子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2基因表达和临床意义

目的观察子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2基因表达并分析其临床意义。方法选取2016年3月至2018年1月于郑州人民医院诊治的子宫内膜异位症患者102例为试验组,另选取同期本院收治的98例子宫肌瘤患者为对照组。qRT-PCR法检测两组子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2mRNA表达量,Western blot法检测子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2蛋白表达情况,观察患者临床指标并分析其与ID2、PRELP、SMOC2的相关性,制作受试者工作特征曲线(ROC),分析ID2、PRELP、SMOC2在子宫内膜异位症中的诊断效能,Logistic多元回归分析影响子宫内膜异位的相关因素。结果试验组患者子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2mRNA表达量及蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组患者子宫内膜组织中ID2与VEGF、IL-1β及CA125呈正相关(P<0.05),PRELP与VEGF、TNF-α及CA125呈正相关(P<0.05),SMOC2与IL-1β及CA125呈正相关(P<0.05);ROC曲线分析显示,子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2对子宫内膜异位症具有临床诊断价值;Logistic多元回归分析显示,子宫内膜组织中ID2、PRELP及SMOC2均为子宫内膜异位症患者的危险因素。结论子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中ID2、PRELP、SMOC2基因表达升高,且与患者临床指标呈正相关,三者均参与病情发生进展过程,可作为临床诊断及监测子宫内膜异位症的重要指标。

PRELPshRNA稳定转染Saos-2细胞系的构建及鉴定

目的构建PRELP（proline/arginine-rich end leucine-rich repeat protein）基因sh RNA慢病毒表达载体,并对其在Saos-2细胞中沉默效果进行鉴定。方法针对PRELP m RNA设计2对干扰序列,化学合成后插入至慢病毒载体,将慢病毒载体以不同MOI值分别转染Saos-2细胞,筛选细胞内GFP阳性率最高MOI值。将合成的慢病毒载体以筛选出的MOI值分别转染细胞,嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株,Western blot法验证两株稳定转染细胞株PRELP下调效率。结果成功构建PRELP sh RNA慢病毒载体,当MOI为50-70时,细胞内荧光蛋白表达阳性率最高;嘌呤霉素筛选到稳定转染的细胞株;构建的稳转细胞系均特异性抑制PRELP蛋白的表达。结论成功构建了PRELP sh RNA慢病毒载体,并建立稳定的Saos-2细胞PRELP下调表达细胞模型,为研究PRELP在骨关节炎中的作用奠定了基础。