PPP2R3A基因在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义

目的探讨蛋白磷酸酶2A调节亚基B''α(protein phosphatase 2 regulatory subunit B″alpha,PPP2R3A)在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义。方法利用免疫组织化学方法检测PPP2R3A蛋白在70例乙肝相关性肝癌和40例良性肝病组织中的表达,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测PPP2R3A在肝癌患者外周血中的蛋白水平表达,运用统计学方法分析PPP2R3A蛋白水平的表达与乙肝相关性肝癌临床病理学指标的关系。结果PPP2R3A蛋白在肝癌组织中的表达主要定位于细胞质,其在肝癌组织中的表达明显高于癌周组织(P<0.001),并且PPP2R3A蛋白在肝癌组织中的表达明显高于良性肝病(P<0.001)。PPP2R3A蛋白的表达强度与肝癌患者的AFP值(r=0.256,P=0.032)具有统计学差异。ELISA结果也显示PPP2R3A蛋白在肝癌患者外周血中的表达量明显高于其在良性肝病中的表达(P=0.033),与免疫组织化学结果一致。结论PPP2R3A蛋白在乙肝相关性肝癌组织及血清中呈高表达,且与肝癌的临床病理特征有相关性,可能与肝癌的发生发展有关。

过表达蛋白磷酸酶的调节亚基B″α基因对肝癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究过表达蛋白磷酸酶2A的调节亚基B″α对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法通过免疫组织化学法分析癌组织及癌周组织中PPP2R3A表达;用慢病毒载体构建稳定过表达PPP2R3A的肝癌细胞系(Huh-7和HepG2),通过CCK-8,流式细胞仪、transwell小室实验分别检测稳转肝癌细胞系增殖、周期、凋亡以及侵袭转移的生物学行为的改变,并构建裸鼠皮下瘤模型验证肝癌细胞生长情况。计量资料组间比较用/检验。结果人肝癌癌组织中PPP2R3A基因的表达高于癌旁;过表达PPP2R3A基因后,肝癌细胞的吸光度值⑺值)增加(P<0.05),细胞周期G期向S期转换显著增多,即细胞周期S期减少(Huh-7:t=3.04,P=0.0384,HepG2:t=4.06,P=0.0153),S期增多(Huh-7:t=3.47,P=0.0255;HepG2:t=4.46,P=0.0112);早期凋亡率减少(Huh-7:t=7.34,0.0018;HepG2:t=4.06,P=0.0153);Huh-7细胞中,迁移到下室的数目明显增多(t=3.18,P=0.0334),铺上基质胶后到达下室的细胞数目同样增多(t=2.84,P=0.0464),动物实验结果显示其过表达组的裸鼠皮下瘤生长显著增加(t=4.31,P=0.0035).蛋白质印迹法实验结果显示剪切体的PARP和P53蛋白表达减少,而β-catenin蛋白在肝癌细胞的积累增多。结论过表达PPP2R3A基因可能促进肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力,抑制凋亡,诱导G1/S期转换,参与影响肝癌细胞生物学行为。