水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达

【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利用大肠杆菌系统表达Pns10蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;通过水稻原生质体病毒侵染体系,利用免疫荧光技术分析Pns10蛋白在水稻原生质体内的分布情况,利用实时定量PCR技术和Western blot技术分别检测Pns10 RNA和Pns10蛋白在水稻原生质体内的积累情况。【结果】将Pns10基因克隆到Gateway系统原核表达载体p DEST17中,IPTG诱导表达成功后,制备融合蛋白抗血清。Western blot检测显示,该抗血清可检测感病水稻叶片中的Pns10蛋白。病毒侵染水稻原生质体后,Pns10蛋白可形成类似病毒原质的内含体;Pns10 RNA在病毒接种8 h后开始积累,24 h后达到最大值,随后开始下降;Pns10蛋白在24 h后开始表达,之后维持较高水平,60 h后略有下降。【结论】成功获得了Pns10抗血清;Pns10在水稻原生质体内成功表达,可形成类似病毒原质的内含体,并且Pns10 RNA的表达先于其蛋白的表达。

PNS外周血单核细胞趋化因子与RANTES mRNA的表达及意义

目的 探讨原发性肾病综合征 (PNS)患者外周血单核细胞趋化因子 (MCP- 1)与受激活调节的正常T细胞表达和分泌因子 (RANTES) m RNA的表达及临床价值。方法 PNS患者 5 4例 ,分别于治疗前及治疗后 3个月采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)方法检测外周血 MCP- 1及 RANTES m RNA的表达水平。结果 PNS患者外周血 MCP- 1、RANTES m RNA的表达显著高于正常对照组 ,治疗后显著降低 ;其中膜性肾病患者表达水平较低 ,系膜毛细血管性肾炎患者表达水平较高 ;伴有肾小管间质损害者表达水平显著高于无肾小管间质病变者 ,治疗后未完全缓解者显著高于完全缓解署。MCP- 1、RANTESm RNA表达水平与血肌酐水平呈显著正相关 ,与 2 4小时尿蛋白定量、血清白蛋白水平无显著相关性。结论 PNS患者外周血 MCP- 1、RANTES m RNA表达水平与病理类型、肾小管间质损害、血清肌酐水平及疗效有一定关联 ,对其检测有助于 PNS病情及预后的评估。

水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达

【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生质体中的积累量。【结果】病毒接种水稻原生质体48h后,Pns6蛋白在细胞质中可以形成类似于病毒原质(viroplasm)的点状内含体,P8蛋白也大量的表达。同时,病毒粒体在水稻原生质体中也形成内含体状的结构。病毒接种水稻原生质体12 h后,均可检测到Pns6和P8蛋白的表达,并且在36 h后达到最高值。病毒接种水稻原生质体后,Pns6 RNA在24 h时表达量达到最高,P8 RNA在36 h时表达量达到最高。【结论】RDV侵染水稻原生质体后,Pns6和P8蛋白均有表达,并且病毒也可能通过形成病毒原质来完成病毒在寄主细胞的复制和装配。

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白的原核表达、抗血清制备及初步应用

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白由基因组片段S10编码。从RRSV福建沙县分离物(RRSV-F)中获取该病毒的全基因组,根据RRSV泰国分离物核苷酸序列设计特异性引物获得S10编码区,利用Directional TOPO克隆技术,将S10连接至克隆表达载体pET100/D-TOPO构建重组质粒,并进行了序列测定和分析。重组质粒经IPTG诱导在BL21star(DE3)E.coli中高效表达约35 kD Pns10蛋白。将Pns10蛋白免疫新西兰大白兔制备了特异性的抗血清,间接ELISA法测定抗血清效价为1∶7 680,Western blot分析表明抗血清特异性强。表达产物及抗血清在Pns10蛋白的结构和功能研究中具有重要的应用价值,制备的抗血清可用于水稻病株和传播介体的检测以及病毒病的诊断。

水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6在病毒复制中的功能

水稻矮缩病毒(rice dwarf virus,RDV)主要由黑尾叶蝉以持久增殖型方式传播。RDV编码的3个非结构蛋白Pns6、Pns11和Pns12是病毒在介体细胞内侵染过程中形成提供病毒复制和子代病毒粒体装配的唯一场所——病毒原质(viroplasm)的主要成分。利用黑尾叶蝉培养细胞和RNA干扰(RNA interference,RNAi)体系,研究Pns6在病毒侵染介体昆虫过程中的功能。结果显示,将体外合成靶向Pns6基因的dsRNA转染黑尾叶蝉培养细胞后,Pns6合成显著降低,viroplasm的形成和病毒的侵染也受到抑制。用显微注射技术导入到黑尾叶蝉的靶向Pns6基因的dsRNA,同样抑制viroplasm的形成和病毒的侵染,最终阻碍病毒在介体体内的有效扩散。这些研究明确了Pns6在病毒侵染黑尾叶蝉过程中的功能,Pns6是RDV的复制关键因子。

基于PNS系统的计算机实验室管理应用研究——以重庆文理学院为例

为全面落实科教兴国战略和人才强国战略,重庆文理学院积极开展"数字化校园"建设,计算机实验室的信息化管理被列为重点建设项目之一.本文对实验室目前存在的问题进行探讨,分析PNS系统的基本技术原理以及在实验室管理中的应用效果,使之能够更科学、高效地发挥计算机实验室在服务于教学、科研中的作用.

针对诱骗态量子密钥分发方案的PNS攻击研究

量子保密通信技术的飞速发展,展现了量子密码在通信领域巨大的应用潜力.量子密码利用量子的物理属性来保证通信的无条件安全,然而在实际通信系统中,光源等设备的不完美性给通信系统带来了安全隐患.针对使用非理想光源的量子密钥分发系统,采用分束攻击可以获得通信密钥而不被发现.本文首先介绍分束攻击的发展现状和基本原理,然后对一种分束攻击改进方案的关键技术进行了研究.基于对该方案的分析,对传统的分束攻击进行进一步改进,提出一种新的分束攻击方案。新方案针对非相位随机化光源,根据不同光脉冲强度,设计了一种计算分数器效率的方法,该方法使得窃听者能够合理控制接收端计数率保持不变;同时,为了使得新方案更加实用化,将光脉冲强度分为不同的安全区间,针对每一个安全区间求出一个分数器效率使其保持接收端计数率波动在可接受范围内,从而提高了攻击效率和攻击能力.最后应用MATLAB拟合出分数器效率与光强之间的函数关系,并且通过数值模拟以及数次优化证明了方案的安全性和可行性.

抛物化Navier-Stokes方程(PNS)和高氏PNS理论及其应用的评述（英文）

抛物化NS方程得到广泛应用,已经成为工业标准气动计算的基础。现有的八种抛物化NS方程有不同的名称,方程中粘性项的形式略有不同,其中的PNS和薄层(TL)NS方程应用最多。但是这些方程都具有类似的数学性质,例如,当流向方向上马赫数大于1时,他们都是抛物型方程,可以采用空间推进算法(SMA)进行求解。与采用时间推进算法求解的NS方程或雷诺平均(RA)NS方程相比,PNS-SMA计算降低了空间的维数,节省了大量的存储空间和CPU计算时间。PNS-SMA算法也获得了巨大的进展。但是,早期PNS研究在理论上是相当模糊的,高智在1990年提出的粘性/无粘干扰剪切流理论(ISF)弥补了这一不足。ISF理论概括了PNS方程所能描述的基本流动,提出了其流动的运动规律及数学定义式,所导出的ISF方程组也属于PNS方程的一种。为了不增加新的名称,我们将ISF方程组也称为高氏PNS理论和方程组。这一理论在NS方程和RANS方程的计算中均有重要的应用。例如,计算最优坐标系的选择以减少伪扩散,网格尺度选择及局部网格加密设计以捕捉高超声速流动中物体表面热流等的急剧变化,壁面压力边界条件的选择以及由高PNS导出的壁面判据来进行NS和RANS近壁数值解可信度评估。本文评述了一些初步的应用,进一步的应用和综合PNS-SMA,RANS-SMA以及PSE-SMA计算值得深入研究,这里PSE指抛物化稳定性方程。

基于PNS的高职院校机房信息化管理的研究

随着计算机在高校辅助教学普及,机房管理的责任和工作也越来越大,分析了目前现有的机房管理方案存在的问题,提出了一种基于软件虚拟化的管理方案,该方案中客户机利用网络引导启动,根本上能解决系统本地引导启动的网络同传、还原失效、多系统共存等问题,节省人力资源,简化了故障计算机的修复工作,同时也提供机房预约、信息管理等辅助功能,满足个性化定制的需求。

基于PNS系统提升高校图书馆公共机房管理效率

通过基于PNS系统的机房改造实例,分析其应用效果,以探索一种建设高效图书馆公共机房的方法。

PNS虚拟桌面系统在机房管理中的应用

高校实验室机房建设是校园信息化建设的重要组成部分，该文对比传统的还原卡管理模式，介绍了PNS（Pre-Envi-ronment Network System）虚拟桌面系统在机房管理中的应用，并结合实际工作，对PNS管理系统的使用做了总结。

Phantosys与PNS系统在高校图书馆的应用比较——以金陵科技学院图书馆为例

以金陵科技学院图书馆机房建设为背景,根据机房需求和现有的各种维护问题,对Phantosys与PNS系统的应用效果进行对比。

浅谈运用pns改进机房管理与维护

近十几年,随着计算机信息技术的应用在社会中应用越来越广泛。学生对计算机的学习的需求,也越来越迫切。作为高校计算机教学的主要场所机房自然承担的任务,自然也越来越繁重。而传统的机房管理模式,已经很难满足机房管理的需求。为了顺利完成教学任务,满足师生的上机需求。这就需要我们去改变传统的机房管理模式,提高机房的管理效率。

一种防治椎板切除术后粘连的PNS脂质体的研究

目的 :研究制备一种防治椎板切除术后粘连的三七总皂苷 (PNS)脂质体。方法 :采用薄膜分散法制备PNS脂质体 ,用均匀设计法对PNS脂质体的制备进行多因素多水平考察。并用光镜和电镜观察PNS脂质体的外观形态并测定其粒径大小。采用高效液相色谱法测定PNS脂质体的包封率。用粒径在 5 μm及 5 μm以下PNS脂质体所占百分比、个数和脂质体的包封率进行综合评分。结果 :PNS脂质体在光镜下为球状 ,粒径在 5 μm及 5 μm以下的PNS脂质体平均占 69. 2 0 4% ,Rg1的平均包封率为 71 . 5 1 % ,Rb1的平均包封率为 80 . 2 9%。结论 :采用优选的薄膜分散法工艺可制备包封率较高粒径在 5 μm左右的球状脂质体。

水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns11的核酸结合活性分析

水稻矮缩病毒的非结构蛋白Pns11是一个序列非特异性的核酸结合蛋白 ,其N端有类似锌指蛋白的结构 ,C端富含碱性氨基酸。为了研究Pns11的核酸结合活性 ,构建了两个位于可能的锌指结构内的点突变以及四个分别删除部分碱性区氨基酸片段的缺失突变。经测序验证后分别克隆到大肠杆菌表达载体 pBV2 2 1中 ,温度诱导表达。用提取包涵体的方法初步纯化突变体蛋白 ,Western印迹检测这些突变体和Pns11的抗体均有特异反应。以Southwestern和Northwestern印迹的方法证明六个突变体都保持了核酸结合活性。结果表明N端的类似锌指蛋白的结构不是结合核酸的活性位点 ,部分缺失C端的碱性氨基酸也不影响其结合。

水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6和外壳蛋白P8多克隆抗体的制备及其应用

利用RT-PCR的方法从感染水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)的水稻中克隆该病毒的运动蛋白基因S6和外壳蛋白基因S8,通过Gateway系统进行原核表达,获得表达载体p DEST17-Pns6和p DEST17-P8,将表达载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达后获得分子质量约为59和46 ku含HIS标签的融合蛋白.以诱导表达的目的蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果表明,Western blot检测制备的Pns6和P8抗体可特异性检测RDV,间接ELISA测定Pns6和P8抗体的效价均约为6 400倍,并建立了可靠、灵敏、特异的Dot-blot ELISA方法检测RDV.以上研究表明,RDV运动蛋白和外壳蛋白抗体均可应用于该病毒在田间的大规模调查和检测.

基于家庭为中心的护理模式对PNS患儿的治疗效果及生活质量的影响分析

目的:探讨基于家庭为中心的护理模式应用于PNS患儿的治疗效果及对其生活质量的影响。方法:选择2018年3月至2019年3月进入本院治疗的90例PNS患儿为研究对象,将住院号为单数的患儿设为对照组,住院号为双号的患儿设为观察组,分别给予不同护理措施。对照组配合治疗提供基础护理,观察组基于家庭为中心的护理模式提供各项护理,两组对比指标:细胞指标、生活质量以及护理的满意率。结果:治疗前两组IL-21、IFN-γ指标无显著差异(P>0.05);治疗后,观察组IL-21、IFN-γ指标显著低于对照组(P<0.05),观察组护理后生活质量指标显著提升(P<0.05)。结论:PNS患儿在治疗的过程中配合家庭为中心的护理模式,细胞因子得到显著改善,患者的生活质量提升显著,家属对于护理的满意率认可度高。

PNS患者的肌电图表现及其诊断价值研究

目的:分析神经系统副肿瘤综合征(PNS)患者肌电图特征及其临床诊断价值。方法:选取42例PNS患者作为PNS患病组,年龄和性别基本匹配的健康对象42例作为正常对照组,对两组进行神经肌电图检测,分析两组感觉神经、运动神经肌电图特征。结果:与正常对照组比较,PNSPNS患病组病例组患者的正中神经、尺神经、胫神经、腓总神经运动末端潜伏期较正常对照组均延长(P<0.05);运动传导速度减小(P<0.05);正中神经、尺神经、胫神经运动波幅较正常对照组减小(P<0.05);正中神经、尺神经、胫神经、腓浅神经的神经感觉传导速度、波幅均减低(P<0.05);正中神经、胫神经的F波潜伏期延长(P<0.05);F波检出率减少(P<0.05);胫神经的H反射潜伏期延长(P<0.05)。结论:PNS患者肌电图存在运动及感觉神经传导速度、波幅减低,潜伏期延长的特征,F波检出率降低,早期对患者进行肌电图检测将有助于临床诊断。

PNS在机房管理中的运用

随着互联网的迅速发展,越来越多的软件给人们带来了工作和生活的便利,对于如何提高高校机房管理的效率,简化实验室管理员的工作,也是现在面临的问题之一。通过利用PNS这款软件控制服务器,从而大大提高了机房的管理效率。

PNS云桌面在高职院校中的实践与应用研究

PNS高性能桌面云是基于最新自主创新的PNS Virtuo TM虚拟化和微虚拟化技术发展的私有云架构下高性能云桌面系统。PNS云桌面适用于需要集中管控桌面的应用场合,特别是有桌面高性能计算和图形计算要求以及桌面信息安全要求的应用,如设计与研发、生产线管控、办公、教学和科学研究等,其在企业、政府、军队国防、航空航天、教育科研、公安和特殊安全等行业得到广泛使用。与传统云桌面产品相比,除具有云桌面计算和管理模式的通用优点外,PNS云桌面还具有云承载能力强、网络资源占用低、客户桌面性能优异和总成本较低的突出特点,应用优势非常显著。文章分析了PNS云桌面部署过程中出现的问题并给出了解决方案。