端粒酶反义寡核苷酸对SGC-7901胃癌细胞生长的作用

目的 探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸 (PS ASODN)对胃癌细胞生长的作用。方法 脂质体介导的PS ASODN作用于SGC 790 1细胞后 ,MTT法计算细胞生长抑制率 ,流式细胞学观察细胞周期及细胞凋亡率变化。结果 终浓度为 3、2及 1μM的PS ASODN对SGC 790 1细胞均有抑制作用 ,抑制率与对照组相比差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;流式细胞学检测到凋亡峰 ,细胞阻滞于G0 /G1期。对照寡核苷酸无上述作用。结论 以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸不但明显抑制胃癌细胞的增殖 ,而且具有促凋亡作用 。

端粒酶反义寡核苷酸对肝癌细胞生长抑制作用

目的本研究将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)经lipotap脂质体转染作用于肝癌细胞系BEL-7402,观察其对肝癌细胞端粒酶活性的影响,同时检测其对癌细胞的生长抑制作用,旨在探讨PS-ASODN对肝癌的治疗价值,为临床治疗肝癌提供一定的试验数据。方法分别采用MTT法、流式细胞术、酶联免疫吸附(ELISA)法检测不同浓度PS-ASODN对bel-7402的细胞增殖、细胞凋亡和端粒酶活性的作用。结果PS-ASODN能抑制BEL-7402细胞的生长,降低其端粒酶活性并诱导细胞凋亡。结论端粒酶与BEL-7402增殖活性有关,抑制端粒酶活性可能成为肝癌基因治疗的新靶点。

反义寡核苷酸转染对SGC-7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响

目的 探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸 (PS ASODN)对SGC 790 1胃癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法 脂质体介导的PS ASODN作用于SGC 790 1细胞后 ,台盼蓝拒染法计算细胞生长抑制率 ,采用半定量TRAP 银染法检测端粒酶活性 ,用流式细胞仪观察细胞凋亡率及细胞周期变化 ,采用光镜及电镜观察细胞凋亡形态。结果 终浓度为 3、2及 1μM的PS ASODN对SGC 790 1细胞均有抑制作用 ,抑制率与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;PS ASODN转染后 48h ,端粒酶活性明显降低 (P <0 .0 5 )。以上抑制作用呈剂量依赖性及序列特异性。流式细胞仪检测到凋亡峰 ,细胞受阻于G0 /G1期 ;光镜及电镜显示典型的细胞凋亡形态改变。对照寡核苷酸无上述作用。结论 以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸不但明显抑制胃癌细胞的增殖 ,降低端粒酶活性 ,而且具有促凋亡作用 ,对胃癌具有重要治疗价值。

全硫代反义寡核苷酸对脑胶质瘤细胞端粒酶活性作用

目的本研究采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN)对脑胶质瘤HO-8910细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法本实验将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)经lipotap脂质体转染作用于脑胶质瘤细胞系C6,然后分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验、酶联免疫吸附试验(ELISA)法和流式细胞术检测C6脑胶质瘤细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果经MTT法检测,PS-ASODN对C6细胞生长具有明显的抑制作用和诱导细胞凋亡,1.0μMPS-ASODN处理后24h细胞生长抑制率为12.93%,且随着时间的延长,抑制作用逐渐增强;给药72h对细胞生长抑制率达到最高,为50.81%,有相应的浓度依赖关系。ELISA法检测结果 ,0.5～1.5μM的PS-ASODN对C6细胞作用72h后端粒酶皆为阴性,表明PS-ASODN能够抑制端粒酶活性,对照组端粒酶皆为阳性。结论端粒酶PS-ASODN对体外培养的脑胶质瘤C6细胞的增殖有明显的浓度、时间依赖性抑制作用;抑制脑胶质瘤C6的端粒酶活性和诱导C6脑胶质瘤细胞发生凋亡,可能是端粒酶PS-ASODN抑制C6细胞增殖的主要机制。