利用PCR-SSCP对新疆甜菜坏死黄脉病毒RNA2变异的研究

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和单链构象多态性(SSCP)分析技术,对新疆不同地区的甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA2的区间进行分析,12个BNYVV分离物和美国的BN-TX及我国黑龙江的He分离物通过RT-PCR扩增后都能得到一段590bp左右大小的片段;通过SSCP分析,12个分离物既不同于美国的BN-TX分离物,也不同于黑龙江的He分离物,可分为4个变异类型,S1和S2归为Ⅰ类,T3、T6、T7和T8归为Ⅱ类,K1、K2、K4和K5归为Ⅲ类,Q1和Q2归为Ⅳ类,初步明确了新疆BNYVV分离物存在着分化,而且有明显的地域分布性。

白血病细胞WT瘤基因突变的检测

目的 瘤基因 (WT1)突变与白血病发病的关系。方法 采用PCR -SSCP技术检测 32例白血病病人标本 ,其中小于 16岁的患者 9例 ,成人 2 3例 (平均年龄 33岁 ) ;急性淋巴细胞白血病 15例 ,慢性粒细胞性白血病 8例 ;18例正常人血标本。结果 有 3例白血病标本的PCR产物即WT1基因电泳迁移异常 :1例为急性淋巴细胞白血病患者、2例为急性粒细胞性白血病患者 ;分别位于外显子 7、6和 10。临床追踪观察发现该 3例白血病患者经化疗未能达到完全缓解 ,全部于发病后 3个月内死亡 ,而WT1基因正常的白血病患者经化疗后大多数能达到部分缓解或完全缓解 ,生存期明显延长。正常血标本PCR产物和SSCP结果无明显异常。结论 WT1基因突变与白血病发病有关 ,有助于白血病辅助诊断和预后的分析。