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马尾松PmPIN1基因的克隆及功能分析
被引量:
2
1
作者
武星
胡兴峰
+3 位作者
陈佩珍
孙晓波
吴帆
季孔庶
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期184-192,共9页
【目的】PIN1基因通过调控生长素极性运输的方式在植物根系生长发育中发挥作用。对马尾松PmPIN1基因进行全长克隆和功能分析,有助于在分子水平揭示马尾松的生根机制。【方法】运用PCR和RACE技术成功克隆马尾松PmPIN1基因cDNA序列;利用...
【目的】PIN1基因通过调控生长素极性运输的方式在植物根系生长发育中发挥作用。对马尾松PmPIN1基因进行全长克隆和功能分析,有助于在分子水平揭示马尾松的生根机制。【方法】运用PCR和RACE技术成功克隆马尾松PmPIN1基因cDNA序列;利用生物信息学软件分析PmPIN1基因的核苷酸序列及其编码蛋白的氨基酸序列,并构建系统进化树;通过实时荧光定量分析PmPIN1基因在10年生马尾松幼根、1年生枝条、新叶、花中的表达量差异;利用农杆菌侵染法将PmPIN1基因转入烟草获得转基因植株,比较转基因烟草与转pCAMBIA-1302空白载体烟草之间的表型差异;用激光共聚焦显微镜观察PmPIN1-GFP荧光蛋白在转基因烟草根中的表达模式;酶联免疫法测定野生型和转基因烟草的根、根茎结合处及叶中的生长素含量;用不同浓度的生长素极性运输抑制剂1-N-萘基邻氨甲酰苯甲酸(NPA)处理野生型与转基因烟草,分析烟草根、根茎结合处、叶中的生长素含量变化;利用PEG介导法将16318-hGFP-PmPIN1重组载体转化至拟南芥原生质体中进行亚细胞定位分析。【结果】PmPIN1基因全长2914 bp,包含2085 bp的ORF,编码的蛋白由695个氨基酸组成,N端与C端均有膜运输蛋白。系统进化树显示马尾松与油松在发育树同一支上。通过实时荧光定量发现PmPIN1在不同组织中的表达量差异达到极显著,1年生枝条与幼根中表达量较高,花中最低。农杆菌介导法转化烟草获得的转基因烟草,较转空载烟草株高增长,生根量增加且根系变长。激光共聚焦显微镜观察得出转基因烟草根部中间有明显绿色荧光富集现象。酶联免疫法测定结果表明转基因烟草根、根茎结合处生长素含量高于野生型,且叶较根和根茎结合处减少。不同浓度NPA处理后,野生型烟草根中生长素含量变化达极显著,且生长素含量随NPA处理浓度的增加而减少;处理浓度为10 nmol·L^-1时,叶中生长素含量最高;处理浓度为2 nmol·L^-1时,根茎结合处生长素含量增加较多。不同浓度NPA处理后,转基因烟草不同部位生长素含量变化均未达到极显著。亚细胞定位分析表明PmPIN1蛋白主要分布于细胞膜上。【结论】马尾松PmPIN1与油松PIN1亲缘关系最近。PmPIN1属于膜蛋白。PmPIN1转基因烟草可能提高生长素由地上部位向地下部位的运输能力,减少NPA对生长素含量变化的影响,表明PmPIN1可能调控生长素的极性运输;PmPIN1-GFP绿色荧光富集在根部中间部位,PmPIN1在幼根中表达量较高,转基因烟草较转空载植株发根量多,根长长。研究结果表明PmPIN1基因可能在根系发育中发挥重要作用。
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关键词
马尾松
pmpin
1基因
转基因
功能分析
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职称材料
马尾松PmPIN2基因的克隆及实时定量分析
被引量:
2
2
作者
武星
季子钧
+4 位作者
吴晓刚
陈佩珍
吴帆
孙晓波
季孔庶
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第15期4880-4889,共10页
PIN2基因在植物生根机理中起关键作用,对马尾松PIN2基因进行研究,可为解决马尾松无性系生根困难、促根壮苗培育提供帮助。本研究以马尾松幼苗全株为试材,利用PCR技术和RACE技术克隆了马尾松PIN2基因全长,并通过相关软件和实时荧光定量...
PIN2基因在植物生根机理中起关键作用,对马尾松PIN2基因进行研究,可为解决马尾松无性系生根困难、促根壮苗培育提供帮助。本研究以马尾松幼苗全株为试材,利用PCR技术和RACE技术克隆了马尾松PIN2基因全长,并通过相关软件和实时荧光定量进行生物信息学和组织特异性分析。结果发现PIN2基因全长3 706 bp,包括2 103 bp完整ORF序列,编码700个氨基酸。生物信息学分析表明,PIN2蛋白为疏水性蛋白,相对分子量76.43 k D,等电点(p I)为9.06,总亲水性平均数0.023,PmPIN2编码的蛋白与PIN家族具有同样典型结构域。实时荧光定量分析结果显示,PmPIN2基因在马尾松根、茎、叶、花中均有表达,其中根中的表达量最高,花中最低。PIN2基因是参与植物生根过程的重要基因,对马尾松PmPIN2基因的研究为PIN基因家族在生根机制方面的作用探究提供帮助。
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关键词
马尾松
pmpin
2基因
实时荧光定量分析
原文传递
菲律宾化学品管理现状概述
被引量:
1
3
作者
祝惠惠
王红松
+2 位作者
胡海波
华雯
戎霄
《广东化工》
CAS
2021年第20期112-114,共3页
菲律宾是东南亚国家中化学品管理体系相对完善的国家,作为“一带一路”在东南亚国家中的重要合作伙伴,了解菲律宾化学品管理要求有利于促进中菲化学品贸易的开展。本文系统概述了菲律宾化学品的管理现状,分别介绍了现有化学物质和新化...
菲律宾是东南亚国家中化学品管理体系相对完善的国家,作为“一带一路”在东南亚国家中的重要合作伙伴,了解菲律宾化学品管理要求有利于促进中菲化学品贸易的开展。本文系统概述了菲律宾化学品的管理现状,分别介绍了现有化学物质和新化学物质的合规要点,以及菲律宾GHS制度的实施情况,可指导生产或贸易企业在化学品进入菲律宾之前做好合规准备,顺利出口。
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关键词
菲律宾
化学品
新化学物质
PICCS
pmpin
GHS
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职称材料
题名
马尾松PmPIN1基因的克隆及功能分析
被引量:
2
1
作者
武星
胡兴峰
陈佩珍
孙晓波
吴帆
季孔庶
机构
南京林业大学
出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期184-192,共9页
基金
“十三五”国家重点研发计划项目课题(2017YFD0600304)
江苏高校优势学科建设工程(PAPD)项目。
文摘
【目的】PIN1基因通过调控生长素极性运输的方式在植物根系生长发育中发挥作用。对马尾松PmPIN1基因进行全长克隆和功能分析,有助于在分子水平揭示马尾松的生根机制。【方法】运用PCR和RACE技术成功克隆马尾松PmPIN1基因cDNA序列;利用生物信息学软件分析PmPIN1基因的核苷酸序列及其编码蛋白的氨基酸序列,并构建系统进化树;通过实时荧光定量分析PmPIN1基因在10年生马尾松幼根、1年生枝条、新叶、花中的表达量差异;利用农杆菌侵染法将PmPIN1基因转入烟草获得转基因植株,比较转基因烟草与转pCAMBIA-1302空白载体烟草之间的表型差异;用激光共聚焦显微镜观察PmPIN1-GFP荧光蛋白在转基因烟草根中的表达模式;酶联免疫法测定野生型和转基因烟草的根、根茎结合处及叶中的生长素含量;用不同浓度的生长素极性运输抑制剂1-N-萘基邻氨甲酰苯甲酸(NPA)处理野生型与转基因烟草,分析烟草根、根茎结合处、叶中的生长素含量变化;利用PEG介导法将16318-hGFP-PmPIN1重组载体转化至拟南芥原生质体中进行亚细胞定位分析。【结果】PmPIN1基因全长2914 bp,包含2085 bp的ORF,编码的蛋白由695个氨基酸组成,N端与C端均有膜运输蛋白。系统进化树显示马尾松与油松在发育树同一支上。通过实时荧光定量发现PmPIN1在不同组织中的表达量差异达到极显著,1年生枝条与幼根中表达量较高,花中最低。农杆菌介导法转化烟草获得的转基因烟草,较转空载烟草株高增长,生根量增加且根系变长。激光共聚焦显微镜观察得出转基因烟草根部中间有明显绿色荧光富集现象。酶联免疫法测定结果表明转基因烟草根、根茎结合处生长素含量高于野生型,且叶较根和根茎结合处减少。不同浓度NPA处理后,野生型烟草根中生长素含量变化达极显著,且生长素含量随NPA处理浓度的增加而减少;处理浓度为10 nmol·L^-1时,叶中生长素含量最高;处理浓度为2 nmol·L^-1时,根茎结合处生长素含量增加较多。不同浓度NPA处理后,转基因烟草不同部位生长素含量变化均未达到极显著。亚细胞定位分析表明PmPIN1蛋白主要分布于细胞膜上。【结论】马尾松PmPIN1与油松PIN1亲缘关系最近。PmPIN1属于膜蛋白。PmPIN1转基因烟草可能提高生长素由地上部位向地下部位的运输能力,减少NPA对生长素含量变化的影响,表明PmPIN1可能调控生长素的极性运输;PmPIN1-GFP绿色荧光富集在根部中间部位,PmPIN1在幼根中表达量较高,转基因烟草较转空载植株发根量多,根长长。研究结果表明PmPIN1基因可能在根系发育中发挥重要作用。
关键词
马尾松
pmpin
1基因
转基因
功能分析
Keywords
Pinus massoniana
pmpin
1 gene
transgenic
functional analysis
分类号
S718.46 [农业科学—林学]
下载PDF
职称材料
题名
马尾松PmPIN2基因的克隆及实时定量分析
被引量:
2
2
作者
武星
季子钧
吴晓刚
陈佩珍
吴帆
孙晓波
季孔庶
机构
南京林业大学南方现代林业协同创新中心、林木遗传与生物技术省部共建教育部重点试验室
安徽农业大学
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第15期4880-4889,共10页
基金
“十三五”国家重点研发计划项目课题(2017YFD0600304)、江苏高校优势学科建设工程(PAPD)和南方现代林业协同创新项目共同资助
文摘
PIN2基因在植物生根机理中起关键作用,对马尾松PIN2基因进行研究,可为解决马尾松无性系生根困难、促根壮苗培育提供帮助。本研究以马尾松幼苗全株为试材,利用PCR技术和RACE技术克隆了马尾松PIN2基因全长,并通过相关软件和实时荧光定量进行生物信息学和组织特异性分析。结果发现PIN2基因全长3 706 bp,包括2 103 bp完整ORF序列,编码700个氨基酸。生物信息学分析表明,PIN2蛋白为疏水性蛋白,相对分子量76.43 k D,等电点(p I)为9.06,总亲水性平均数0.023,PmPIN2编码的蛋白与PIN家族具有同样典型结构域。实时荧光定量分析结果显示,PmPIN2基因在马尾松根、茎、叶、花中均有表达,其中根中的表达量最高,花中最低。PIN2基因是参与植物生根过程的重要基因,对马尾松PmPIN2基因的研究为PIN基因家族在生根机制方面的作用探究提供帮助。
关键词
马尾松
pmpin
2基因
实时荧光定量分析
Keywords
Pinus massiniana
pmpin
2 gene
Real-time quantitative fluorescence analysis
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
原文传递
题名
菲律宾化学品管理现状概述
被引量:
1
3
作者
祝惠惠
王红松
胡海波
华雯
戎霄
机构
常州工业及消费品检验有限公司
常州海关
出处
《广东化工》
CAS
2021年第20期112-114,共3页
基金
2021KJ02化学品危害性分类与信息传递和危险货物安全法规研究。
文摘
菲律宾是东南亚国家中化学品管理体系相对完善的国家,作为“一带一路”在东南亚国家中的重要合作伙伴,了解菲律宾化学品管理要求有利于促进中菲化学品贸易的开展。本文系统概述了菲律宾化学品的管理现状,分别介绍了现有化学物质和新化学物质的合规要点,以及菲律宾GHS制度的实施情况,可指导生产或贸易企业在化学品进入菲律宾之前做好合规准备,顺利出口。
关键词
菲律宾
化学品
新化学物质
PICCS
pmpin
GHS
Keywords
the philippines
chemical
new chemical
PICCS
pmpin
GHS
分类号
TQ [化学工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马尾松PmPIN1基因的克隆及功能分析
武星
胡兴峰
陈佩珍
孙晓波
吴帆
季孔庶
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
下载PDF
职称材料
2
马尾松PmPIN2基因的克隆及实时定量分析
武星
季子钧
吴晓刚
陈佩珍
吴帆
孙晓波
季孔庶
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
原文传递
3
菲律宾化学品管理现状概述
祝惠惠
王红松
胡海波
华雯
戎霄
《广东化工》
CAS
2021
1
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