假基因POU5F1B对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨POU结构域5类转录因子1B基因(POU5F1B)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法采用定时荧光定量PCR(QPCR)检测正常宫颈上皮End1/e6e7细胞株和宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa和C33A)中POU5F1B的表达水平,选取POU5F1B表达量最高的细胞株分别转染POU5F1B特异性小干扰RNA(si-POU5F1B组)和阴性对照序列(si-NC组)。分别采用CCK-8实验、平板克隆形成实验和EdU实验观察细胞增殖情况,细胞划痕实验和侵袭实验观察两组细胞的迁移和侵袭情况,Western blotting实验检测OCT4蛋白的相对表达量,通过动物实验观察下调假基因POU5F1B对裸鼠体内移植瘤质量的影响。结果与End1/e6e7细胞株比较,假基因POU5F1B在宫颈癌SiHa、C33A、HeLa细胞株中的相对表达量分别为3.34±0.23、2.03±0.15和1.13±0.06,选取POU5F1B表达量最高的SiHa细胞进行后续实验。si-POU5F1B组假基因POU5F1B的相对表达量为0.2±0.012,明显低于si-NC组(P<0.01)。CCK-8实验显示,与si-NC组相比,si-POU5F1B组吸光值明显降低(P<0.05);平板克隆形成实验显示,si-POU5F1B组的克隆形成数为(173±15.27)个,低于si-NC组的(318±8.41)个(P<0.01)。EdU检测显示,si-POU5F1B组阳性细胞比例为(18±1.36)%,低于si-NC组的(34±2.63)%(P<0.01)。划痕实验显示,48 h后si-POU5F1B组的划痕愈合率为(45.60±2.27)%,低于si-NC组的(87.15±3.32)%(P<0.01);侵袭实验显示,si-POU5F1B组穿过侵袭下室的细胞数为(303±10.29)个,低于si-NC组的(933±11.88)个(P<0.01);Western blotting检测显示,下调POU5F1B表达后,其亲本基因OCT4的表达水平下降(P<0.05);在动物实验中,si-POU5F1B组裸鼠移植瘤质量为(203.50±54.83)mg,低于si-NC组的(578.06±84.66)mg(P<0.01)。结论下调假基因POU5F1B可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并抑制体内宫颈癌细胞生长,其机制可能与下调其功能基因OCT4的表达有关。

OCT4及其假基因POU5F1B在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义

目的分析八聚体结合转录因子4(OCT4)及其假基因POU结构域5类转录因子1B(POU5F1B)在子宫内膜腺癌中的表达情况,并探讨两者在子宫内膜腺癌中的临床意义。方法纳入60例子宫内膜腺癌患者,并收集其子宫内膜腺癌组织,同时纳入50例子宫内膜良性病变患者,并收集其增生期子宫内膜组织。采用实时荧光定量PCR检测组织中的OCT4 mRNA、POU5F1B mRNA的表达水平。用免疫组织化学法检测组织中OCT4蛋白的阳性表达情况。分析OCT4蛋白阳性表达率与子宫内膜腺癌患者临床病理参数的关系。结果子宫内膜腺癌组织中POU5F1B mRNA、OCT4 mRNA的表达水平均高于增生期子宫内膜组织(均P<0.05)。子宫内膜腺癌组织中的OCT4蛋白高表达率高于增生期子宫内膜组织(P<0.05)。临床分期为Ⅱ~Ⅳ期、肌层浸润深度>1/2、有淋巴结转移的子宫内膜腺癌患者的OCT4蛋白高表达率分别高于临床分期为Ⅰ期、肌层浸润深度≤1/2、无淋巴结转移的患者(均P<0.05)。结论OCT4及其假基因POU5F1B在子宫内膜腺癌中的表达上调,并且OCT4蛋白的表达情况与患者的临床分期、浸润深度、淋巴结转移有关。假基因POU5F1B可能通过调控OCT4来影响子宫内膜腺癌的发生和发展。