Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

为优化大豆分离蛋白酶水解条件,本试验采用二次回归正交旋转组合设计方法对Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的条件进行研究。建立了水解度(DH)与pH值、反应温度、反应时间、底物浓度、酶与底物浓度比之间的数学模型;并获得最佳水解工艺条件:pH值6.5,温度40℃,水解时间10h,底物浓度14%,酶与底物浓度比4.5%;主成分分析表明,pH对DH的贡献率最大。

Protamex复合蛋白酶酶解猪骨粉最佳条件研究

以SN-TCA指数法作为多肽生成量的评价指标,研究Protamex复合蛋白酶酶解猪骨粉的最佳条件,正交实验结果表明,最佳工艺参数是酶用量0.40g,水解时间12h,pH为7,水解温度为50℃。

Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

为进一步优化大豆分离蛋白酶水解条件,本试验采用二次回归正交旋转组合设计方法对Protamex复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的条件进行研究。建立了水解度(DH)与pH值、反应温度、反应时间、底物浓度、酶与底物浓度比之间的数学模型;并获得最佳水解工艺条件:pH值6.5,温度40℃,水解时间10hr,底物浓度14%,酶与底物浓度比4.5%;主成分分析表明,pH对DH的贡献率最大。

Protamex复合蛋白酶水解牛肉的研究

为优化牛肉酶水解条件,本试验采用响应面法对Protamex复合蛋白酶水解牛肉的条件进行研究。建立了水解度(DH)与pH值、反应温度、反应时间、固液比、酶与底物浓度比之间的数学模型;并获得最佳水解工艺条件:pH值6.4,温度54℃,水解时间6h,固液比1∶5.2,酶与底物浓度比2%。

超声波辅助复合蛋白酶对冬菜扣肉品质的影响研究

以冬菜扣肉为研究对象,为缩短传统冬菜扣肉加工过程的蒸制时间,减少经济能耗,确定冬菜扣肉的工业化生产,采用超声波和蛋白酶对冬菜扣肉的鲜肉进行预处理,以剪切力和感官评分为测定指标,利用响应面实验优化出超声波辅助复合蛋白酶的最佳工艺条件.结果表明:在复合蛋白酶(木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶)比例为2∶1,添加量为420 U/mL,嫩化温度为38℃,嫩化时间为33 min时嫩化效果最佳,冬菜扣肉的剪切力最小,感官评分最高.

基于角蛋白酶和纳米电气石粉改进的复合酶制剂脱毛工艺研究

为改善复合酶的脱毛效果,采用TRIZ进行系统、功能和资源分析,应用物场理论提出了引入角蛋白酶和纳米电气石粉的解决方法,并运用单因素法和正交设计法对改进的复合酶制剂配方进行优化。试验结果表明,改进的复合酶制剂最佳配比为:复合酶A 0.6%、角蛋白酶K 0.2%和电气石粉1.0%;该复合酶制剂适用于现有酶脱毛工艺,脱毛率>95%,粒面完整性好,脱毛效果极佳。这为减少污染、提升脱毛工序的生态性能提供了新途径。

复合蛋白酶交联酶聚集体制备枸杞蛋白多肽

该研究利用交联酶聚体技术制备出复合蛋白酶交联酶聚体固定化酶,以酶活回收率为指标,通过单因素实验得到复合蛋白酶交联酶聚集体最佳制备条件:风味蛋白酶与木瓜蛋白酶比例为3∶1,沉淀剂硫酸铵浓度为60%,戊二醛浓度0.5%,交联时间为50分钟,交联pH为7.5。此时最大酶活回收率为80.32%。相比单一蛋白酶,复合蛋白酶交联酶聚集体具有更好的热稳定性和pH稳定性,同时表现出良好的连续多次水解枸杞蛋白的性能。以蛋白水解度为指标,优化后复合蛋白酶交联酶聚集体最佳水解条件为:温度为60℃,pH为6,酶浓度为10 mg/mL,水解时间为100 min,在此条件下枸杞蛋白水解度为41.21%,比游离复合蛋白酶提高了6.9%。

Protamex复合蛋白酶酶解猪骨动力学模型的建立

研究采用均匀实验优化了Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺,并利用SPSS软件对酶解过程进行数学模拟,得到了Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的动力学模型,同时测定了米氏常数Km与最大反应速率Vmax。结果表明,酶解时间5.7h,酶解温度45℃,pH为7.6,加酶量0.49%,料液比为1:22.7时,水解度最大为10.21%;酶解动力学方程为Y=1.918lnx-0.779,符合对数方程;Km=221.27mmol/L,Vmax=0.1448mmol/L·min。

Protamex复合蛋白酶酶解珠蛋白的研究

以酸化丙酮法从猪血中提取的珠蛋白为原料,探讨了酶用量、珠蛋白浓度、温度、pH值及作用时间对水解度的影响。结果表明,Protamex复合蛋白酶水解珠蛋白的适宜条件为pH6.5,温度为45℃,Protamex复合蛋白酶用量为0.0915 Au/g,底物浓度3%,水解时间6h。改善了珠蛋白在中性条件下的溶解性。

Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺研究

研究并优化采用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺条件。以酶解温度、时间、pH值、加酶量、料液比为因素,以水解度为指标,采用正交试验对酶解工艺参数进行优化。结果表明,利用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的最佳条件是:酶解温度45℃、pH7.0、酶解时间6 h、加酶量0.4%(W/W)、料液比1∶10(W/V)。在此条件下,水解度可达到10.08%。研究结果为工业化猪骨副产物的综合利用提供理论依据和技术支持。

Protamex复合蛋白酶水解鸡蛋蛋清蛋白工艺优化

探讨Protamex复合蛋白酶水解鸡蛋蛋清蛋白时的最佳工艺条件。试验以水解度和蛋白质残留量为指标,研究水解温度、酶用量、pH及蛋清浓度对水解条件的影响,并通过正交试验来确定最佳工艺参数。结果发现,在温度55℃、pH7.0、酶量为7%、蛋清浓度为1:5条件下,蛋白质残留量为6.88%,水解度达7.40%,水解物的相对分子质量集中在500以下,这部分小肽极易被人体吸收且不会引起过敏反应。

麦芽协同复合蛋白酶催化玉米蛋白水解物制备及抗氧化活性研究

研究了麦芽协同复合蛋白酶水解玉米蛋白粉的条件,并分析了水解物的抗氧化活性。结果表明:最佳条件为先用麦芽水解,在底物质量浓度150 g/L、麦芽添加量15 g/100g、pH 5.5、温度50℃条件下水解3 h;然后用复合蛋白酶水解,在加酶量1.3 g/100 g、pH 8.0、温度60℃条件下水解2.5 h。在此条件下,蛋白质回收率为50.18%±0.24%,相比于不加麦芽,蛋白质回收率提高了11.16%。水解物蛋白质量浓度为1 mg/mL时,亚铁离子螯合率、DPPH·清除率、·OH清除率和·O_(2)^(-)清除率分别为83.90%±0.38%、51.19%±1.07%、79.30%±0.63%和35.68%±0.51%,相比于不加麦芽,亚铁离子螯合率降低0.85%,DPPH·清除率、·OH清除率和·O_(2)^(-)清除率分别提高了8.13%、24.41%和64.73%。

复合蛋白酶对肉鸡生长性能、养分利用率和氮排放量的影响

试验旨在研究复合蛋白酶对肉鸡生长性能、养分表观消化率和氮排放量的影响。选取体况良好、体重相近的1日龄商品代艾拔益加(AA)肉鸡216只,随机分为2组,每组6个重复,每个重复18只(公母各半),分前期(0~21 d)和后期(22~42 d)。对照组饲喂基础日粮,试验组2个阶段在基础日粮中分别添加150 mg/kg和300 mg/kg复合蛋白酶制剂(酸性蛋白酶5000 U/g、中性蛋白酶5000 U/g、碱性蛋白酶2000 U/g)。结果表明:0~21 d,复合蛋白酶对肉鸡生长性能无显著影响;22~42 d,与对照组相比,复合蛋白酶组提高了肉鸡采食量、日增重和42 d末重(P<0.05),死淘率从6.67%下降到2.22%;全期(0~42 d),复合蛋白酶组提高了肉鸡采食量和日增重(P<0.05),死淘率从7.78%下降到3.33%,欧洲指数从285.98提高到330.84;复合蛋白酶组的表观代谢能较对照组提高了3.1%,粗蛋白质利用率较对照组提高了11.1%;复合蛋白酶组粪尿中氮排放率和单位采食量的氮排放量均降低(P<0.05)。由此可见,在肉鸡2个生长阶段日粮中分别添加150 mg/kg和300 mg/kg复合蛋白酶可以改善能量利用效率和粗蛋白质利用效率,促进生长性能,降低粪尿中氮排放。

复合蛋白酶对白羽肉鸡生产性能、屠宰性能及肉品质的影响

为探究复合蛋白酶在降低日粮蛋白质水平时对白羽肉鸡生产性能、屠宰性能及肉品质的影响,选取1日龄的Cobb500白羽肉鸡135只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复15只鸡,对照组为NRC蛋白水平日粮组,A组和B组分别为低1%蛋白水平添加复合蛋白酶A和复合蛋白酶B200g·t^(-1),饲喂42d,测定肉鸡的生长性能、屠宰性能和肉品质。结果表明:肉鸡1~21日龄,复合蛋白酶A组和B组均未能改善肉鸡生产性能;在22~42日龄,复合蛋白酶组的平均日增重提高,料重比显著降低(P≤0.05)。复合蛋白酶A和B对42日龄肉鸡的屠宰性能无显著影响(P>0.05)。复合蛋白酶A组显著减缓鸡肉的pH24h下降(P≤0.05);复合蛋白酶制剂组胸肌滴水损失有降低趋势,但差异不显著(P>0.05);复合蛋白酶A组的24h肉色黄度(b^(*))显著高于对照组和复合蛋白酶B组(P≤0.05)。说明降低日粮1%蛋白质水平,添加复合蛋白酶A和B200g·t^(-1),未能改善1~21日龄白羽肉鸡的生产成绩,但在22~42日龄,能提高白羽肉鸡的日增重和显著降低料重比(P<0.05),并在一定程度上减缓肉品pH下降,延长肉鲜味,同时起到降本增效作用。经综合评价,复合蛋白酶B的效果好于复合蛋白酶A。

Protamex蛋白酶水解小麦面筋蛋白的工艺及产物抑菌作用的研究

采用Protamex复合蛋白酶水解小麦面筋蛋白制备抗菌肽.以抑菌率为指标,以大肠杆菌为目标菌,考察了反应温度、pH、水解时间、底物质量分数、加酶量等因素对抗菌肽生成的影响,在单因素分析的基础上通过正交试验得出小麦面筋蛋白抗菌肽的最佳水解工艺条件:温度55℃、pH9.0、加酶量200 mg/g、底物质量分数2.0%,在此条件下得到的抗菌肽对大肠杆菌的抑菌率为7.2%.抑菌试验结果表明:抗菌肽对金黄色葡萄球菌、黑曲霉和黄曲霉都有一定的抑菌效果,其中,对黑曲霉的抑菌作用最强,抑菌率达到12.4%.

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

Protamex蛋白酶水解大豆蛋白研究

研究了Protamex酶对大豆蛋白的有限水解作用 ,分析了酶浓度、pH值、温度、底物浓度、反应时间等因素对大豆蛋白酶水解的影响 ,给出了Protamex酶水解大豆蛋白的较佳条件 ,并采用凝胶层析过滤色谱分析了不同水解时间水解物分子量的变化 ,发现大豆分离蛋白中存在一些Pro tamex不容易水解成分 ,大豆分离蛋白的Protamex水解过程是一个不均匀的过程。

复合蛋白酶和甘露寡糖对肉鸡生长性能的影响及其互作效应研究

试验选用112羽平均体重为(37.6±0.42)g的1日龄爱拔益加肉雏鸡以研究复合蛋白酶和甘露寡糖对肉鸡生产性能的影响及其互作效应。将所有鸡只随机分为4个处理,每个处理4个重复,每个重复7羽鸡。试验组日粮在玉米-豆粕日粮的基础上分别添加125g/t的复合蛋白酶、1000g/t的甘露寡糖及125g/t的复合蛋白酶+1000g/t的甘露寡糖。试验分前期(1～21d)和后期(22～42d)两个阶段。试验期为42d。结果表明,日粮中添加125g/t的复合蛋白酶对肉鸡的采食量无显著影响,但可显著提高肉鸡后期(P<0.01)及全期的日增重(P<0.05)。虽然肉鸡前期和后期的饲料转化效率未出现显著变化,但复合蛋白酶对肉鸡全期的饲料转化效率有改善的趋势(P=0.08)。1000g/t的甘露寡糖不仅提高了肉鸡后期的日增重(P<0.05),同时显著提高了肉鸡后期及全期的饲料转化效率(P<0.05)。复合蛋白酶和甘露寡糖同时使用对肉鸡各阶段的日增重、采食量和饲料转化效率未表现出相互加和或抵消的效应。由此可知,125g/t复合蛋白酶和1000g/t甘露寡糖对肉鸡具有明显的促生长作用,但两者之间不存在互作效应。

复合蛋白酶水解海参生殖腺工艺的研究

结合实际生产和复合蛋白酶的特性,本文研究了复合蛋白酶水解海参生殖腺的工艺及条件。本工艺省去了传统工艺的pH控制,酶解温度采用程序升温,45～65℃。通过单因素和正交实验分析了酶用量、底物浓度及时间对生殖腺水解的影响,确定其最佳水解条件为:底物浓度13%,酶浓度0.4%,时间2.5h。

复合诱变选育酸性蛋白酶高产菌株

以米曲霉M-2为出发菌株,通过紫外线-氯化锂和硫酸二乙脂(DES)复合诱变,筛选酸性蛋白酶高产突变株,并进行固态发酵筛选试验。从大量突变株中进行筛选,获得1株遗传性稳定的酸性蛋白酶高产突变株D-7,其酶活力由出发菌的262.7U/g提高至602.5U/g,提高了129.3%。