外源胰岛素和能量限饲对鸡PPP1R3C表达的效应

旨在检测PPP1R3C在爱拔益加肉鸡不同组织中的表达情况,探究外源胰岛素和能量限饲对鸡体胰岛素敏感组织中PPP1R3C表达的影响。试验一,取不同发育阶段的雌性肉鸡(E14、E19、D7和D21,n=10)组织样,通过qRT-PCR技术检测PPP1R3C在不同时期胸肌中的表达;试验二,腹腔注射胰岛素(INS)或PBS,取两组注射后不同时间点(0、15、120和240 min,n=5)的D24雄性肉鸡组织样,检测PPP1R3C在肉鸡不同组织中的表达,探究外源胰岛素处理对肉鸡胰岛素敏感组织中PPP1R3C表达的影响;试验三,取D18雌性肉鸡,一组饲喂常规日粮(n=20),另一组饲喂限制30%能量的日粮(n=20),饲喂至48天屠宰取样,探究30%能量限饲对肉鸡PPP1R3C表达的影响;试验四,D7雌性肉鸡随机分为3组,对照组、15%能量限饲组和15%蛋白限饲组(n=10),分别饲养至D21屠宰取样,探究能量限饲是否具有剂量依赖性。结果表明:1)PPP1R3C在胸肌组织中高表达,其次是心和腿肌组织(P<0.05)。2)PPP1R3C表达量呈现了明显随鸡发育而升高的趋势。3)INS注射显著下调了胸肌中PPP1R3C的表达,在注射后120 min时PPP1R3C的表达显著低于0和15 min(P<0.05);PBS注射后胸肌中PPP1R3C的表达没有显著差异,在注射后120和240 min时,INS组PPP1R3C表达显著低于PBS组(P<0.05)。INS注射也降低了肝中PPP1R3C的表达,在INS处理15 min时PPP1R3C的表达已显著低于0 min(P<0.05);PBS注射后肝中PPP1R3C表达处于动态平衡,在注射后120 min时,INS组PPP1R3C表达显著低于PBS组(P<0.05)。胰岛素注射后在腹脂中出现了与胸肌和肝相反的结果,在胰岛素注射后15 min时PPP1R3C的表达显著高于0、120、和240 min(P<0.05),而0、120、和240 min之间没有显著差异;PBS注射后腹脂中PPP1R3C表达没有显著变化,在注射后15 min时,INS组PPP1R3C表达量显著高于PBS组(P<0.05)。4)30%能量限饲导致PPP1R3C在胸肌和肝中的表达均显著下调(P<0.05)。5)15%能量限饲和15%蛋白限饲不能显著影响胸肌中PPP1R3C的表达。以上研究表明,PPP1R3C在胸肌中表达最高,并随着个体发育表达上升,且外源胰岛素对PPP1R3C的表达效应具有明显的组织特异性。30%能量限饲可产生类似于外源胰岛素的效应,且能量限饲存在一定的剂量依赖性,本研究结果为进一步揭示鸡PPP1R3C功能奠定了基础。

PPP1R3C基因在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的功能研究

为研究小鼠的蛋白磷酸酶1调节亚基3C(protein phosphatase 1 regulatory subunit 3C,PPP1R3C)基因在脂肪细胞分化中的功能,本研究以小鼠3T3-L1前脂肪细胞为材料,通过基因过表达、干扰及实时定量PCR等实验,分析了PPP1R3C基因对成脂分化的影响,并初步探讨了它对成脂分化影响的机制。结果显示,在3T3-L1前脂肪细胞中,过表达PPP1R3C基因,可促进脂肪细胞分化和成脂标志基因的表达;而敲低PPP1R3C基因的表达,则抑制脂肪细胞的分化和成脂标志基因的表达。进一步研究发现在3T3-L1中敲低固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBP1)基因的表达,则PPP1R3C基因的表达也下调,提示PPP1R3C影响成脂分化可能是通过SREBP1对PPP1R3C的调控来实现的。以上结果表明,PPP1R3C对3T3-L1前脂肪细胞分化具有促进作用,PPP1R3C是一个新的成脂分化调控因子。