细胞程序性死亡因子10调控蛋白磷酸化酶2A/p38信号通路介导胶质瘤细胞的迁移

目的探讨细胞程序性死亡因子10(programmed cell death 10,PDCD10)介导胶质瘤细胞迁移的分子机制。方法siRNA构建siPDCD10胶质瘤细胞系(U251),同时采用蛋白磷酸化酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)抑制剂冈田酸(Okadaic acid,OA)处理细胞,研究下调PDCD10对胶质瘤细胞行为的影响;蛋白质印迹法(western blot,WB)分别检测对照组和PDCD10低表达组胶质瘤细胞PDCD10、PP2A,PP2Ac-307,p38和pP38的表达,研究PDCD10调控PP2A/p38信号的分子机制。结果下调胶质瘤细胞PDCD10促进肿瘤细胞的迁移(P<0.05),而这一效应可被PP2A抑制剂OA抑制(P<0.01)。进一步研究显示,siPDCD10通过降低PP2A的磷酸化水平,进而升高p38的活性,促进胶质瘤细胞的迁移(P<0.01)。结论PDCD10可能通过调控PP2A/p38信号介导胶质瘤细胞的迁移。

PP2A调控p38信号通路对星形胶质细胞迁移能力的影响研究

目的探讨蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)对星形胶质细胞迁移能力影响及机制研究。方法体外分离培养乳鼠原代星形胶质细胞,分别用PP2A激活剂DES(激活组)和抑制剂OA(抑制组)作用于星形胶质细胞,同时设置对照组,对照组细胞中加入等量DMSO。PP2A活性检测试剂盒检测细胞中PP2A活性,Transwell小室检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞中p38、p-p38、MMP-2、MMP-9蛋白水平。用p38信号通路抑制剂SB202190和PP2A激活剂DES共同作用于星形胶质细胞,检测细胞的迁移能力及细胞中p38、p-p38、MMP-2、MMP-9蛋白水平。结果抑制组细胞中PP2A活性明显低于对照组,而激活组细胞中PP2A活性明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。抑制组细胞迁移能力和细胞中MMP-2、MMP-9水平明显低于对照组(P<0.01)。激活组细胞迁移能力和细胞中MMP-2、MMP-9水平明显高于对照组(P<0.01)。抑制组细胞中p-p38水平与对照组相比明显升高,而激活组细胞中p-p38水平与对照组相比明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。p38信号通路抑制剂SB202190和PP2A激活剂DES共同作用后的细胞迁移能力及MMP-2、MMP-9蛋白水平较SB202190单独作用后均明显升高(P<0.01)。结论 PP2A负调控p38信号通路促进星形胶质细胞迁移。