AJUBA调控MST1 YAP1和TAZ因子促进食管鳞状细胞癌细胞体外增殖迁移和侵袭

目的:探讨AJUBA在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞中表达以及是否通过调控MST1、YAP1和TAZ因子影响细胞增殖、侵袭和迁移。方法:采用Western blot法检测AJUBA蛋白在食管癌细胞系KYSE30、KYSE150与KYSE450中的表达水平,构建shRNA干扰载体AJUBA转染至KYSE150食管癌细胞系;通过体外克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验探究AJUBA对KYSE150细胞的增殖、周期、迁移和侵袭能力的影响。采用RT-PCR和Western blot检测MST1、YAP1和TAZ mRNA和蛋白的表达;核质分离实验检测AJUBA、YAP1和TAZ蛋白表达情况。结果:稳定干扰AJUBA基因后,平板克隆实验结果显示,与阴性对照组相比,shAJUBA组的细胞克隆形成数量明显减少,差异具有统计学意义(P<0.001);流式细胞周期实验结果显示,shAJUBA组中的细胞阻滞于G0/G1期,G2/M期与S期细胞显著减少(P<0.05);划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,与AJUBA空染组相比,shAJUBA组细胞迁移能力和侵袭能力均明显减弱(P<0.001);RT-PCR与Western blot实验结果显示,shAJUBA组细胞中的MST1、YAP1、TAZmRNA与蛋白表达水平均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。核质分离实验结果提示AJUBA蛋白在正常食管鳞状上皮细胞株(SHEE)细胞核中表达,而在KYSE150细胞胞质与胞核中表达;YAP1和TAZ蛋白在SHEE细胞中不表达,在KYSE150细胞质与细胞核中表达,上述结果差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:AJUBA促进食管癌细胞的增殖、侵袭与迁移,可能与激活MST1、YAP1、TAZ因子的表达而影响食管鳞状细胞癌进展有关。

淫羊藿诱导ADSCs成骨分化作用于骨质疏松症防治的研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种慢性、全身性骨病,伴随着老龄化社会的到来,对于该疾病防治的研究日益增多,寻找有效药物诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)成骨分化是目前研究较为热点的OP防治策略。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)为调控脂肪细胞分化的关键蛋白,研究证实应用淫羊藿干预骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),能抑制PPARγ表达,从而抑制BMSCs成脂分化,促进其成骨分化。Hippo信号通路通过激酶级联控制YAP/TAZ转录辅活化因子的活性,抑制PPARγ活性,进而抑制ADSCs向脂肪细胞分化。Ajuba是细胞成脂分化的重要调节剂,是一种新型的PPARγ相互作用蛋白,在细胞增殖过程中能够限制Hippo信号通路活性。中药淫羊藿在OP防治方面具有独特的优势,前期研究发现淫羊藿可促进ADSCs成骨分化,抑制其成脂分化。在OP发病机制中,PPARγ、Hippo通路、Ajuba三者之间存在着密切的关联性。结合前期实验研究,本文旨在对中药淫羊藿作用于ADSCs防治OP的作用机制进行综述,以期为临床新药研发提供参考。