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共表达猪细小病毒VP2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其鉴定
被引量:
8
1
作者
邓晓辉
陈柳
+9 位作者
叶伟成
李军星
崔尚金
余斌
云涛
崔言顺
孙元
仇华吉
张帅
张存
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期251-256,共6页
为研制猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)3联苗,本研究将PPV VP2基因和PCV2 Cap基因通过口蹄疫病毒2A基因串联得到VP2-2A-Cap(V2C)基因,将其插入pEP-CMV-in转移载体构建pEP-V2C-in重组表达质粒,再通过Red/ET两...
为研制猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)3联苗,本研究将PPV VP2基因和PCV2 Cap基因通过口蹄疫病毒2A基因串联得到VP2-2A-Cap(V2C)基因,将其插入pEP-CMV-in转移载体构建pEP-V2C-in重组表达质粒,再通过Red/ET两步重组法在大肠杆菌中构建了pPRV-V2C-ΔgE和pPRV-ΔgE突变体,该突变体用磷酸钙法转染BHK-21细胞获得重组病毒rPRV-V2C-ΔgE和rPRV-ΔgE。Western blot分析表明rPRV-V2C-ΔgE能够在BHK-21细胞内表达融合蛋白VP2-2A-Cap,而且目的蛋白能够被2A蛋白裂解为64 ku和28 ku两个片段。重组病毒生长曲线和噬斑大小测定结果显示rPRV-V2C-ΔgE在BHK-21细胞中的增殖滴度与亲本株rPRV无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV的增殖。本研究为PRV、PPV和PCV2 3联重组活载体疫苗的研制奠定了基础。
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关键词
prv感染性克隆
细菌人工染色体
猪细小病毒
猪圆环病毒2型
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职称材料
题名
共表达猪细小病毒VP2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其鉴定
被引量:
8
1
作者
邓晓辉
陈柳
叶伟成
李军星
崔尚金
余斌
云涛
崔言顺
孙元
仇华吉
张帅
张存
机构
山东农业大学动物科技学院
浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期251-256,共6页
基金
浙江省重大科技专项(2007C12010)
文摘
为研制猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)3联苗,本研究将PPV VP2基因和PCV2 Cap基因通过口蹄疫病毒2A基因串联得到VP2-2A-Cap(V2C)基因,将其插入pEP-CMV-in转移载体构建pEP-V2C-in重组表达质粒,再通过Red/ET两步重组法在大肠杆菌中构建了pPRV-V2C-ΔgE和pPRV-ΔgE突变体,该突变体用磷酸钙法转染BHK-21细胞获得重组病毒rPRV-V2C-ΔgE和rPRV-ΔgE。Western blot分析表明rPRV-V2C-ΔgE能够在BHK-21细胞内表达融合蛋白VP2-2A-Cap,而且目的蛋白能够被2A蛋白裂解为64 ku和28 ku两个片段。重组病毒生长曲线和噬斑大小测定结果显示rPRV-V2C-ΔgE在BHK-21细胞中的增殖滴度与亲本株rPRV无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV的增殖。本研究为PRV、PPV和PCV2 3联重组活载体疫苗的研制奠定了基础。
关键词
prv感染性克隆
细菌人工染色体
猪细小病毒
猪圆环病毒2型
Keywords
pseudorabies virus infectious clone
bacteria artificial chromosome
porcine parvovirus
porcine circovirus type 2
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
共表达猪细小病毒VP2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其鉴定
邓晓辉
陈柳
叶伟成
李军星
崔尚金
余斌
云涛
崔言顺
孙元
仇华吉
张帅
张存
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
8
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