PSAG复合水泥的凝结性能与强度

水泥复合化能提高和改善水泥自身的性能。为了使硫铝酸盐水泥既能保持较高早期强度,又能具有稳定发展的后期强度,将硫铝酸盐水泥与硅酸盐水泥复合,并掺加石膏形成PSAG复合水泥进行改善性能的试验研究。结果表明:硅酸盐水泥掺量在小于70%时,复合水泥的凝结时间都更接近于硫铝酸盐水泥的凝结时间,且当硅酸盐水泥掺量为40%时,复合水泥的凝结时间为最短,初凝时间为10 min,终凝时间为13 min;硅酸盐水泥的掺量为70%时,复合水泥的标准稠度用水量最大(39%),70%之前标准稠度用水量与之呈正相关性,之后呈负相关性;较之硫铝酸盐水泥,复合水泥1 d强度有所下降,但28 d时抗折强度有较大程度的提高;石膏的掺入提高了复合水泥的早期强度,但对后期强度却有降低影响;掺入0.1%的聚丙烯纤维可以提高复合水泥的各龄期强度,其中对早期抗折强度的提高尤为明显。

转PSAG12-ipt基因水稻植株的获得及其延衰性的初步研究

运用农杆菌转化法将叶片衰老抑制基因PSAG12-ipt转入南方推广的优质籼型不育系中A、恢复系明恢63、南胜10号，所获得的潮霉素抗性植株通过GUS组织化学分析、PCR检测、Southern blot分子检测证实，PSAG12-ipt已经转入水稻基因组中。对转基因植株进行了延衰性考察，结果表明，与对照组相比，部分转基因水稻植株明显表现出叶片推迟衰老，提高了单株有效穗数、千粒重。对转基因R1代植株进行了PCR和PCR Southern分析，表明外源基因在转基因植株后代中稳定遗传。

PSAG三元体系水泥纤维混凝土的弹性模量

为满足水泥混凝土路面快速修复的材料性能需要,以硫铝酸盐水泥复掺硅酸盐水泥、调节石膏掺量、聚丙烯纤维掺量和纤维长度为技术途径,制备了硅酸盐-硫铝酸盐-石膏(PSAG)三元体系水泥纤维混凝土,并采用正交试验方法研究了各因素对PSAG三元体系水泥纤维混凝土弹性模量的影响。结果表明:纤维掺量、石膏掺量和纤维长度对混凝土弹性模量的影响非常显著,mSA/mPC对混凝土弹性模量的影响显著;纤维掺量和石膏掺量对弹性模量的影响趋势是一致的,弹性模量随着其掺量的增加而减小;纤维长度为9mm时弹性模量最大;混凝土弹性模量与立方体抗压强度和表观密度之间满足幂函数乘积的关系,且在显著水平0.01时其相关性显著。

叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT在小麦遗传改良中的应用

为了解叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT在小麦遗传改良中的作用,利用共表达PSAG12和IPT的转基因小麦材料(TIPT-XN1376)与推广小麦品种陕麦159、周麦18、远丰175、西农979和郑麦9023杂交,并对其后代进行分子标记辅助选择和叶绿素含量测定,研究PSAG12-IPT基因在小麦中的遗传特点及其与衰老和叶片叶绿素含量的关系。结果表明,150个转基因株系中,携带PSAG12-IPT植株与不携带PSAG12-IPT植株的分离比为110∶40,χ^2检验表明,符合3∶1的分离特点,说明PSAG12-IPT基因以单基因形式在子代中稳定遗传。携带PSAG12-IPT的F 2株系平均叶绿素含量(55.4 mg·g^-1)比不携带PSAG12-IPT的F2株系(51.7 mg·g^-1)提高7%,说明PSAG12-IPT基因能够降低植株叶片叶绿素的降解速率,使叶片维持较长持绿时间,延缓叶片衰老。

福州宦溪野生蕉(Musa spp.,AB group)2个PSAG成员的克隆及生物信息学分析

植物光系统Ⅰ反应中心亚基Ⅴ(photosystemⅠreaction center subunitⅤ,简称PSAG或PSⅠ-G)是光合系统Ⅰ的主要组件,具有维持PSⅠ复合体稳定性的重要作用,并与抗盐密切相关。本研究以福州宦溪野生蕉(Musa spp.AB group)叶片为材料,采用同源克隆的方法 ,首次分离到PSAG基因的2个成员:PSAG1、PSAG2(GenBank登录号分别为JX317082、JX317083),分别为800、827 bp,分别编码150、160个氨基酸;PSAG1、PSAG2的基因组序列分析表明2个成员均没有内含子。生物信息学分析表明:PSAG1、PSAG2具有PSⅠ的Ⅹ亚基超家族(photosystemⅠreaction center subunitⅩpsaK)保守结构域,是不具有信号肽的跨膜蛋白,具有亲水性;PSAG1、PSAG2均有4个位点发生磷酸化。宦溪野生蕉PSAG在进化过程中形成了特殊的结构特征,即PSAG1和PSAG2没有内含子,并且在不同物种间保守区具有高度的一致性,为保持PSAG功能的稳定性提供了重要保证。

P_(SAG12)序列克隆及P_(SAG12)-ipt嵌合基因植物表达载体的构建

通过聚合酶链式反应技术,成功克隆了拟南芥SAG12基因5'端2130bp的非编码序列PSAG12。结构分析结果表明,该序列由55bp的5'-UTR和-1^-2075的5'端非转录序列构成,-1^-1345为拟南芥SAG12基因启动子功能区,具有-1181^-1345增强子序列和衰老特异表达关键序列-571^-603,但无典型的TATAbox、CAATbox和转录起始位点帽子结构序列。成功构建了PSAG12-ipt嵌合基因植物表达载体pAGT,为通过基因转移技术人为控制植物叶片细胞分裂素含量,延迟叶片衰老打下了基础。

利用农杆菌浸种法将叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT导入普通小麦的研究

以普通小麦品种西农1376和西农2611为材料,利用农杆菌浸种法获得1株导入了叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT转基因植株。经PCR、GUS组织化学染色和Southern杂交分析,证明目的基因已整合到小麦基因组中并在转基因植株中能够稳定遗传。转基因小麦在叶片细胞分裂素(异戊烯基腺嘌呤)含量、叶片衰老进程及农艺性状方面与对照无明显差异,初步表明叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT,在转基因植株体内可能未表达或表达量不足。

利用花粉管通道法将叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT导入普通小麦的研究

利用花粉管通道法将叶片衰老抑制基因PSAG12 IPT导入普通小麦品种西农 1376 ,经PCR、GUS组织化学染色、点杂交和Southern杂交分析 ,证明带有特异启动子的目的基因已整合到 5个植株的基因组中 ,且在大部分转基因植株中能够稳定遗传。通过叶片细胞分裂素含量、叶绿素含量、叶片衰老进程及农艺性状分析 ,初步证明PSAG12 IPT基因在部分转基因小麦的衰老叶片中特异表达 。

转P_(SAG12)-IPT基因小麦安全性的初步研究

对转PSAG12 IPT基因小麦植株根际土壤及其周边小麦、大麦、燕麦进行了基因漂移检测,并对食用转PSAG12 IPT基因小麦混合饲料的小白鼠进行了毒理性试验,初步研究了转PSAG12 IPT基因小麦的安全性。结果表明,PSAG12 IPT基因并未通过根系分泌物漂移到土壤中;除西农1376在距离T2代西农1376小麦3和6m处各发现1株PCR阳性植株外,在小麦郑9023及大麦和燕麦中均未发现PSAG12 IPT基因存在;食用含有转基因小麦混合饲料的小白鼠和对照小白鼠的肝脏和肾脏的结构解剖图未见明显差异,可以初步认为应用转PSAG12 IPT基因小麦是较安全的。

内源细胞分裂素调控油菜叶片衰老进程的研究

利用根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导法将嵌合基因PSAG1 2 ipt导入双低油菜 (Brassicanapus)品种H16 5 ,经双重PCR检测和基因组总DNASouthern杂交证实 ,共获得 11株转基因植株。生长观察结果显示 ,11株转基因植株生长发育正常 ,除 2株与对照没有明显的差异外 ,其余 9株叶片衰老时间明显延迟 ,主茎有柄叶衰老延迟 15～ 2 0d ,无柄薹叶延迟 2 0～ 30d ,长势较旺。对其中的 2株 (Line 5和Line 7)进行衰老生理指标测定的结果表明 ,转基因植株主茎基本定型叶上部叶片 ,叶绿素含量、细胞分裂素含量、SOD活性和MDA积累量与对照基本一致 ,转基因植株Line 5和Line 7基本定型叶下部第 5片叶叶绿素含量、细胞分裂素含量和SOD酶活性约为对照的 2～ 4倍、3～ 5倍和 3倍 ,MDA积累量仅为对照的 4 0 %和 70 %。

P_(SAG12)-ipt嵌合基因转化樱桃番茄的研究

利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将嵌合基因PSAG12-ipt导入樱桃番茄,经双重PCR检测和基因组总DNASouthern杂交测验,共获得17株转基因植株。田间生长实验观察结果显示,这17株转基因植株生长发育及形态正常,但其中的14株长势明显好于对照。对14株中的2株进行叶片叶绿素、细胞分裂素检测结果表明,转基因植株基本定型叶下部,不同叶位叶片叶绿素、细胞分裂素含量明显高于对照,基本定型叶上部叶片与对照基本一致,同一叶位叶片比对照延缓衰老15～20d。

基因枪转化小麦愈伤组织的影响因素研究

以小麦愈伤组织为受体材料,用基因枪法将报告基因GUS和目的基因Psag12-IPT导入小麦中。GUS基因表达检测表明,金粉用量越高,转化频率越高;质粒DNA用量以2.0μg/枪最佳;随着愈伤组织培养时间的延长,GUS基因瞬时表达呈明显下降趋势,至第28天以后趋于稳定。另外,GUS基因瞬时表达检测应在24h内进行。

转P_(SAG12)-IPT基因苎麻株系光合性能研究

以转PSAG12-IPT基因苎麻T0代的株系及对照为材料,在大田环境下,在纤维成熟期测定其功能叶片的净光合速率和叶绿素含量。结果表明,部分转基因株系的净光合速率显著高于受体品系5041,其叶绿素组成成分的含量发生了变化,叶绿素总含量也显著高于对照。可见,导入PSAG12-IPT基因后,部分苎麻株系功能叶片的光合性能得到显著改善。

农杆菌介导的P_(SAG12)-IPT基因转化柳枝稷研究

为延长生物能源作物柳枝稷(Panicum virgatum)的叶片功能期,以柳枝稷‘西稷1号’品系的成熟胚诱导的愈伤组织为受体,采用农杆菌介导法转化叶片衰老延缓基因PSAG12-IPT。结果表明:经过农杆菌转化,共培养,抗性愈伤组织筛选、再生和生根培养,在农杆菌介导处理的8500块愈伤组织中共获得了320株转化植株;经PCR检测分析,转化植株中共有19株植株扩增出标记基因潮霉素B磷酸转移酶基因的目标片段,初步表明PSAG12-IPT基因已整合到柳枝稷基因组中,转化率为0.223%。对柳枝稷转基因植株的叶片叶绿素含量、净光合速率、胞间CO2浓度和气孔导度进行测定,表明PSAG12-IPT基因在部分转基因植株中已经表达。

转P_(SAG12)-IPT基因小麦饲喂小白鼠的安全性

为了研究转基因小麦是否会对人类健康存在潜在的不良影响,分别用转P_(SAG12)-IPT基因西农1376小麦与普通西农1376小麦饲喂小白鼠,对两组小白鼠的亲代和子代的血常规,血液生化指标进行了检测,并分别解剖取其肝脏、肾脏、大肠、肺脏、大脑、睾丸等组织作切片观察。结果表明:饲喂转基因小麦的处理组和对照组小白鼠的各项指标相比较均无显著性差异,说明转P_(SAG12)-IPT基因小麦对小白鼠的健康无明显的不良影响,初步推断食用转PSAG12-IPT基因小麦对人类也可能是安全的。

转叶片衰老延缓基因P_(SAG12)-IPT小麦株系光合性能的研究

以导入叶片衰老延缓基因PSAG12-IPT小麦西农1376的T5代株系为材料,于灌浆期测定了它们功能叶片的净光合速率和叶绿体色素含量.结果表明:经过早代鉴定的转PSAG12-IPT基因小麦株系的净光合速率均高于受体对照西农1376,部分株系达到极显著水平;转基因株系叶绿体色素含量的平均值也显著高于对照.可见,转叶片衰老延缓基因PSAG12-IPT小麦株系灌浆期功能叶片的光合性能得到显著改善.

高世代转P_(SAG12)-IPT基因水稻生育后期的延衰性

以转PASG12-IPT基因水稻东南201自交高世代(T8)株系为材料,对始穗期和蜡熟期剑叶的衰老相关指标测定表明,蜡熟期高世代转PSAG12-IPT基因水稻株系的细胞分裂素含量、叶绿素含量、净光合速率值、CAT活性、SOD活性均显著高于受体品种,部分株系达到极显著水平,而转化株系的MDA含量则明显低于受体品种,POD活性呈无规律变化.由上可见,抑制衰老嵌合基因PSAG12-IPT对水稻叶片的衰老有一定的延缓效应,并能在高世代中稳定表达.

P_(SAG12)-ipt嵌合基因转化马铃薯体系的研究

以根癌农杆菌介导法将PSAG12-ipt嵌合基因导入马铃薯栽培品种,对影响马铃薯遗传转化的多种因素进行系统研究.结果表明:马铃薯茎段分化效率高于叶片,马铃薯愈伤诱导和芽分化最适培养基为MS+6-BA 0.25mg/L+NAA 0.25mg/L+2,4-D 0.25mg/L,添加1%Na2SO3能有效防止褐化;茎段愈伤诱导和分化苗生根最适的Kan浓度分别为50mg/L和75mg/L;外植体预培养2d,OD600为0.2～0.5的农杆菌浓度侵染8min、共培养3d后进行选择培养能有效地提高植株再生能力.用PSAG12和ipt双重PCR检测再生植株,阳性转化率为65.8%.Southern blotting结果表明,转基因植株多以单拷贝形式整合进马铃薯基因组中.

转P_(SAG12)-IPT基因苎麻株系T_0代性状考查

以转PSAG12-IPT基因苎麻T0代的株系及对照为材料,在每季麻收获前后,分别对农艺性状和品质性状等进行调查和测定。结果表明:株系P502的主要性状指标优于受体品系5041;大部分株系部分性状指标优于对照,部分性状指标劣于对照;少数株系的某些性状甚至发生了特殊变异。可见,转PSAG12-IPT基因苎麻T0代株系性状发生了显著变异,这些变异为苎麻育种提供了资源。

转P_(SAG12-ipt)基因水稻叶片中叶绿体超微结构的变化

研究了转PSAG12-ipt基因水稻和对照植株发育过程中叶片中的叶绿体结构的变化。发现水稻发育到乳熟期,转基因植株叶片中的叶绿体与对照植株开始出现明显的差别。对照叶绿体中嗜锇体体积增大,数目增多,大部分基粒的类囊体膜膨胀、裂解,片层结构解体。而转基因植株叶片中的叶绿体结构变化不大,嗜锇体相对有所增加,但体积较小,大部分基粒类囊体片层结构仍然排列整齐,少数类囊体垛叠化丧失。