FOS样抗原1对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和PRDM10基因甲基化的影响

目的构建FOS样抗原1(FOSL1)基因沉默的载体,研究FOSL1对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和侵袭的影响,以及对此细胞中PRDM10基因的甲基化状态的影响。方法 FOSL1沉默的pLVX-sh RNA-FOSL1-sh RNA干扰质粒载体,采用慢病毒感染法分别用p LVX-sh RNA-FOSL1-sh RNA载体以及pLVX-sh RNA空载的两种病毒感染靶细胞MDA-MB-231,分别记作转染组和空载组。以未转染的MDA-MB-231作为对照组。RT-PCR验证FOSL1表达后,分别采用MTT实验和Transwell实验检测MDA-MB-231的细胞增殖能力和侵袭能力。采用MSP法检测PRDM10基因的甲基化状态。Q-PCR和Western blot分别检测PRDM10的mRNA和蛋白质表达水平。结果MTT实验显示,24 h、48 h和72 h时,转染组MDA-MB-231的OD值低于对照组(均P<0.05);48 h和72 h时,转染组MDA-MB-231的OD值低于空载组(均P<0.05)。Transwell实验显示,与空载组和对照组相比,转染组的MDA-MB-231细胞侵袭能力降低(均P<0.05)。MSP实验显示,与空载组和对照组相比,转染组的MDA-MB-231细胞中PRDM10基因甲基化水平降低。Q-PCR和Western blot实验显示,与空载组和对照组相比,转染组PRDM10的mRNA和蛋白质表达水平均升高。结论 FOSL1基因沉默抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭,可能与该细胞中PRDM10基因的去甲基化有关。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人乳腺癌细胞Hs578T增殖和PRDM10基因甲基化的影响

目的分析5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-Cd R)对体外培养的人乳腺癌细胞Hs578T增殖的影响,及其对此细胞中PRDM10基因甲基化状态的影响。方法分别采用浓度为0、1、3、5μmol/L的5-Aza-Cd R处理体外培养的人乳腺癌细胞系Hs578T。MTT实验检测细胞增殖情况,甲基化特异性PCR(MSP)法检测PRDM10的甲基化状态;RT-PCR和Western blot分别检测PRDM10的m RNA和蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,5-Aza-Cd R的浓度越高、处理时间越长,对Hs578T细胞增殖的抑制作用越显著。与0μmol/L组比较,1μmol/L组处理72 h后及3、5μmol/L组处理48 h后,Hs578T的增殖受到显著抑制(P<0.05)。MSP结果显示,5-Aza-Cd R的浓度越高,对PRDM10的去甲基化作用越显著。RT-PCR和Western blot结果显示,5-Aza-Cd R的浓度越高,PRDM10的m RNA和蛋白表达水平越高(P<0.05)。结论 5-Aza-Cd R可抑制Hs578T细胞的增殖,可能与该细胞中PRDM10基因的去甲基化作用有关。

浅表CD34阳性纤维母细胞肿瘤研究进展

浅表CD34阳性纤维母细胞肿瘤(SCPFT/SCD34FT)是近年来新认识的一种罕见的间叶源性肿瘤,主要发生于下肢皮下浅表软组织内,患者常因发现包块数年后渐进增大伴疼痛就诊,临床上无特殊表现及实验室检查指标,确诊依靠病理学。镜下表现为形态相对温和的梭形细胞中混杂大量怪异核的多形性细胞,核仁清晰,核分裂像罕见(≤1个/50HPF),可出现核内假包涵体,部分细胞质丰富颗粒状、玻璃状嗜酸性,未见坏死。免疫组织化学弥漫表达CD34、Vimentin、WT1及CADM3/SynCAM3,Ki-67增值指数<1%。约42%病例存在PRDM10基因重排。该肿瘤整体预后良好,少数病例可出现复发或淋巴结转移,未见死亡病例报道。文章总结和归纳SCPFT的特征,以期为临床诊治提供参考。

浅表性CD34阳性纤维母细胞瘤1例并文献复习

通过收集患者的临床信息、对送检组织行HE切片、免疫组织化学染色及基因检测观察,综合相关文献总结浅表性CD34阳性纤维母细胞瘤(superficial CD34 positive fibroblastic tumor,SCPFT)的临床病理特征、免疫组织化学和与其他疾病的鉴别诊断特点。患者男,54岁,于2个月前无意中发现右下腹部包块1枚,切除肿块行组织活检,肿块边界清,无包膜,镜下肿块位于真皮深层,边界相对清楚,肿瘤由梭形细胞、胖梭形细胞及多边形细胞组成,呈束状或片状排列,局部可见奇异形或多形性细胞核,部分瘤细胞细胞质呈空泡状及黄色瘤样;核分裂罕见,间质内淋巴细胞散在或局灶浸润;免疫组织化学:CD117(-)、CD34(+)、CD68(少数+)、Desmin(灶区+)、SMA(-)、β-catenin(细胞质+)、MyoD1(-)、Ki-67(1%+),荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测出PRDM10易位。浅表性CD34阳性纤维母细胞瘤是一类新报道的纤维母细胞肿瘤的新亚型,其典型的特点为CD34弥漫阳性,但组织学形态与其他间叶性肿瘤有较多的相似之处,需要结合PRDM10基因易位与非典型性黄色纤维瘤、上皮样肉瘤和其他软组织肿瘤所鉴别,提高对该疾病的认识并准确诊断出该类疾病,对临床治疗至关重要。