田洪涛 郭兴华 罗云波 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期71-76,共6页
为了探明乳酸菌电转化的最适条件,提高电转化效率,本试验以大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,以乳酸乳球菌ML23为受体,利用电转化方法研究了受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电场强度、复苏培养基组成与复苏培养... 为了探明乳酸菌电转化的最适条件,提高电转化效率,本试验以大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,以乳酸乳球菌ML23为受体,利用电转化方法研究了受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电场强度、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响。结果表明:含2%甘氨酸和0.5 mol/L蔗糖的MRS培养基培养至对数生长中期的细胞,在电场强度11.0 kV/cm、电阻200Ω、电容25μF下电击转化,转化后细胞在SMRS培养基中培养2 h,获得了较高的电转化效率。采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率又提高了15倍以上,达1.05×105CFU/μg DNA。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌ML23 组成型表达载体 质粒pmg36e 电转化 电转化效率
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口服含pMG36E-P30重组质粒的乳酸乳球菌对小鼠免疫应答的影响 被引量:3
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作者 张安勇 赵恒梅 杨秋林 《青岛大学医学院学报》 CAS 2007年第3期271-272,共2页
目的用含pMG36E-P30重组质粒的乳酸乳球菌口服免疫小鼠,观察其所诱导的小鼠细胞及体液免疫类型。方法BABL/C小鼠随机分成疫苗免疫组、乳球菌对照组、生理盐水组,每次分别饲喂5×10^9个悬浮在缓冲液中的重组乳酸乳球菌、不含重组质... 目的用含pMG36E-P30重组质粒的乳酸乳球菌口服免疫小鼠,观察其所诱导的小鼠细胞及体液免疫类型。方法BABL/C小鼠随机分成疫苗免疫组、乳球菌对照组、生理盐水组,每次分别饲喂5×10^9个悬浮在缓冲液中的重组乳酸乳球菌、不含重组质粒的乳酸乳球菌及等体积生理盐水。于第27、34及48天从鼠尾静脉取血,分离血清,ELISA法检测免疫球蛋白G(IgG)、γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素4(IL-4)水平。结果疫苗免疫组IgG水平与乳球菌对照组、生理盐水组比较差异有显著性(F=134.97,q=20.33、19.90,P〈0.01)。疫苗免疫组INF-γ、IL-4水平与生理盐水组及乳球菌对照组比较差异均有显著意义(F=79.20、17.05,q=6.18-16.79,P〈0.01)。结论该口服疫苗能引起小鼠特异性的体液免疫反应并能促进细胞免疫应答。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 pmg36E-P30重组质粒 免疫测定 小鼠
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人工感染MDV雏鸡免疫器官中PMG^+浆细胞动态观察
3
作者 程相朝 宋文成 +1 位作者 薄清如 邱震东 《中国畜禽传染病》 CSCD 1994年第5期17-19,共3页
对健康和免疫后攻击京-1株MD强毒鸡中枢免疫器官中PMC+浆细胞的动态变化进行了观察.结果表明,健康攻毒组免疫器官中PMG+浆细胞数在攻毒后3天开始下降.15~20天迅带回升,30天左右达到峰值,以后又迅速下降;免疫... 对健康和免疫后攻击京-1株MD强毒鸡中枢免疫器官中PMC+浆细胞的动态变化进行了观察.结果表明,健康攻毒组免疫器官中PMG+浆细胞数在攻毒后3天开始下降.15~20天迅带回升,30天左右达到峰值,以后又迅速下降;免疫攻毒组,免疫器中中的PMG+浆细胞数在攻毒后20天以前一直处于较高的水平,之后与对照组差异不明显。 展开更多
关键词 雏鸡 MDV 感染 免疫器官 pmg浆细胞
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Remittances,financial development and economic growth in sub-Saharan African countries:evidence from a PMG-ARDL approach 被引量:2
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作者 D.O.Olayungbo Ahmod Quadri 《Financial Innovation》 2019年第1期142-166,共25页
The study investigated the relationship among remittances,financial development and economic growth in a panel of 20 sub-Saharan African countries over the period of 2000 and 2015.The study used both Pooled Mean Group... The study investigated the relationship among remittances,financial development and economic growth in a panel of 20 sub-Saharan African countries over the period of 2000 and 2015.The study used both Pooled Mean Group and Mean Group/ARDL estimations with panel unit root and cointegration tests.After establishing cointegration,remittances and financial development were found to have positive effects on economic growth both in the short and the long run.The interactive term showed that financial development acted as a substitute in the remittances-growth relationship.Finally,unidirectional causal relationships were found to exist from GDP to remittances and from financial development to GDP.However,no causality existed between remittances and financial development in the SSA countries. 展开更多
关键词 Remittances Financial development GROWTH pmg/MG-ARDL Granger causality test African countries
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Construction of a Food-Grade Expression Vector Based on pMG36e by Using an α-Galactosidase Gene as a Selectable Marker 被引量:2
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作者 GU Xin-xi TAN Jian-xin +3 位作者 TIAN Hong-tao ZHANG Yu-lan LUO Yun-bo GUO Xing-hua 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第8期1802-1808,共7页
Construction of a food-grade expression vector for application to lactic acid bacteria(LAB) is of importance for dairy fermentation system. An α-galactosidase(aga) gene encoding an enzyme degrading melibiose was ... Construction of a food-grade expression vector for application to lactic acid bacteria(LAB) is of importance for dairy fermentation system. An α-galactosidase(aga) gene encoding an enzyme degrading melibiose was amplified by PCR from the plasmid p RAF800 of Lactococcus lactis NZ9000. The aga gene was introduced into pMG36 e to substitute the p rimary antibiotic selectable marker of pMG36 e, resulting in construction of a new food-grade expression vector pMG36-aga. To testify the expression efficiency of exogenous gene in pMG36-aga, a 1.5 kb long α-amylase(amy) gene from Ba cillus li cheniformis was cloned by PCR and introduced into the plasmid pMG36-aga. The resultant plasimd pMG36-aga-amy was transformed into L. lactis ML23 by electroporation. The positive clones were selected with the medium containing melibiose as the sole carbon source. Th e selection efficiency of aga was 8.71×103 CFU with a standard deviation of 9.1×102 CFU ?g-1 DNA of pMG36-aga. Furthermore, the SDS-PAGE analysis showed that the pMG36-aga-amy expressed a 56.4 kDa protein which was the same as the putati ve molecular weight of α-amylase. The starch plate assay also indicated that L. lactis ML23 displayed high activity of α-amylase by expressing of amy gene of pMG36-aga-amy. 展开更多
关键词 food-grade expression vector Lactococcus lactis α-galactosidase gene amylase gene pmg36e
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人工感染MDV雏鸡免疫器官中PMG^+浆细胞动态观察
6
作者 程相朝 宋文成 邱震东 《河南科技大学学报(农学版)》 1994年第1期34-36,共3页
本研究对健康和免疫后接种京毒—1号MD强毒鸡中枢免疫器官中PMG^+浆细胞的动态变化进行了观察。结果表明:健康攻毒组免疫器官中的PMG^+浆细胞数在攻毒后3天开始下降,15~20天后迅速回升,30天左右达到峰值,以后又迅速下降;而在免疫攻毒组... 本研究对健康和免疫后接种京毒—1号MD强毒鸡中枢免疫器官中PMG^+浆细胞的动态变化进行了观察。结果表明:健康攻毒组免疫器官中的PMG^+浆细胞数在攻毒后3天开始下降,15~20天后迅速回升,30天左右达到峰值,以后又迅速下降;而在免疫攻毒组,免疫器官中的PMG^+浆细胞数在20天以前一直处于较高的水平,之后和对照组差异不明显。 展开更多
关键词 马立克氏病 免疫器官 pmg^+浆细胞
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PMG公司在中国上海投资1200万欧元建厂
7
作者 《粉末冶金工业》 CAS 北大核心 2009年第1期31-,共1页
关键词 pmg 汽车制造企业 上海 欧元 欧罗 欧洲货币 中华人民共和国 投资 财政管理
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贸易开放一定能使人幸福吗?——基于PMG估计的实证检验
8
作者 晁文琦 《可持续发展》 2022年第1期201-214,共14页
人民幸福是中国梦的最终落脚点,基于各省宏观数据,利用熵值法构建居民幸福指数体系评价标准,运用相关性检验和PMG估计研究贸易开放是否在短期与长期内都能提高城市、农村居民的幸福指数。结果表明:我国各省城市和农村居民幸福指数都与... 人民幸福是中国梦的最终落脚点,基于各省宏观数据,利用熵值法构建居民幸福指数体系评价标准,运用相关性检验和PMG估计研究贸易开放是否在短期与长期内都能提高城市、农村居民的幸福指数。结果表明:我国各省城市和农村居民幸福指数都与贸易开放有强烈相关性,短期内,贸易开放能显著提高居民幸福指数,对城市居民幸福指数的促进作用更强;长期内,贸易开放对居民幸福指数存在抑制作用,且对农村地区削弱作用更强;分区域看贸易开放短期对中西部城市居民幸福指数促进作用强于东部地区,而长期对中西部农村居民幸福指数负向作用较强;此外,居民幸福指数构成的五个维度受贸易开放的短期与长期影响不一致,存在较大差异。 展开更多
关键词 贸易开放度 居民幸福指数 pmg估计
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PMG随身聊天板——IXI Sleep
9
《数码(移动通讯)》 2004年第6期23-23,共1页
关键词 IXI公司 SLEEP pmg随身聊天板 功能
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个人移动网络PMG
10
作者 王永翔 《数码(移动通讯)》 2004年第2期92-93,共2页
现在,互联网已经渗透到了千家万户的每个角落,网络的概念也已经在现代人的思想中根深蒂固,在好莱坞电影中,尤其是带有科幻色彩的大片,导演更是不留余力地把网络带来的快捷和方便展现在观众面前,在这些电影中,太多还流露着导演对... 现在,互联网已经渗透到了千家万户的每个角落,网络的概念也已经在现代人的思想中根深蒂固,在好莱坞电影中,尤其是带有科幻色彩的大片,导演更是不留余力地把网络带来的快捷和方便展现在观众面前,在这些电影中,太多还流露着导演对未来网络的向往,网络随身、随时、随地出现在日常生活中,为人所需、尽人所用。电影之后,你有没有梦想过随身携带着网络四处游走呢?也许,这已不是梦想! 展开更多
关键词 个人移动网络 pmg IXI公司 微型服务器 微型路由器
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PMG系列单相永磁同步发电机问世
11
《军民两用技术与产品》 2003年第1期34-34,共1页
关键词 pmg系列 单相永磁同步发电机 新产品 技术鉴定
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乳酸菌载体pMG36e的应用现状 被引量:11
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作者 丁寅寅 马会勤 +2 位作者 左芳雷 郝彦玲 陈尚武 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期106-111,共6页
乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体,是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子,能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制,乳酸菌基因... 乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体,是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子,能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制,乳酸菌基因工程菌株的改造以及口服疫苗的开发等,应用领域十分广泛,已成为乳酸菌基因工程研究的重要工具质粒之一。现主要从载体构成、基因表达与食品级载体改造等三方面的应用对其进行综述,旨在为该质粒今后研究提供资料。 展开更多
关键词 pmg36e 表达载体 食品级载体 乳酸菌
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利用组成型表达载体pMG36e电转化德式乳杆菌保加利亚亚种的研究 被引量:8
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作者 郭红敏 谷新晰 +3 位作者 张玉兰 田洪涛 郭兴华 罗云波 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期8-16,共9页
以典型的乳酸菌组成型表达质粒pMG36e为载体,德式乳杆菌保加利亚亚种为受体,采用电转化方法研究受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电转化参数、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响... 以典型的乳酸菌组成型表达质粒pMG36e为载体,德式乳杆菌保加利亚亚种为受体,采用电转化方法研究受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电转化参数、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,以提高电转化效率。结果表明:选择含2.5%甘氨酸的SMRS培养基培养受体细胞至对数中期,收获制成感受态细胞,在电场强度12kV/cm、电阻200Ω、电容25μF条件下电击转化,以含20mmol/LMgCl2、CaCl2的SMRS培养基复苏培养2h,涂板筛选得到较高的电转化效率。特别是采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率提高30倍以上,达到6.3×104cfu/μgDNA。本研究结果为进一步构建乳酸菌组成型高效表达系统和食品级基因工程乳酸菌株提供试验依据。 展开更多
关键词 德式乳杆菌保加利亚亚种 组成型表达载体 质粒pmg36e 电转化 电转化效率
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牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0的构建与免疫原性分析 被引量:3
14
作者 蒋禄峰 赵月兰 +6 位作者 李苏楠 吉星煜 张晶 张月 王建永 包永占 秦建华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1743-1747,共5页
利用SacⅠ、HindⅢ限制性内切酶分别对pMG36e与pMD19-T-E0进行双酶切,将目的基因E0整合入穿梭表达载体pMG36e,构建牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0。提取重组质粒pMG36e-E0,进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒pMG36e... 利用SacⅠ、HindⅢ限制性内切酶分别对pMG36e与pMD19-T-E0进行双酶切,将目的基因E0整合入穿梭表达载体pMG36e,构建牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0。提取重组质粒pMG36e-E0,进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒pMG36e-E0转化到大肠杆菌DH5α中进行表达,对表达产物进行SDSPAGE和Western-blotting鉴定。用表达的E0蛋白二次免疫家兔,间接ELISA法检测其血清抗体水平。结果,重组质粒经双酶切得到大小分别约为3 600、691bp的2个片段,PCR扩增出691bp的片段,双酶切与PCR鉴定结果表明目的基因E0正确插入到载体pMG36e中。SDS-PAGE电泳结果表明E0基因在大肠杆菌获得了表达,表达产物相对分子质量大小约为27 000。Western-blotting分析结果证明表达产物能被BVDV阳性血清所识别。ELISA检测结果证明表达的E0融合蛋白能刺激动物产生抗体,具有天然蛋白的免疫原性。 展开更多
关键词 BVDV E0基因 pmg36e载体 大肠杆菌 原核表达 免疫原性
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重组质粒pMG611中K99和F41抗原基因在E.coli中表达条件的研究
15
作者 钟声 李丰生 +3 位作者 芮贤良 吕学诜 王庆元 黄培堂 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1991年第4期282-284,共3页
本文通过 ELISA 方法测定了重组质粒 pMG611在不同宿主和培养条件下,K99和 F41菌毛抗原的表达水平。研究结果表明重组质粒 pMG611在 HB101和 RRI 宿主菌中较在 C600宿主菌中表达更多的 K99和 F41菌毛抗原。实验中还探讨了培养基、温度... 本文通过 ELISA 方法测定了重组质粒 pMG611在不同宿主和培养条件下,K99和 F41菌毛抗原的表达水平。研究结果表明重组质粒 pMG611在 HB101和 RRI 宿主菌中较在 C600宿主菌中表达更多的 K99和 F41菌毛抗原。实验中还探讨了培养基、温度和丙氨酸对两种菌毛抗原表达的影响。 展开更多
关键词 K99菌毛 F41菌毛 重组质粒 pmg611 K99
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牛病毒性腹泻病毒E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5对犊牛的免疫保护作用 被引量:7
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作者 陈颖彬 李林 +6 位作者 夏颖 王紫嫣 刘义磊 蒋禄峰 包永占 秦建华 赵月兰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1080-1084,共5页
将构建的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,观察其对犊牛抗BVDV感染的免疫保护效果。选取1月龄犊牛,随机挑选20头分成4组,每组5只。1~3组为免疫组,分别口服接种1,5,10 mL重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5... 将构建的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,观察其对犊牛抗BVDV感染的免疫保护效果。选取1月龄犊牛,随机挑选20头分成4组,每组5只。1~3组为免疫组,分别口服接种1,5,10 mL重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5(1010 CFU/mL),共免疫3次,每次连续免疫3 d,每次免疫间隔1周;第4组为空白对照组。分别于免疫后0,10,20,30 d检测血清IgG和粪便sIgA的水平和白细胞介素-12(IL-12)表达水平。三免后7 d用BVDV攻毒,5 mL/只(105.5/mL TCID50),观察免疫犊牛对BVDV感染的免疫保护效果。结果显示,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛体内血清IgG抗体和粪便sIgA抗体含量、血清IL-12表达水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且对BVDV感染的保护率明显高于对照组。结果表明,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,可诱生血清IgG和粪便sIgA类抗体,提高机体IL-12表达水平,有效抵抗BVDV的感染。本试验为研制用于预防BVDV感染的嗜酸乳杆菌活载体疫苗提供依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E0基因 嗜酸乳杆菌 pmg36e表达载体 免疫保护
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金融开放对亚洲经济体银行风险承担的影响研究 被引量:1
17
作者 邓鑫 冯育宁 金昭煜 《金融理论与实践》 北大核心 2023年第6期37-50,共14页
亚洲大多数经济体的金融体系一直以银行系统为主导,研究银行业风险对于亚洲经济体金融稳定至关重要。基于此,采用PMG估计法,以1996—2020年43个亚洲经济体为样本,研究金融开放对亚洲整体及其各子区域银行风险承担的长期和短期影响,并加... 亚洲大多数经济体的金融体系一直以银行系统为主导,研究银行业风险对于亚洲经济体金融稳定至关重要。基于此,采用PMG估计法,以1996—2020年43个亚洲经济体为样本,研究金融开放对亚洲整体及其各子区域银行风险承担的长期和短期影响,并加入2项银行业开放特征指标和6项制度因素指标进行异质性分析。研究发现,金融开放对亚洲整体的银行风险承担影响在长期表现为显著降低,短期作用效果并不明显。从分区域的结果来看,各子区域之间存在差异,东亚与东南亚、西亚这两个地区的银行风险承担在长期内有所降低,中亚地区在长期内上升,而南亚地区的作用效果并不显著。作为亚洲地区两个重要的区域经济合作机制,“东盟10+3”与RCEP所涵盖的子样本经济体的结果显示,在长期和短期内,金融开放都降低了银行风险承担。进一步对亚洲整体样本进行异质性分析发现,随着金融开放度的提升,政府效率的上升可能会降低银行风险承担,提升银行稳定性,而外资银行占比的提升会增加银行风险承担。研究结论对于我国推进高水平对外开放、亚洲经济体加强区域内政策协调并维护金融体系的稳定具有一定的启示意义。 展开更多
关键词 金融开放 银行风险承担 亚洲区域 pmg估计法 异质性分析
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电转化方法将外源性质粒导入干酪乳杆菌的研究 被引量:17
18
作者 格日勒图 王艳霞 +2 位作者 包秋华 代兄 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第2期9-13,共5页
以pMG36e,pMG36c和已消除内源性质粒的干酪乳杆菌(L.casei Zhang)为材料,在不同参数下进行电转化实验并建立最佳实验条件。结果表明:最佳电转化电压为1.5 kV,时间为2.0 ms。pMG36c转化不同对数生长期L.casei Zhang时,发现转化对数生长... 以pMG36e,pMG36c和已消除内源性质粒的干酪乳杆菌(L.casei Zhang)为材料,在不同参数下进行电转化实验并建立最佳实验条件。结果表明:最佳电转化电压为1.5 kV,时间为2.0 ms。pMG36c转化不同对数生长期L.casei Zhang时,发现转化对数生长中期菌体获得的转化子数最高,而转化效率不是最高;转化生长初期获得的转化子数为4.04×106 mL-1,电转化效率为89.78%;后期则为1.6×107 mL-1和4.0%。磷酸钠作电击缓冲液获得的转化子数高于体积分数为10%甘油获得的转化子数。复苏培养基甘氨酸质量分数为0.5%时得到的转化子数最高,转化效率为35.56%;当甘氨酸质量分数增加到1%时得到的转化子数和转化效率分别下降到5.6×106 mL-1和6.22%,甘氨酸质量分数为2%时得到的转化子数和转化效率更低;不同质粒转化L.casei Zhang时,pMG36c转化获得的转化子数高于pMG36e转化子数。选择pMG36e转化L.casei Zhang的转化子为模板,通过PCR反应已证实转化试验的可靠性。本研究为外源基因电转化干酪乳酸菌提供了可靠的参考依据。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 电转化 外源性质粒 pmg36e(表达载体 红霉素抗性) pmg36c(克隆载体 氯霉素抗性)
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航空永磁同步发电机系统改进型电压反馈弱磁控制策略研究
19
作者 黄健 王晨 +1 位作者 江明 张卓然 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2023年第7期2521-2531,共11页
针对航空永磁同步发电机系统,提出一种改进型电压反馈弱磁控制策略。首先,分析基于电压反馈弱磁控制的回路设计方法以及稳定性问题。其次,提出改进型电压反馈弱磁控制方法,并进行系统稳定性分析。在该方法中,转矩电流的动态限幅值是基... 针对航空永磁同步发电机系统,提出一种改进型电压反馈弱磁控制策略。首先,分析基于电压反馈弱磁控制的回路设计方法以及稳定性问题。其次,提出改进型电压反馈弱磁控制方法,并进行系统稳定性分析。在该方法中,转矩电流的动态限幅值是基于弱磁区域所需的发电功率,而不是电流极限圆。同时,根据转矩电流限幅值的获取方式,将改进型电压反馈弱磁控制分为查表法和解析法。当定子铁心不饱和时,永磁发电机电磁转矩和转矩电流之间是线性关系,这两种形式的控制效果相同,但解析法具有计算简单、程序移植性强的优点。当定子铁心饱和时,永磁发电机电磁转矩和转矩电流之间的关系是非线性的,此时查找表法能够提升直流母线电压的稳态控制精度。最后,通过实验结果验证了所提弱磁控制方法的有效性。 展开更多
关键词 解析法 弱磁 查找表法 永磁同步发电机 电压反馈
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基于原生质体法保加利亚乳杆菌电转化条件的研究 被引量:4
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作者 郭鑫 王莎莎 +3 位作者 李晨 卢海强 田洪涛 罗云波 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期160-166,共7页
目的:研究不同因素对保加利亚乳杆菌原生质体法电转化效率的影响,通过研究电转化的最适条件,以提高电转化的效率。方法:以保加利亚乳杆菌为受体菌株,大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,通过原生质体电转化的方法研究溶菌酶浓度、... 目的:研究不同因素对保加利亚乳杆菌原生质体法电转化效率的影响,通过研究电转化的最适条件,以提高电转化的效率。方法:以保加利亚乳杆菌为受体菌株,大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,通过原生质体电转化的方法研究溶菌酶浓度、质粒浓度、电转化参数、复苏培养基组成对电转化效率的影响。结果:用SMM在37℃下制备溶菌酶(30 mg/mL)对细胞进行酶解,直至通过显微镜发现约60%的原生质体形成。用1μL质量浓度为1.2μg/μL的质粒pMG36e,在电场强度7.5 kV/cm,电阻200Ω,电容25μF的条件进行电击转化,以含有0.5 mol/L蔗糖和20 mmol/L的MgCl_2、CaCl_2且无吐温80的MRS再生培养基复苏培养2.5 h,并以含红霉素的MRS平板筛选,获得1.42×10~5CFU/μgDNA的电转化效率。结论:本研究实现了保加利亚乳杆菌的高效遗传转化,并为遗传育种提供了技术支持。 展开更多
关键词 保加利亚乳杆菌 质粒pmg36e 电转化 电转化效率
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