绞股蓝总皂苷对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠血管PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷对动脉粥样硬化(AS)小鼠血管PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路的影响.方法:高脂饲养ApoE-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型动物,并用200 mg·kg-1和400 mg·kg-1剂量的绞股蓝总皂苷进行干预,化学法检测小鼠血脂水平,HE染色法检测主动脉组织病理学变化,荧光定量PCR和免疫印迹技术检测血管中PPAR-γ、LXR-α及ABCA1的表达.结果:与正常组相比,AS模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量显著升高(P<0.05),血管内动脉粥样硬化斑块面积增加.绞股蓝总皂苷干预后,TC、TG、LDL-C含量明显降低(P<0.05),AS斑块减小,PPAR-γ、LXR-α、ABCA1表达显著增加(P<0.05).结论:绞股蓝总皂苷能够降低AS小鼠血脂含量,并可能通过激活PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路从而发挥抗动脉粥样硬化的作用.

复方丹参片对颈动脉粥样硬化兔PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路的影响

目的探讨复方丹参片对颈动脉粥样硬化兔PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路的影响。方法高脂饲料加空气干燥法建立兔颈动脉粥样硬化模型,并用100 mg·kg^(-1)和300 mg·kg^(-1)剂量的复方丹参片进行治疗后,经耳缘静脉抽血后空气栓塞处死兔,迅速剥离颈动脉,并检测各组动物血脂含量、颈动脉病理学变化及兔颈动脉中PPAR-γ、LXR-α及ABCA1的表达。结果复方丹参片能显著降低兔血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白(P<0.01);并能抑制内膜增生,减少脂质沉积,增加PPAR-γ、LXR-α及ABCA1 mRNA及蛋白质的表达(P<0.01)。结论复方丹参片可能通过激活PPAR-γ/LXR-α/ABCA1信号通路而发挥抗动脉粥样硬化作用。

宁心涤痰汤通过STAT1/LXR-α通路介导的巨噬细胞内质网应激治疗支架内再狭窄的机制研究

目的观察宁心涤痰汤对STAT1/LXR-α信号通路介导的巨噬细胞内质网应激的影响,从而阐明其抑制支架内再狭窄的分子机制。方法人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)体外诱导分化成巨噬细胞后分为空白组、模型组、宁心涤痰汤组和辛伐他汀组。通过ox-LDL诱导构建泡沫细胞模型,并给予相应的药物进行干预。分别采用Western blotting和ELISA法检测各组巨噬细胞STAT1/LXR-α通路与内质网应激相关蛋白的表达水平和炎症因子的含量。构建巨噬细胞与血管平滑肌细胞共培养体系,通过CCK8法和划痕实验检测各组平滑肌细胞增殖和迁移能力的改变。结果与空白组相比,模型组巨噬细胞中p-STAT1、p-PERK、p-elf2α及CHOP蛋白的表达及细胞上清中肿瘤坏死因子-6(IL-6)、人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量均显著升高,LXR-α蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,宁心涤痰汤组能够显著抑制巨噬细胞中p-STAT1、p-PERK、p-elf2α及CHOP蛋白的表达和上清中IL-6、MCP-1和TNF-α的含量,上调LXR-α蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。此外,与空白组相比,模型组平滑肌细胞增殖与迁移率显著增加(P<0.01);与模型组比较,宁心涤痰汤组能够显著抑制平滑肌细胞增殖与迁移率,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论宁心涤痰汤通过促进STAT1/LXR-α通路的活化从而抑制巨噬细胞内质网应激,达到治疗PCI后支架内再狭窄的作用。

健脾祛痰方通过调节PPARγ/LXRα/ABCA1通路干预血脂异常的效应机制

目的探究健脾祛痰方通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferatoractivated receptor gamma,PPARγ)-肝X受体α(liver Xreceptor alpha,LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)信号通路干预血脂异常的作用机制。方法采用随机分组法将18只SPF级雄性SD大鼠分为造模组(n=12)和对照组(n=6)。造模组饲喂高脂饲料,对照组饲喂普通饲料。造模成功的大鼠随机分为模型组(n=6)和健脾祛痰方组(n=6)。健脾祛痰方组予中药健脾祛痰方颗粒剂灌胃,对照组、模型组予生理盐水灌胃,干预4周。4周后检测各组大鼠血清胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的水平;油红o染色观察各组大鼠肝脏脂质沉积变化;实时荧光定量PCR技术及免疫印迹实验检测各组大鼠肝脏组织中PPARγ、LXRɑ、ABCA1、B族Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B type I,SR-B1)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肝脏出现脂质沉积;血清TC、TG、LDL-C水平升高(P<0.05)、HDL-C水平有改变,统计学统计显示变化不显著(P>0.05);肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、SR-B1、CYP7A1 mRNA及蛋白表达下降(P<0.05)。对比模型组,健脾祛痰方组大鼠肝脏脂质沉积面积减少;肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、SR-B1、CYP7A1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。干预前后比较,干预后健脾祛痰方组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平下降(P<0.05),HDL-C水平升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药健脾祛痰方可能通过调控PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路改善高脂饮食诱导的血脂异常。

电针丰隆穴对高脂血症的疗效及对巨噬细胞ABCA1/JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:探究电针丰隆穴(ST40)对高脂血症患者的降脂疗效及对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法:将105例临床辨证为痰浊阻遏证的高脂血症患者随机分为电针组、药物组与对照组,其中电针组予以电针针刺丰隆穴治疗(n=35);药物组予以口服血脂康治疗(n=35);对照组不予以特殊处理(n=35)。观察治疗前及治疗后3个月和6个月3组患者血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平变化;取各组患者血清与人THP-1细胞源性巨噬细胞共培养,采用RT-qPCR及Western blot检测各组巨噬细胞ABCA1、JAK2和STAT3的mRNA和蛋白表达。结果:治疗结束后,电针组总有效率为85.7%,药物组总有效率为88.6%,两者改善血脂的总有效率无显著差异(P>0.05);电针组与药物组的TC、TG和LDL-C下降水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3个月和6个月,药物组TC、TG和LDL-C水平较治疗后升高(P<0.05),而电针组仍较稳定(P>0.05)。治疗后电针组与药物组巨噬细胞ABCA1、JAK2和STAT3的mRNA及蛋白表达较对照组均显著升高(P<0.05);电针组与药物组比较,两者变化无显著差异(P>0.05)。结论:电针丰隆穴可降低高脂血症患者TC、TG和LDL-C水平,且疗效较药物治疗稳定,可上调巨噬细胞ABCA1、JAK2和STAT3的mRNA和蛋白表达,促进胆固醇逆转运,抑制炎症反应。

ABCA1介导胆固醇外流及抗炎的信号通路研究进展

ABCA1抗动脉粥样硬化的作用主要通过以下两种途径:介导细胞内胆固醇流出和抑制炎症。载脂蛋白与ABCA1的相互作用可激活多个信号通路,包括JAK2/STAT3、蛋白激酶A(PKA)、Rho家族G蛋白CDC42和蛋白激酶C(PKC)等信号通路。ABCA1通过修饰细胞膜脂筏或直接激活信号通路而介导脂质流出和发挥抗炎功能。对这些信号通路的认识,能为动脉粥样硬化相关疾病提供新的治疗靶点。

PPAR-γ/AP-1信号通路在相关疾病中作用的研究进展

PPAR-γ/AP-1信号通路是调控细胞增殖、分化和转移,参与炎症反应的重要信号转导途径。近年来,PPAR-γ通过直接抑制转录因子AP-1的激活或间接拮抗辅助调节因子在相关疾病中被广泛关注,本研究综述该信号通路在心血管系统、肾脏系统、免疫系统及其他系统关系的研究进展,旨在为其治疗提供新的靶点和策略。

吡格列酮对Aβ1-42引起的大鼠海马MAP激酶信号转导通路变化的影响

目的：研究PPAR-γ激动剂吡格列酮（pioglitazone，Pio）对淀粉样β蛋白（Amyloid-β protein，Aβ）1-42所致大鼠海马损伤的保护作用及其作用机制。方法：大鼠灌胃给予Pio（20、40、80mg·kg^-1-d^-1），正常对照组和Aβ1-42损伤组大鼠灌胃给予0．2％的二甲基亚砜（Dimethy1 Sulfoxide，DMSO），24h后，左侧脑室内单次注射Aβ1-42 5μL（2．0mmol／L）制备大鼠痴呆动物模型，

雷公藤红素通过激活LXRα/ABCA1通路和细胞自噬抑制巨噬细胞脂质蓄积

巨噬细胞源性泡沫细胞转化被认为是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成与发展的早期变化,其细胞内蓄积的过量脂质可通过促进血管内膜生长与坏死核形成,继而诱发斑块破裂及血栓形成等严重后果.近期研究发现,雷公藤红素可显著调节脂质代谢,对泡沫细胞转化进程具有潜在的治疗意义.本研究表明,雷公藤红素(Celasrol,CeT)呈浓度依赖性减少巨噬细胞Raw264.7内的脂滴积蓄,并上调胆固醇转运关键分子ABCA1、LXRA蛋白质表达.进一步研究显示,CeT可逆转ABCA1敲低介导的脂质蓄积与ABCA1表达下调.此外,CeT处理Raw264.7细胞24 h时观察到自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ增加、p62减少,且采用自噬抑制剂3MA可恢复细胞内脂质水平.综上,CeT可能通过上调LXRα/ABCA1信号及激活荷脂细胞自噬,抑制巨噬细胞内脂质蓄积.因此,深入探究CeT在巨噬细胞源性泡沫细胞转化及AS发生发展中的作用,是研究AS治疗新的着力点,并为药物干预提供新的靶点.

ABCAl介导胆固醇转运的机制及其信号传导通路研究进展

胆固醇的逆向转运（reverse cholesterol transport,RCT）被认为是对抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的一个主要机制之一。在外周组织细胞当中,血管中膜平滑肌细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞的胆固醇外流是RCT第一步中最有意义的事件。目前有多种分子可以转运细胞内胆固醇,ATP结合盒转运子A1（ATP-binding cassette transporter A1。

茯苓多糖改善HDL功能并通过PPARγ/LXRα/ABCA1抗AS机制研究

目的:探讨茯苓多糖改善HDL功能以及通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路防治AS的作用及机制研究。方法:将32只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、茯苓多糖组、辛伐他汀组,10只C57BL/6J作为正常组。模型组及药物干预组给予高脂饲料喂养,正常组给予普通饲料喂养。8周后,药物干预组每日灌胃相应药物,茯苓多糖组以0.2 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组以2.275 mg/(kg·d)灌胃,正常组与模型组给予等量生理盐水。12周后,全自动生化仪检测血清三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;HE及油红O染色法观察肝脏脂质沉积情况;ELISA法检测血清SAA、S1P含量;Real-time RT-PCR法及Western blot法检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、CYP7A1、SR-B1 mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低(P<0.05),肝脏可见脂质沉积,血清S1P含量、肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、CYP7A1、SR-B1 mRNA及蛋白表达显著降低,血清SAA含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,茯苓多糖组、辛伐他汀组血清中TC、TG、LDL-C显著降低,HDL-C显著升高(P<0.05),肝脏脂质沉积面积减少,血清S1P含量,肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、CYP7A1、SR-B1 mRNA及蛋白表达显著升高,血清SAA含量显著降低(P<0.05)。结论:茯苓多糖能够改善HDL功能,同时可通过胆固醇逆转运PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路防治AS。

黄芩素调节PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路干预NAFLD大鼠肝功能和胰岛素抵抗研究

目的:探讨黄芩素调节过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)/肝X受体α(LXRα)/三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝功能和胰岛素抵抗的影响。方法:通过高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,将造模后的大鼠随机分为模型组、双酚A-二甘氨酸醚(BADGE)组(PPARγ抑制剂,20 mg·kg^(-1)BADGE)、黄芩素组(50 mg·kg^(-1)黄芩素)、黄芩素+BADGE组(50 mg·kg^(-1)黄芩素+20 mg·kg^(-1)BADGE),10只/组,另取10只大鼠作为对照组。检测各组大鼠甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏病理状况;油红O染色检测肝脏脂质沉积情况;TUNEL染色测定肝细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(western blot)法检验肝组织中通路相关蛋白表达水平。结果:模型组与对照组相比,大鼠肝组织损伤严重,TC、TG、FINS、FPG、ALT、AST水平、NAS积分、脏器指数、HOMA-IR均显著增加(P<0.05),PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组相比,黄芩素组病理损伤得到改善,细胞凋亡明显减少,TC、TG、FINS、FPG、ALT、AST水平、NAS积分、脏器指数、HOMA-IR均显著下降(P<0.05),PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达均增加(P<0.05);BADGE组大鼠细胞凋亡明显增多,TC、TG、FINS、FPG、ALT、AST水平、NAS积分、脏器指数、HOMA-IR均显著升高(P<0.05),PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达均降低(P<0.05)。BADGE逆转了黄芩素对NAFLD大鼠的保护作用。结论:黄芩素可通过激活PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路,改善NAFLD大鼠肝功能受损和糖脂代谢异常,减轻胰岛素抵抗。

消癥通络法调节PPARγ相关通路干预动脉粥样硬化的实验研究

目的:通过动脉硬化ApoE^(-/-)小鼠实验,探讨消癥通络法调节PPARγ相关通路干预动脉粥样硬化的作用机制。方法:选取25只C57BL/6小鼠作为空白组,68只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组(24只)、中药组(22只)、对照组(22只),12周后观察小鼠状态,主动脉HE染色、油红O染色观察血管病理变化、斑块面积,并通过免疫组化、Western blot观察血管ox-LDL、PPARγ、CD36、ABCA1蛋白表达情况。结果:(1)一般情况:空白组小鼠状态良好,皮色光亮,活跃,饮食饮水正常;模型组大鼠状态较差,皮毛油腻、晦暗,神情萎靡,饮食稍差,饮水正常;与模型组相比较,中药组及对照组给药后均有不同程度改善。(2)HE染色及油红O病理图片显示:空白组主动脉未见AS斑块;与空白组相比,模型组AS斑块面积显著增大;与模型组相比,对照组、中药组AS斑块面积明显减小。(3)免疫组化法及Western blot检测小鼠主动脉ox-LDL、PPARγ、CD36、ABCA1蛋白表达:与空白组比较,模型组小鼠主动脉PPARγ、ABCA1蛋白表达显著降低,ox-LDL、CD36蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,中药组小鼠主动脉PPARγ、ABCA1蛋白表达明显升高(P<0.05),CD36明显降低(P<0.01),ox-LDL降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论:消癥通络法能够抑制PPARγ介导的CD36信号通路,促进ABCA1信号通路,从而达到改善血管内皮炎症反应,抑制巨噬细胞泡沫化,延缓AS进展的目的。

细胞ABCA1／apoA—Ⅰ转脂途径的研究进展

三磷酸腺苷结合盒转运子(ABCA1)促进胆固醇流向载脂蛋白A1(ap0A—Ⅰ)是调控细胞胆固醇代谢平衡的一个重要环节，特别是在肝细胞和动脉粥样硬化斑块内的巨噬泡沫细胞，apoA—Ⅰ／ABCA1转脂途径决定了胆固醇逆向转运的效率。apoA—Ⅰ与ABCA1触发的信号通路能够稳定膜上ABCA1，为抗动脉粥样硬化(AS)药物设计提供潜在靶点。

HO-1/CO/PPAR-γ信号通路在小鼠动静脉内瘘内膜增生过程中的变化

目的观察HO-1/CO/PPAR-γ信号通路在小鼠动静脉内瘘内膜增生病理损害中的变化规律。方法选取雄性野生型小鼠随机分为模型组及对照组,每组18只。应用显微外科技术建立小鼠颈动静脉内瘘模型(模型组),对照组仅做手术切口缝合。术后21天使用过量戊巴比妥钠处死小鼠,获取血液及病理标本。应用全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白α、总胆红素水平;HE染色检测血管壁变化;应用分子染色方法对标记的活性氧(reactive oxygen species,ROS)进行检测;应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定目标基因血红素加氧酶-1(heme oxygenase,HO-1)、过氧化物酶增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptors-γ,PPAR-γ)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)的mRNA水平;应用Western blot法测定目标基因HO-1、PPAR-γ及MMP-9的蛋白表达;应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游因子转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-8表达水平。结果模型组小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和总胆红素较对照组明显降低,差异具有统计学意义[mmol/L:(3.45±0.32)比(4.03±0.16),(1.62±0.42)比(2.06±0.35),(3.87±0.30)比(5.11±0.26),(0.45±0.04)比(0.65±0.09),(11.28±1.73)比(13.47±0.87),t值分别为-6.88、-3.41、-13.25、-8.62和-4.80,P值均<0.05]。HE染色提示,模型组小鼠静脉壁内膜厚度较对照组明显增厚,血管壁中活性氧ROS水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义[EU/mg:(99.11±6.34)比(89.71±8.41),t=3.79,P<0.05]。与对照组相比,模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路目标基因及蛋白HO-1、PPAR-γ、MMP-9 mRNA表达明显升高,差异具有统计学意义[目标基因:(1.02±0.69)比(7.17±2.16),(0.96±0.04)比(6.75±0.24),(0.61±0.35)比(1.02±0.03),t值分别为11.51、100.96和4.95,P值均<0.05;目标蛋白:(0.07±0.02)比(0.41±0.01),(0.27±0.04)比(0.35±0.05),(0.12±0.02)比(0.45±0.08),t值分别为81.43、5.19和17.39,P值均<0.05]。与对照组相比,模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游炎性因子TGF-β、IL-1β、IL-8分泌明显升高,差异有统计学意义[pg/mL:(3.52±2.92)比(27.46±2.70),(16.78±0.60)比(38.54±2.53),(35.20±1.95)比(101.71±7.75),t值分别为25.53、35.55和35.31,P值均<0.05]。结论HO-1/CO/PPAR信号通路参与了小鼠动静脉内瘘血管内膜增生发生发展过程,并通过提高目标基因、目标蛋白的表达水平,增强相关炎性因子的释放等途径保护内膜功能,减轻血管的损伤。

燕麦纤维通过LXRα/ABCA1信号通路对小鼠肠道胆固醇代谢影响

目的探讨燕麦纤维对脂代谢紊乱小鼠肠道胆固醇代谢的影响及其机制。方法选用6周龄雄性C57BL/6小鼠36只,按体重随机分为3组:阴性对照组、模型对照组和燕麦纤维组,预防性干预24周。实验结束后,检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖和胰岛素水平以及肝组织中TG和TC水平。Western blot法测定小肠组织中肝X受体α(LXRα)、三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)和G1(ABCG1)蛋白的表达水平。结果干预24周后,与模型对照组比较,燕麦纤维组小鼠血清TC、LDL-C水平[分别为(2.02±0.44)、(0.54±0.27)mmol/L]降低,HDL-C水平[(1.05±0.19)mmol/L]升高(P<0.05);燕麦纤维组小鼠空腹血糖[(6.68±1.32)mmol/L)和胰岛素抵抗指数(3.66±1.28)明显下降;燕麦纤维组小鼠小肠上段组织中LXRα、ABCA1、ABCG1蛋白表达量[分别为(0.68±0.14)、(0.96±0.24)、(0.59±0.15)]均明显升高(P<0.05)。结论燕麦纤维可降低脂代谢紊乱小鼠血脂水平,增加肠道胆固醇外流;其机制可能与燕麦纤维上调小肠组织中LXRα、ABCA1和ABCG1的蛋白表达有关。

基于PERK-eIF2α通路探讨冠心康对LDLR-/-高脂血症小鼠血脂的调控机制

目的观察中药复方冠心康对LDLR-/-高脂血症小鼠肝脏PERK-eIF2α信号通路以及ATP结合盒转运子亚家族成员1(ABCA1)和固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)的影响,探讨冠心康对高脂血症的调控机制。方法通过高脂饮食诱导30只LDLR-/-小鼠12周,构建高脂血症模型小鼠后随机分为模型组、冠心康组和辛伐他汀组,以10只同遗传背景的C57BL/6J小鼠为正常组。冠心康组以冠心康煎剂灌胃,辛伐他汀组以辛伐他汀水溶液进行灌胃。各组干预12周取材进行指标检测。生化仪检测血清血脂;HE染色观察肝脏病理形态变化;real-time PCR检测肝脏PERK、eIF2α、SREBP-2、ABCA1基因表达;Western blot法检测肝脏PERK、eIF2α磷酸化水平和SREBP-2、ABCA1蛋白表达。结果与模型组比较,冠心康组和辛伐他汀组的血清TG、TC下降(P<0.05),HDL-C升高(P<0.05),冠心康组和辛伐他汀组对蛋白PERK磷酸化以及SREBP-2水平有下调作用,对ABCA1有上调作用,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论冠心康通过影响SREBP-2和ABCA1的表达,可显著调节LDLR-/-高脂血症小鼠的血脂水平,从而维持肝脏胆固醇稳态的平衡,其作用机制可能与PERK-eIF2α信号通路有关。

淡豆豉异黄酮通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路改善动脉粥样硬化小鼠脂质代谢的作用

目的:通过卵巢切除结合高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化小鼠模型,观察淡豆豉异黄酮(ISSP)对小鼠脂质代谢的影响,并从调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ/肝X受体α/腺苷三磷酸结合盒转运体A1(PPARγ/LXRα/ABCA1)信号通路的角度进一步探讨其作用机制。方法:将50只载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠随机分为模型组、西药组(阿托伐他汀钙,3.03 mg·kg^(-1))、中药低、中、高剂量组(淡豆豉异黄酮,2.5、5、10 mg·kg^(-1)),每组10只,以手术切除双侧卵巢同时喂食高脂饲料的方法制备动脉粥样硬化模型小鼠,另取10只ApoE^(-/-)小鼠,以手术切除卵巢旁脂肪同时喂食高脂饲料的方法作为假手术组,其中部分小鼠因术后感染死亡,最终确定每组为6只小鼠,术后1周开始各组灌胃相应药物或等量生理盐水。12周后检测血清及肝脏组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)的含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;苏木素-伊红(HE)及油红O染色观察主动脉斑块形成及肝脏脂质沉积情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1 mRNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α及IL-6含量显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);肝脏指数明显升高(P<0.05),肝脏脂肪空泡明显,脂质沉积显著,肝脏中TC、TG、NEFA含量显著增多(P<0.01);肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),ABCG1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,服用阿托伐他汀钙和淡豆豉异黄酮中、高剂量组可使小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);肝脏指数显著降低(P<0.01),肝脏脂肪空泡及脂质沉积显著减少,肝脏中TC、TG、NEFA含量明显增多(P<0.05,P<0.01);肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:淡豆豉异黄酮可能通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路调节脂质代谢,减少血清炎症表达及肝脏脂质沉积从而改善动脉粥样斑块的形成。

不同产地乌药质量评价及其改善IBS-D大鼠肠道低度炎症的机制研究

目的基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对10批次不同产地乌药进行质量评价,并进一步探究乌药对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)大鼠肠道低度炎症的作用机制。方法采用HPLC对10个不同批次乌药进行质量评价。选取雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、IBS-D模型组、乌药低剂量组、乌药中剂量组、乌药高剂量组、阳性药物组。除对照组外,其余大鼠均接受“番泻叶灌胃联合束缚应激”刺激,构建IBS-D大鼠模型。乌药低、中、高剂量组大鼠分别灌胃乌药水提物(0.94、1.88、3.76 g·kg-1),阳性药物组大鼠予以匹维溴铵片水溶液(1.5 g·kg-1);而对照组和IBS-D模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水,共计2周;采用HE染色、PAS染色观察大鼠结肠变化;运用免疫组织化学法和Western blot技术检测大鼠结肠组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecular-1,VCAM-1)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶(proto-oncogene tyrosine-protein kinase Src,SRC)、Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)蛋白的相对表达水平。结果相似度评价、聚类结果和主成分分析结果显示,除浙江乌药(S6)外,其余批次乌药质量从整体上而言稳定可靠。HE染色和PAS染色结果显示,与对照组相比,IBS-D模型组大鼠结肠隐窝深度明显变浅、隐窝处杯状细胞数量明显减少;与IBS-D模型组相比,中、高剂量的乌药水提物能明显改善IBS-D大鼠结肠组织隐窝深度变浅及杯状细胞减少的状态;免疫组织化学和Western blot结果显示,3个剂量组的乌药水提物均可显著增强IBS-D大鼠结肠中PPAR-γ、YAP和SRC蛋白的相对表达量(P<0.05),同时能显著降低VCAM-1蛋白的相对表达量(P<0.05)。结论不同批次的乌药化学成分和含量差异不大,乌药能显著改善IBS-D大鼠低度炎症,其作用机制可能与调控PPAR-γ/VCAM-1有关。

ABCA1对滋养细胞基因表达谱的影响

该文从基因学角度探讨了ABCA1对人滋养细胞功能的影响。在人滋养细胞中调控ABCA1的表达,通过表达谱芯片检测ABCA1表达改变后滋养细胞中基因及相关信号通路的改变,Western blot及qRT-PCR验证芯片结果。结果显示,上调ABCA1表达时,有197个基因表达升高,有190个基因表达下降;而下调ABCA1表达时,有335个基因表达升高, 459个基因表达下降。GO和KEGG分析表明, ABCA1表达上升或下降后可导致滋养细胞内多个信号通路发生改变。qRT-PCR及Western blot检测发现,与阴性对照组相比, ABCA1上调后细胞中S1PR1的m RNA及蛋白水平明显升高,而CCL8、CXCL10与CXCL11的mRNA及蛋白水平明显降低;下调ABCA1的表达后,细胞中S1PR1的mRNA及蛋白水平明显降低,而CCL8、CXCL10与CXCL11的mRNA及蛋白水平明显升高,与芯片的结果完全一致。这些结果表明, ABCA1可通过调控多个信号通路而影响滋养细胞功能。