化瘀祛痰方对高脂血症合并肝癌小鼠PPP途径及脂肪酸合成的影响研究

目的观察化瘀祛痰方对高脂血症合并肝癌小鼠磷酸戊糖(pentose phosphate pathway,PPP)途径及脂肪酸合成的影响。方法将60只Balb/c小鼠随机分为正常组、肝癌组、高脂合并肝癌组、化瘀祛痰方低、中、高剂量组。空白对照组和肝癌组予普通饲料喂养,高脂合并肝癌组及中药组予高脂饲料喂养。12周后肝脏原位注射H22肝癌细胞造模,空白对照组注射等量生理盐水。造模成功后,中药组予化瘀祛痰方中药7.60 g/kg、15.20 g/kg、30.40 g/kg灌胃,其余各组予等量生理盐水。3周后HE染色观察肝脏组织病理变化;全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇酯(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇酯(HDL-C)的含量;ELISA法检测各组小鼠血清甲胎蛋白(AFP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;Wes法及Realtime RT-PCR法检测葡萄糖转运蛋白(GLUTs)、己糖激酶(hexokinase,HK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)、转酮醇酶(transketolase,TKTL)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl Co A carboxylase,ACC)蛋白及mRNA表达。结果HE染色显示,肝癌组小鼠肝脏肝索排列紊乱,肝小叶结构不清,出现空泡样变性结构;高脂合并肝癌组除上述表现外,肝细胞出现脂肪空泡,脂肪性变明显,部分肝细胞胞浆出现液化、退变甚至被吸收消失;与空白对照及肝癌组比较,高脂合并肝癌组血清TC、TG、LDL-C、AFP、AST、ALT含量均显著升高,HDL-C含量降低;GLUT4、HK2、G6PD、TKTL1、ACC蛋白及mRNA表达增加(P<0.05或P<0.01)。中药干预后,肝索排列紊乱程度有所改善,肝小叶结构较为清晰,脂肪空泡减少,肝细胞的液化、退变现象明显比高脂合并肝癌组减少;血清TC、TG、LDL-C、AFP、AST、ALT含量均显著下降,HDL-C含量升高;GLUT4、HKⅡ、G6PD、TKTL1、ACC蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01)。结论化瘀祛痰方可能通过影响PPP途径和脂肪酸合成,减轻高脂血症对肝癌的影响,从而防治原发性肝癌。

钙镁叶面肥混合喷施减轻“妃子笑”荔枝果实“退糖”现象原因分析

“妃子笑”荔枝成熟期存在果肉“退糖”现象,前期研究表明叶面喷施钙镁混合肥可有效减缓果肉“退糖”,抑制果肉呼吸作用是原因之一。本文拟探讨叶面喷施钙镁肥对“妃子笑”荔枝果肉磷酸戊糖途径(PPP)呼吸速率的影响,分别进行树冠喷布0.3%CaCl_(2)、0.3%MgCl_(2)、0.3%CaCl_(2)+0.3%MgCl_(2)水溶液及清水(对照)等4个处理,测定和比较不同发育期果肉可溶性糖含量、钙镁含量、PPP途径呼吸速率及其关键酶活性等的动态变化。结果表明,除0.3%CaCl_(2)+0.3%MgCl_(2)水溶液处理减缓果肉“退糖”现象外,其余处理果肉均出现“退糖”现象。推测0.3%CaCl_(2)+0.3%MgCl_(2)处理通过抑制PPP关键酶活性进而抑制PPP呼吸速率,从而抑制总呼吸速率,减少果肉糖分呼吸损耗。