低剂量2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞中PRDM1基因两种同源异构体表达的影响

目的探讨低剂量2-甲氧基雌二醇（2ME2）诱导骨髓瘤细胞分化过程中对PRDMl基因两种同源异构体（包含PR结构域的PRDM1α和缺失PR结构域的PRDM1β）表达的影响。方法以人骨髓瘤细胞系NCI—H929、RPMI8226、KM3和LP—1细胞作为研究对象，采用实时定量RT—PCR方法检测低剂量2ME2（终浓度0．5μmol／L）作用前后PRDM1α和PRDM1β的表达情况。结果0．5μmol／L2ME2处理后，在4个MM细胞系中均出现PRDM1基因表达上调，两种同源异构体的表达水平随着2ME2作用时间的延长均有不同程度的增加，并且PRDM1α／PRDM1β比值显著上升，存NCI-11929细胞PRDM1α/PRDM1β比值由基础值1．461±0．033上升至作用72h时的2．663±0．381（P〈0．01），RPMI8226细胞由1．929±0．334上升至2．727±0．362（P〈0．05）、KM3细胞由1．471±0．012上升至4．367±0．243（P〈0．01）、LP-1细胞由1．660±0．042上升至3．059±0．167（P〈0．01）。结论低剂量2ME2诱导骨髓瘤细胞发生分化的同时上调PRDM1α和PRDM1±的表达，但是具有潜在抑癌作用的PRDM1α上调程度更加显著，因而PRDM1αc/PRDM1β比值随着2ME2作用时间的延长显著上升，与细胞分化程度呈正相关，并且与PRDM基因家族的正、负作用机制相符合。

抑癌基因PRDM1在结外NK/T细胞淋巴瘤-鼻型中的表达及其与PI3K/AKT通路活化的关系

目的探讨抑癌基因PRDM1在结外NK/T细胞淋巴瘤-鼻型(EN-NK/T-NT)中的表达及其与P13K/AKT通路活化的关系。方法以10例EN-NK/T-NT患者病理组织标本和PRDM1阳性细胞系YT细胞、PRDM1缺失细胞系NKL、NK92细胞为研究对象,采用免疫细胞化学和Westem blot法检On,0PRDM1、P-AKT的表达,采用NanoString基因表达谱技术检测P13K/AKT通路在正常鼻黏膜、PRDM1阴性和阳性EN-NK/T-NT组织中的激活情况,采用MTS法检测YT、NKL和NK92细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果①NanoString基因表达谱分析结果显示PRDM1阳性组P13K/AKT信号通路IL-7、BRCAI、ITGA8、IL2RB、FASLG、CDK2、COL27A1、CSF3R、KITLG、IL-6的表达明显高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。②免疫细胞化学和Westernblot法检测结果显示P-AKT在YT细胞系中高表达,而在NK92和NKL细胞中低表达或不表达。③Westemblot法检测结果显示,P13K/AKT通路抑制剂LY294002作用24h后YT细胞PRDMl和PTEN的表达水平升高,且呈剂量依赖性。④Ly294002(20μmol/L)作用48h后,与对照组比较,YT细胞增殖率较对照组明显降低(100.00%对58.18%,t=-12.770,P=0.006),G1期细胞比例明显增高(30.05%对76.93%,t=11.570,P<0.001),差异均有统计学意义;但NKL细胞与对照组比较细胞增殖和细胞周期的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论EN-NK/T-NT中P13K/AKT通路活化与PRDM1阳性表达相关,抑制P13K/AKT通路有望成为PRDM1阳性EN-NK/T-NT的治疗手段。