PPAR-γ调控脑胆固醇代谢清除β-淀粉样蛋白改善阿尔茨海默病的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor gamma,PPAR-γ)是配体激活的核转录因子超家族成员之一。活化的PPAR-γ参与调节许多中枢神经系统(central nervous system,CNS)事件,通过诱导或抑制一系列基因、蛋白等途径参与脑胆固醇代谢,从而抑制β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)沉积,在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)中发挥着重要的神经保护作用,改善AD的记忆和认知能力,是AD的一个有潜力的靶点。旨在恢复脑胆固醇稳态的药物开发可能是抵消AD的潜在策略。该文通过分析PPAR-γ的分布、结构,聚焦PPAR-γ介导的脑胆固醇代谢与AD的生物学相关性,阐述了PPAR-γ对关键蛋白、基因及其相应分子的机制调控,为AD的治疗提供了新的参考。

急性脑梗死患者介入取栓术围术期PPAR-γ、FAR、ENA-78水平变化与预后的关系

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者介入取栓术围术期过氧化小体增殖剂激活型受体γ(PPAR-γ)、纤维蛋白原/白蛋白比值(FAR)、中性粒细胞激活肽-78(ENA-78)水平变化与预后的关系。方法选取2020年1月至2022年11月郑州市中心医院收治的134例ACI患者为研究对象,所有患者均接受介入取栓术,根据术后3个月改良Rankin量表(mRS)评分分为对照组78例(mRS评分≤2分)和观察组56例(mRS评分>2分),根据术前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度损伤51例(NIHSS<4分)、中度损伤43例(NIHSS评分4~20分)和重度损伤40例(NIHSS评分>20分),根据颅脑电子计算机断层扫描(CT)检查的脑梗死面积分为大面积梗死39例、中面积梗死57例和小面积梗死38例。比较不同神经损伤程度、不同梗死面积患者术前血清PPAR-γ、FAR、ENA-78水平,采用Pearson线性相关法分析术前血清PPAR-γ、FAR、ENA-78水平与NIHSS评分及梗死面积相关性,比较不同预后患者术前、术后1周、术后2周血清PPAR-γ、FAR、ENA-78水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析其联合检测对ACI患者预后不良的预测价值及危险度。结果术前,轻度神经损伤患者的血清PPAR-γ水平(329.85±21.07)pg/mL>中度损伤(275.73±16.41)pg/mL>重度损伤(218.62±18.44)pg/mL,轻度神经损伤患者的FAR、ENA-78水平[89.46±11.37、(103.28±11.64)ng/L]<中度损伤[126.75±15.63、(142.95±13.39)ng/L]<重度损伤[168.34±14.79、(193.08±16.64)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05);术前,小面积梗死患者的血清PPAR-γ水平(334.14±19.57)pg/mL>中面积梗死(269.53±15.81)pg/mL>大面积梗死(237.60±16.42)pg/mL,小面积梗死患者的血清FAR、ENA-78水平[92.35±10.61、(95.46±12.86)ng/L]<中面积梗死[121.49±12.34、(139.55±14.08)ng/L]<大面积梗死[163.67±11.58、(196.33±13.37)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05);术前,血清PPAR-γ水平与NIHSS评分(r=-0.715)、梗死面积(r=-0.633)呈负相关(P<0.05),FAR、ENA-78水平与NIHSS评分(r=0.693、0.518)、梗死面积(r=0.622、0.634)呈正相关(P<0.05);术后1周、术后2周,观察组患者的血清PPAR-γ水平分别为(281.65±25.11)pg/mL、(301.58±26.74)pg/mL,明显低于对照组的(341.28±22.07)pg/mL、(375.19±21.33)pg/mL,血清FAR、ENA-78水平分别为121.79±11.68、119.64±12.23、(140.94±13.87)ng/L、(137.51±14.39)ng/L,明显高于对照组的81.06±11.33、59.73±8.45、(108.52±12.34)ng/L、(76.29±10.44)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);术后1周、术后2周,血清PPAR-γ、FAR、ENA-78联合预测ACI患者预后不良的AUC均大于各单一指标检测,差异均有统计学意义(P<0.05);术后1周、术后2周,血清PPAR-γ、FAR、ENA-78高水平患者预后不良的危险度分别是低水平的0.418、2.153、1.880倍以及0.313、2.852、2.220倍(P<0.05)。结论PPAR-γ、FAR、ENA-78水平升高/降低可明显增加ACI患者介入治疗后预后不良风险,联合检测可作为临床早期诊断的重要辅助途径,还能为临床评估病情进展提供数据支持。

右美托咪定通过调控PPARγ/NF-κB通路改善糖尿病脑损伤的机制探讨

目的:研究右美托咪定(DEX)对2型糖尿病大鼠脑损伤的影响及其机制。方法:选择48只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组:正常组(control组)、糖尿病组(DM组)、DEX组,每组各16只;除control组外,其余组28只SD大鼠以高脂饲料喂养4周后以40 mg/kg单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病模型;4周后检测随机血糖≥16.7 mmol/L为造模成功;DEX组在DM组造模成功后腹腔注射40μg/kg DEX,每日1次,连续注射2周,DM组给予等量的0.9%生理盐水腹腔注射,观察并记录各组大鼠空腹血糖、体重及生存情况;造模结束后处死大鼠,收集大脑皮层和海马组织,通过苏木精—伊红(HE)法检测大鼠脑组织病理学损伤变化,采用蛋白质免疫印迹(western blotting)和免疫组化法检测p-PPARγ、NF-κB的表达。结果:与control组相比,DM组大鼠的血糖升高、体重降低,可见一定程度的脑组织结构破坏及炎性细胞浸润。除此之外,p-PPARγ蛋白的表达量下降(P<0.05),NF-κB表达升高(P<0.05)。而在给予DEX处理后逆转了以上的变化,与DM组相比,DEX组的血糖下降、脑组织损伤较前改善,p-PPARγ蛋白的表达增加,NF-κB蛋白表达减少(均P<0.05)。结论:DEX可能通过调控PPARγ/NF-κB信号通路减轻2型糖尿病大鼠脑损伤。

白术乙醇提取物调节PPAR-γ信号通路促进小胶质细胞摄取及降解Aβ的作用机制研究

目的基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)信号通路研究白术乙醇提取物(EEAM)促进小胶质细胞摄取及降解β淀粉样蛋白(Aβ)的作用机制。方法以小鼠神经小胶质细胞BV2为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜观察EEAM(低、中、高剂量分别为0.3、0.4、0.5 mg/mL,下同)对细胞摄取和降解Aβ的影响;利用人胚胎肾细胞HEK293考察EEAM对PPAR-γ萤光素酶转录活性的影响;采用免疫荧光法考察EEAM对PPAR-γ核移位的影响;以Aβ1-42诱导阿尔茨海默病BV2细胞模型,并采用定量聚合酶链式反应法考察EEAM对PPAR-γ下游靶基因(Lxra、Lxrb、Abca1、Abcg1、Cd36、Sra和Apoe)mRNA表达的影响。结果Aβ摄取实验结果显示,经中、高剂量EEAM干预后,BV2细胞中Aβ荧光强度均显著升高(P<0.05);Aβ降解实验结果显示,经中、高剂量EEAM干预后,BV2细胞中Aβ荧光强度均显著降低(P<0.05)。经各剂量EEAM干预后,HEK293细胞中PPAR-γ萤光素酶转录活性均显著升高(P<0.05),BV2细胞中和细胞核中PPAR-γ蛋白的荧光强度(低剂量组除外)均显著升高(P<0.05),BV2细胞中Lxra、Lxrb、Abca1、Abcg1、Cd36、Sra、Apoe mRNA的表达水平均显著升高(P<0.05)。结论EEAM可通过激活PPAR-γ信号通路,促进小胶质细胞对Aβ的摄取与降解作用,进而改善阿尔茨海默病。

PPAR-γ抑制高糖微环境下NCI-H460细胞增殖的分子机制

目的探讨PPAR-γ在高糖微环境下对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响及其分子机制。方法分别用正常糖(空白组)、高渗(对照组)和30 mmol/L葡萄糖(高糖组)培养基处理NCI-H460细胞,用CCK-8法和平板克隆实验分析高糖微环境对NCI-H460细胞增殖能力的影响;用Western blotting检测NLRP3炎症小体相关蛋白和PPAR-γ蛋白的表达;用特异性PPAR-γ激活剂罗格列酮刺激高糖微环境下的NCI-H460细胞;用Western blotting检测NLRP3炎症小体相关蛋白的表达,CCK-8法和平板克隆实验分析高糖微环境下PPAR-γ对NCI-H460细胞增殖能力的影响;用NLRP3炎症小体激动剂NSS联合罗格列酮刺激高糖微环境下的NCI-H460细胞,CCK-8法和平板克隆实验分析NLRP3炎症小体是否参与高糖微环境下PPAR-γ对NCI-H460细胞增殖的抑制作用。结果高糖微环境能够显著提高NCI-H460细胞的增殖能力,诱导NLRP3炎症小体活性升高,下调PPAR-γ蛋白表达,PPAR-γ激活剂罗格列酮能有效抑制NLRP3炎症小体的活性,抑制NCI-H460细胞的增殖,且这一作用可被NLRP3炎症小体激动剂逆转。结论PPAR-γ通过下调NLRP3炎症小体活性,抑制高糖微环境下人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖。

葛根素基于PPAR-γ/Axin2/Wnt信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用

目的分析葛根素基于过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)-γ/轴蛋白(Axin)2/Wnt信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。方法随机选取40只健康SD雌性大鼠,随机分为空白组、模型组、低剂量组、高剂量组,每组各10只,空白组不予以任何处理,模型组、低剂量组、高剂量组采用双侧卵巢去除法制备去卵巢骨质疏松模型分别进行干预。对比各组骨密度(BMD),检测骨代谢指标[人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)5b、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(PINP)、骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)]、炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-6、转化生长因子(TGF)-β、肿瘤坏死因子(TNF)-α]水平及骨组织过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ、轴蛋白(Axin)2、β-连环蛋白(catenin)蛋白表达,分析葛根素对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。结果与空白组相比,模型组、低、高剂量组BMD显著降低(P<0.05);与模型组、低剂量组相比,高剂量组BMD显著升高(P<0.05)。与空白组相比,模型组、低、高剂量组血清TRACP5b、PINP、BGP、ALP、IL-6、TGF-β、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与模型组、低剂量组相比,高剂量组上述指标显著降低(P<0.05)。与空白组相比,模型组、低、高剂量组PPAR-γ、Axin2蛋白表达显著升高,β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组、低剂量组相比,高剂量组PPAR-γ、Axin2蛋白表达显著降低,β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论葛根素可有效调节去卵巢大鼠骨代谢水平,提高BMD,有助于骨形态学结构改善,具有抗去卵巢骨质疏松作用,其机制可能与抑制PPAR-γ/Axin2信号通路,激活Wnt信号通路相关。

基于PPARγ/c-Ski信号通路探究黄芩苷对乙型病毒性肝炎大鼠肝功能损伤的机制

目的 基于PPAR-γ/cSki信号通路探究黄芩苷对乙型病毒性肝炎大鼠肝功能损伤的影响。方法 将大鼠随机分为sham组、HBV组、HQL组、HQM组、HQH组、PT组,每组10只。使用全自动生化检测仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)含量,肝脂质代谢指标总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)含量及肝纤维化指标透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN)含量;ELISA检测血清中一氧化碳合酶iNOS、IL-6、IL-10、IL-4水平;苏木精-伊红(HE)染色检测肝组织病理学变化;染色质免疫共沉淀法分析肝组织中病毒载量;蛋白质印迹检测肝组织中PPAR-γ和c-Ski蛋白表达。结果 和sham组相比,HBV组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、LDL、HA、LN、iNOS和IL-6含量均明显升高,HDL、IL-10和IL-4含量明显减少(P<0.05);和HBV组相比,HQL组、HQM组、HQH组和PT组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、LDL、HA、LN、iNOS和IL-6含量明显降低,HDL、IL-10和IL-4含量升高(P<0.05)。HBV组大鼠肝组织中HBV DNA及PPAR-γ、c-Ski蛋白表达高于sham组(P<0.05);和HBV组相比,HQL组、HQM组、HQH组和PT组大鼠肝组织中HBV DNA表达及PPAR-γ和c-Ski蛋白明显降低,且HQH组和PT组大鼠肝组织中的HBV DNA表达最低(P<0.05)。结论 黄芩苷能通过激活PPAR-γ/c-Ski信号抑制乙型病毒性肝炎大鼠的肝纤维化,对肝组织发挥保护作用。

罗格列酮通过诱导HO-1减轻大鼠肝缺血再灌注损伤的作用机制

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR-γ)激动剂罗格列酮是否通过调控血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)活性来减轻大鼠肝缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)。方法建立大鼠70%肝脏热缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型和缺氧缺糖/复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)诱导的大鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)损伤模型,随机分为假手术组、模型组、罗格列酮预处理组和锌原卟啉(zinc protoporphyrin,ZnPP)组(n=6)。全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST水平;HE染色评估肝组织病理学损伤;Western blot检测PPAR-γ和HO-1蛋白表达水平;CCK8法测定LSECs的细胞活力,流式细胞仪测定LSECs中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。结果与I/R组相比,罗格列酮预处理能显著降低肝IRI大鼠ALT、AST水平(P<0.01),减少肝细胞凋亡并减轻肝组织IRI(P<0.01)。Western blot结果显示,罗格列酮能上调PPAR-γ和HO-1蛋白的表达(P<0.01)。此外,罗格列酮预处理(10,30μmol/L)能改善OGD/R诱导的LSECs存活率,显著降低细胞ROS含量,并呈剂量反应相关性(P<0.01)。使用ZnPP阻断HO-1活性后,罗格列酮对大鼠肝IRI的保护作用均消失。结论罗格列酮通过上调HO-1活性介导抗氧化和抗炎作用,减轻大鼠肝IRI。

项痹通颗粒调控PPAR-γ/NF-κB通路改善大鼠颈后肌炎症损伤的研究

目的观察项痹通颗粒对颈后肌炎症损伤大鼠的炎症相关因子及过氧化物酶增殖激活受体γ/核转录因子KappaB(peroxisome proliferators-activated receptor-γ/NF-KappaB,PPAR-γ/NF-Κb)信号通路相关蛋白的影响,探讨其可能的作用机制。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、塞来昔布组[0.18 g/(kg·d)]、项痹通颗粒低、中、高剂量组[4.5 g/(kg·d)、9.0 g/(kg·d)、18.0 g/(kg·d)],每组各10只。以手术方式切开术口,用弯头止血钳钳夹C 2~6棘突旁开0.2 cm的颈后肌中段(持续钳夹10秒、后松开间隔10秒、扣满3扣),以建立颈后肌炎症损伤大鼠模型。苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察颈后肌组织的形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测造模前、造模后第2天(干预前)及干预7天后的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、前列腺素E 2(prostaglandin E 2,PGE 2)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测PPAR-γ/NF-κB的活性成分p65(NF-κB p65)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)蛋白表达;斜板试验评价大鼠颈部运动功能。结果与造模前比较,造模后第2天(干预前)TNF-α、IL-1β、PGE 2均显著升高(P<0.05)。干预7天后,与假手术组比较,模型组肌细胞核减少、结构紊乱、变形水肿、大小不一,TNF-α、IL-1β、PGE 2、NF-κB p65、MyD88均显著升高(P<0.05),斜板试验功能角度减小(P<0.05);与模型组比较,项痹通颗粒低、中、高剂量组肌细胞核稍增多、结构变清晰、水肿程度减轻、形状较规则,TNF-α、IL-1β、PGE 2、NF-κB p65、MyD88降低(P<0.05),PPAR-γ升高(P<0.05),斜板试验功能角度增大(P<0.05);与塞来昔布组比较,项痹通颗粒中、高剂量组TNF-α、IL-1β降低(P<0.05),项痹通颗粒低、中、高剂量组PPAR-γ升高(P<0.05),NF-κB p65、MyD88降低(P<0.05)。结论项痹通颗粒可改善大鼠颈后肌炎症损伤,其机制可能与激活PPAR-γ途径、抑制NF-κB信号通路、减少下游炎症因子释放有关。

E-cadherin和PPAR-γ蛋白在鼻息肉表达及其相关性研究

目的研究E-cadherin和PPAR-γ蛋白在鼻息肉中的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学方法、体视学方法和Western blot方法,对20例鼻息肉标本E-cadherin和PPAR-γ的表达进行检测。观察E-cadherin和PPAR-γ在鼻息肉组织中的阳性表达百分比及细胞分布情况,对两者进行关联性分析。结果E-cadherin在鼻息肉组织中高表达和低表达分别为15例(75%)和5例(25%),E-cadherin主要表达于上皮及腺上皮细胞膜,少数表达于细胞质。PPAR-γ在鼻息肉组织中高表达和低表达分别为4例(20%)和16例(80%),PPAR-γ主要位于上皮纤毛及固有层细胞的胞质中,染色特点为细胞浆呈现棕黄色。E-cadherin和PPAR-γ在鼻息肉中的表达呈负相关(r_(s)=-0.577,p=0.008)。体视学和Western blot结果显示E-cadherin在鼻息肉组织中高表达,而PPAR-γ在鼻息肉组织中低表达。结论E-cadherin和PPAR-γ呈负相关,采用抑制Ecadherin表达或PPAR-γ的降解,可作为鼻息肉诊治的一个新的治疗的作用靶点。

百合总皂苷对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的保护作用及PPARγ/NF-κB通路的影响

目的探讨百合总皂苷对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤的保护作用及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/核因子(NF)-κB通路的影响。方法建立大鼠SAH模型,将造模成功的48只大鼠按随机数表法分为模型组、尼莫地平组(40 mg/kg)、百合总皂苷低、高剂量组(0.53、1.06 g/kg),每组12只,另取12只健康大鼠设为假手术组;尼莫地平组、百合总皂苷低、高剂量组大鼠于造模成功开始给予相应药物灌胃,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,每天灌胃1次,持续4 w后,测定大鼠神经功能评分、脑组织神经细胞凋亡率,观察脑组织形态学变化,测定脑组织PPARγ、NF-κB mRNA和蛋白表达水平。结果模型组SAH脑面积大,尼莫地平组和百合总皂苷各剂量组SAH脑面积明显减少;假手术组蛛网膜下腔脑组织结构正常;模型组蛛网膜下腔脑组织可见明显红细胞,炎症细胞浸润明显;尼莫地平组和百合总皂苷各剂量组蛛网膜下腔脑组织红细胞数目减少,炎症细胞浸润减少。与假手术组相比,模型组神经功能评分、脑组织PPARγmRNA和蛋白表达水平显著降低,脑组织神经细胞凋亡率、NF-κB mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,尼莫地平组、百合总皂苷低、高剂量组神经功能评分、脑组织PPARγmRNA和蛋白表达水平显著升高,脑组织神经细胞凋亡率、NF-κB mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);百合总皂苷高剂量组神经功能评分、脑组织PPARγmRNA和蛋白表达水平显著高于百合总皂苷低剂量组,脑组织神经细胞凋亡率、NF-κB mRNA和蛋白表达水平显著低于百合总皂苷低剂量组(P<0.05);尼莫地平组和百合总皂苷高剂量组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论百合总皂苷可减少SAH脑面积、脑组织炎症细胞浸润、神经细胞凋亡,对大鼠SAH后早期脑损伤具有保护作用;其机制可能与百合总皂苷促进SAH大鼠脑组织PPARγmRNA和蛋白表达,抑制NF-κB mRNA和蛋白表达有关。

黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块Perilipin和PPAR-γ基因表达的影响

目的观察黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)易损斑块内周脂素(perilipin)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)基因表达的影响,探讨黄连提取物稳定AS斑块的作用及可能机制。方法33只6～8周龄ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为3组:模型组、黄连提取物组、辛伐他汀组(阳性对照组),每组11只。继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,每只小鼠分别取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主AS斑块内埋藏纤维帽的平均数目,实时荧光定量PCR法检测主动脉内perilipin和PPAR-γmRNA的表达。结果给药13周后,黄连提取物组斑块内埋藏纤维帽的数目与模型组比较明显减少(P<0.05),并且斑块内perilipin mRNA的表达与模型组比较显著降低(P<0.05),而PPAR-γmRNA的表达较模型组显著增加(P<0.01)。结论在临床推荐剂量上,黄连提取物可显著减少ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样斑块破裂次数,有助于稳定易损斑块,其机制可能与促进小鼠AS斑块内PPAR-γmRNA表达,抑制pefilipin mRNA表达有关。

沙棘多糖对急性肝损伤小鼠氧化应激的抑制作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控

目的:以LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤作为模型,研究沙棘多糖对急性肝损伤的保护作用及其对BCL-2/Bax和PPAR-γ的调控。方法:C57BL/6系雄性小鼠随机分为六组:正常组(CTRL);模型组(L/G);地塞米松阳性对照组(DXM);沙棘多糖低(SPL)、中(SPM)、高剂量组(SPH)。SPL、SPM和SPH组分别用50、100、200 mg/kg沙棘多糖溶液连续灌胃14 d,然后采用D-Gal N(700 mg/kg)联合LPS(10μg/kg)腹腔注射诱导急性肝损伤。建模4 h后采集血清和并收集肝脏组织,检测ALT、AST的活性和丙二醛(MDA)的含量。通过Western blot检测肝脏组织中SOD2及BCL-2和Bax的表达水平。通过免疫组织化学法测定肝脏PPAR-γ的表达。结果:ALT、AST水平在模型组显著升高(P<0.01),沙棘多糖预处理后剂量依赖地降低了ALT和AST水平(P<0.01);模型组的MDA比正常组显著升高(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著降低(P<0.01)。模型组的SOD比正常组显著降低(P<0.01),沙棘多糖各剂量组比模型组都有显著升高(P<0.01);沙棘多糖预处理后降低了Bax的表达水平,对BCL-2的表达没有明显的影响。沙棘多糖各剂量组中PPAR-γ的表达量与模型组相比明显降低。结论:沙棘多糖对LPS/D-Gal N诱导的氧化应激有抑制作用,其作用与上调SOD2的表达以及抑制Bax的表达有关。

PPAR-γ在肺癌中的表达及在肺癌凋亡中的作用研究

背景与目的过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR-γ)是对机体代谢过程起重要调节作用的一种核激素受体。研究表明肿瘤(包括肺癌)组织及细胞可表达PPAR-γ,且经其配体活化后可影响肿瘤细胞的分化、增殖及凋亡。本研究的目的是分析PPAR-γ的表达与肺癌临床病理特征之间的关系,并探讨PPAR-γ的配体对肺癌细胞生长的影响及其诱导凋亡的机制。方法采用免疫组化法检测15例非癌肺组织和64例肺癌组织中PPAR-γ的表达,并通过图像分析测定各组的平均吸光度值。采用RT-PCR和Western blot检测肺癌细胞株中PPAR-γ的表达。细胞经PPAR-γ的配体处理后,采用TUNEL法检测凋亡,并用caspase-3活性检测试剂盒检测其活性变化。结果PPAR-γ在肺癌组织中的表达显著高于非癌肺组织。PPAR-γ的表达与肿瘤病理类型、细胞分化程度、术后TNM分期有密切关系。肺癌细胞株中有PPAR-γ的表达,且经其配体活化后,caspase-3的活性明显增加,并能诱导细胞凋亡。结论PPAR-γ表达与肺癌的临床病理特征密切相关。活化后的PPAR-γ可使肺癌细胞caspase-3的活性增强,从而使细胞更易发生凋亡。PPAR-γ有可能成为未来肺癌诊断和治疗的一个新靶点。

丹蛭降糖胶囊对胰岛素抵抗大鼠PPAR-γ mRNA表达的影响

目的:观察丹蛭降糖胶囊对小剂量链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)模型大鼠大网膜脂肪细胞过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)mRNA表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、治疗组(马来酸罗格列酮组、丹蛭降糖胶囊高剂量+马来酸罗格列酮组、丹蛭降糖胶囊低剂量组、丹蛭降糖胶囊高剂量组),正常组喂以普通饲料,模型组与治疗组注射小剂量STZ并喂以高热量饲料,常规测定各组大鼠治疗前后的空腹血糖(FPG)和治疗后各组大鼠的空腹血清胰岛素水平(FIns),计算胰岛素敏感性指数(ISI),提取大网膜脂肪组织总RNA,采用逆转录PCR技术扩增PPAR-γ基因片段,检测其表达水平。结果:丹蛭降糖胶囊能降低模型大鼠FPG水平和FIns含量,增加PPAR-γmRNA表达,提高ISI。结论:丹蛭降糖胶囊对大鼠IR有显著的改善作用,提示其机制与中药复方的作用是多途径靶点的,可能与提高IR大鼠脂肪细胞PPAR-γ基因的表达有关。

石榴花多酚对糖尿病大鼠IL-6、TXB2及PPAR-γ mRNA基因表达的影响

目的观察石榴花多酚对小剂量链脲佐菌素加高脂饲料诱导的胰岛素抵抗模型大鼠IL-6、TXB2以及心肌组织PPAR-γ mRNA基因表达的影响。方法♂SD大鼠高脂饲料喂养1mon后注射小剂量STZ,2wk后测大鼠空腹血糖,血糖值>11.1者为造模成功的大鼠,将造模成功的大鼠随机分为模型组和药物干预组,另设空白对照组,药物干预1mon,常规测定各组大鼠给药前后的空腹血糖(FPG)和给药后各组大鼠的空腹血清胰岛素水平(Fins)、IL-6、TXB2,计算胰岛素敏感性指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(Homa-IRI),提取心肌组织总RNA,采用逆转录PCR技术扩增PPAR-γ基因片段,检测其基因表达水平。结果石榴花多酚能降低模型大鼠FPG水平和Fins、IL-6、TXB2含量,增加PPAR-γmRNA基因表达,提高ISI,降低Homa-IRI。结论石榴花多酚对大鼠IR有一定程度的改善作用,其机制可能与提高IR大鼠心肌组织PPAR-γ基因的表达有关。

PPAR-γ作用及其相关信号转导途径

过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisomeproliferater-activatedreceptor,PPAR)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,包括PPAR-α、PPAR-β/δ和PPAR-γ三种表型,其中以PPAR-γ的研究最为深入。PPAR-γ通过JAK-STAT、激活蛋白-1(AP-1)、NF-κB、活化T细胞核因子信号通路(NFAT)来抑制炎症反应;通过抑制泡沫细胞(foamcell)的分化、炎症反应以及细胞增殖来抑制动脉粥样硬化的发生发展;通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、瘦素、脂链素等信号通路来参与糖稳态的调节;通过细胞周期的调控来影响肿瘤生长;参与脂肪细胞分化并与肥胖密切相关。明确这些相关信号通路以及相关细胞因子的作用,可对相关疾病机制及防治进一步提供有力依据和干预途径。

代谢综合征中医体质与胰岛素抵抗、PPAR-γ的相关性研究

目的:研究代谢综合征的中医体质与胰岛素抵抗、PPAR-γ的相关性。方法:对206例代谢综合征患者进行调查,同时检测胰岛素抵抗、PPAR-γ水平。结果:代谢综合征体质分布为痰湿质(35.0%),湿热质(34.0%),气虚质(12.1%),阴虚质(7.3%),气郁质(5.8%),血瘀质(2.9%),阳虚质(2.4%);其中,痰湿质、湿热质、气虚质、阴虚质、阳虚质是代谢综合征胰岛素抵抗的病理基础,PPAR-γ与痰湿质、湿热质、气虚质、阴虚质、阳虚质相关。结论:代谢综合征体质分布以痰湿质、湿热质为主,偏颇体质中痰湿质、湿热质、气虚质、阴虚质、阳虚质是代谢综合征胰岛素抵抗、PPAR-γ的病理基础。

PPAR-γ抑制剂T0070907对人鼻咽癌细胞的生长抑制作用

【目的】探讨PPAR-γ选择性抑制剂T0070907影响鼻咽癌(NPC)细胞体外生长的作用机制。【方法】通过RT-PCR和Westernblotting检测PPAR-γ受体在5株NPC细胞株(CNE1、CNE2、HONE1、SUNE1和5-8F)中mRNA和蛋白水平的表达;MTT法检测T0070907对NPC细胞生长情况的影响;流式细胞术和Westernblotting检测T0070907对NPC细胞的细胞周期和细胞周期相关蛋白表达的影响。【结果】PPAR-γ在5株NPC细胞中均有表达;T0070907对NPC细胞株有明显生长抑制作用,并呈浓度、时间依赖性;T0070907作用于NPC细胞CNE1和CNE2后,G2/M期细胞比例则逐渐增加,且随着处理浓度的增加而增加,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。此外,随着T0070907处理浓度的增加,NPC细胞的细胞周期相关蛋白CyclinA、CyclinB1、Cdc2、Cdk2蛋白的表达逐渐下降,无活性的pCdc2蛋白表达则逐渐增强。【结论】PPAR-γ抑制剂T0070907能够抑制NPC细胞PPAR-γ的蛋白表达,并通过对细胞周期相关蛋白CyclinA、CyclinB1、Cdc2、Cdk2、pCdc2等蛋白的调控导致细胞周期G2/M期阻滞,从而抑制NPC细胞的生长。

替米沙坦通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达的实验研究

目的探讨替米沙坦能否通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达。方法使用替米沙坦对SW480细胞进行干预。在不同时间点(0、24和72h)使用MTT法对SW480细胞活性进行测定;使用PT-PCR对在不同时间点(0、24和72h)细胞表达的TIMP-1和PPAR-γmRNA进行测定;使用western blotting对在不同时间点(0、24和72h)细胞表达的TIMP-1和PPAR-γ蛋白进行测定。结果替米沙坦干预后SW480细胞活性逐渐降低,明显低于对照组(均P<0.05),且各时间点间的细胞活性存在显著统计学差异(均P<0.05);不同时间点(0、24和72h)TIMP-1、PPAR-γmRNA和蛋白的表达呈时间依赖性递增(均P<0.05)。结论本实验表明,替米沙坦可能是通过上调PPAR-γ的表达促进TIMP-1的合成和分泌,导致SW480细胞生长和侵袭能力的降低。