翡翠贻贝对塔玛亚历山大藻的摄食及毒素积累的初步研究

塔玛亚历山大藻是一种可产生PSP毒素的海洋微藻,通过室内摄食实验,初步研究了厦门港水产养殖动物翡翠贻贝对塔玛亚历山大藻的滤食率与光照度、温度、藻液浓度等因素的关系,并对比了翡翠贻贝对其它饵料微藻的摄食压力.同时对比了不同细胞密度的塔玛亚历山大藻浓度对翡翠贻贝毒素累积的影响.

扇贝中麻痹性毒素的提取与分离纯化

为了获得麻痹性毒素标准品,以毒化扇贝为试验材料,对扇贝中的麻痹性毒素(PSP毒素)进行了提取和分离纯化。以酸性80%乙醇溶液反复提取麻痹性毒素,得到了总毒性为6170MU的毒素粗提液。毒素粗提液经过超滤、Bio-GelP-2凝胶柱层析和Bio-Rex70离子交换柱层析等二次层析柱分离纯化后得到以膝沟藻毒素群(GTXs)为主的纯化PSP毒素。HPLC分析结果显示,扇贝中主要含有膝沟藻毒素GTX3,GTX1、GTX2、GTX3、和GTX4的组成比例约为2∶4∶14∶1(以HPLC上的峰面积比例计)。纯化后的毒素可以作为标准物质用于GTX1-4的HPLC分析。

铜铸熟若蟹中麻痹性毒素成分的分离和鉴定

在分析了日本珊瑚扇蟹铜铸熟若蟹甲壳组织和内脏组织中毒性含量的基础上,对毒素提取液进行分离纯化,并通过液相色谱法对其毒素种类进行分析。毒性分析结果显示,毒蟹个体的含毒量在37 500～116 000 MU范围,远远超过成人中毒致死量(5 000 MU),但个体间的毒含量有较大差异;毒蟹个体的甲壳组织的比毒性(909～1 610 MU/g)总体高于内脏组织(111～576 MU/g)。Bio-Gel P-2凝胶柱层析纯化结果显示,粗毒素提取液通过反复纯化可以达到纯化目的,毒素的比毒性从4.8 MU/mg上升到30 MU/mg左右;毒素进一步通过Bio-Rex70离子交换柱层析的分离纯化结果显示,毒素中约有9%为膝沟藻毒素群(GTXs,麻痹性毒素中的一类)。高效液相色谱分析结果显示,膝沟藻毒素群的主要成分为GTX3和GTX2,并含有少量的dcGTX2和dcGTX3。

枝角类为媒介的麻痹性贝类毒素传递与代谢研究

为了弄清麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning,PSP)在海洋生态系统中的产生、转化和归宿,本文以海洋枝角类为媒介,研究了麻痹性贝类毒素在海洋食物链中的传递与代谢过程。结果表明,PSP毒素可以沿甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)→枝角类蒙古裸腹溞(Moina mongolica)→红鳍东方鲀(Fugu rubripes)鱼苗进行传递和代谢。整个实验过程中,塔玛亚历山大藻、蒙古裸腹溞、红鳍东方鲀均检测到C1+2,鱼苗体内还发现似新生成的neoSTX。毒素传递过程中,C1+2中低毒性的α型毒素C1比例增大;毒素在鱼苗体内净化时,各PSP成分和总毒素含量普遍随净化时间的延长而减少。该结果为解释麻痹性贝类毒素为何在海洋各营养级生物体中广泛存在提供了直接的证据,也为我国开展麻痹性贝类毒素的监测和管理提供了新的理论依据。

鱼类受麻痹性贝类毒素污染的实例(英文)

麻痹性贝类毒素通常只污染贝类海产，毒素的来源是浮游双鞭甲藻类，经过滤而聚集在贝类体内．毒素包括有saxitoxin，neosaxitoxin，gonyautoxins，等．其病证如嘴部及手部麻痹，心跳减慢，呼吸困难，以致死亡，都在几小时内发作．至于其他毒素，如鱼毒素（ciquatera），其发作期是慢性的，通常要等一天才发作．病征包括：麻痹，肚痛，呕吐，体温下降，皮肤痕痒，心脏衰竭等．近年来，香港发生了多次吃鱼中毒的案件，其中有些情况有异于ciquatera的症状，包括急性发作，嘴部麻痹等特征．经过小鼠毒性测试及高压液相色谱分析，证实鱼样本含有saxitoxin，neosaxitoxin及o1／c2等PSP毒素．根据每月鱼类样本的含毒量记录，每年三四月及九十月期间，香港海鱼受PSP污染的机会较高，同期贝壳类（如青口，带子，蛤）受污染的情况也较高．遇有毒性赤潮侵袭，海水样本含有PSP时，在赤潮污染水域范围，贝壳类和鱼类会同时受到污染．由此可见，麻痹性贝毒是可以污染肉食海鱼，而引致食物中毒．

塔玛亚历山大藻对鲈鱼幼鱼毒性效应研究

塔玛亚历山大藻 (Alexandriumtamarense) (ATHK)藻液能对鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus)幼鱼 (2 5cm)的存活有明显的影响 ,96h的半致死浓度为 4 0 0 0cells mL .根据该藻PSP产毒量 37 4 8fmol cell (毒性为 11pg (STXeq) cell)计算 ,鲈鱼幼鱼的 96h半致死藻毒素浓度相当于 14 9 92fmol L (毒性为 4 4pg (STXeq) L) .通过对塔玛亚历山大藻藻液各组分 (都相当于 80 0 0cells mL) :藻细胞悬浮液、去藻过滤液、细胞内容物以及细胞碎片的毒性大小比较研究 ,发现藻细胞的毒性作用很强 ,与藻液相近 ,细胞内容物也有显著影响 ,其他组分无显著的毒性作用 ,结果表明幼鱼摄入PSP毒素是幼鱼致死的原因 .较大的幼鱼(12cm)对有毒藻不敏感 ,暴露在 10 0 0 0cells mL 10d后 ,存活率为 10 0 % .

有毒亚历山大藻(Alexandrium spp.)和链状裸甲藻(Gymnodinium catenatum)孢囊在中国沿海的分布

于 2 0 0 0— 2 0 0 1年采集了中国沿海 1 0个采样点的表层沉积物样品 ,研究了有毒亚历山大藻 (Alexandriumspp .)和链状裸甲藻 (Gymnodiniumcatenatum)孢囊的分布。结果表明 ,这两类孢囊几乎在所有采样点都检测到。链状裸甲藻孢囊虽分布广泛 ,但含量较低 ,在样品中的浓度和百分比含量分别为 0— 71 .1cysts/gDW和 0 %— 1 4.3%。亚历山大藻孢囊在大部分海域含量较低 ,而在PSP毒素中毒事件高发区和贝类PSP毒素高含量区的大亚湾大鹏澳海域却高密度、高频率地出现 ,最高密度为 366cysts/gDW。研究结果显示 ,大亚湾大鹏澳海域表层沉积物中高密度的亚历山大藻孢囊也许是该海域贝类体内冬季PSP毒素积累及高含量的重要原因之一。

塔玛亚历山大藻对栉孔扇贝胚胎和早期幼虫的影响

塔玛亚历山大藻Alexandriumtamarense(藻株ATHK)能抑制栉孔扇贝Chlamysfarreri受精卵的孵化和早期D型幼虫的存活 .实验发现 ,暴露于密度为 10 0和 5 0 0cells mL的塔玛亚历山大藻中 ,36h后 ,扇贝受精卵的孵化率分别为对照组的 30 %和5 % .在实验范围内 ,三角褐指藻和赤潮异弯藻对受精卵孵化无影响 ,而另一塔玛亚历山大藻藻株ATCI0 2对受精卵孵化有显著影响 .指数生长前期时的藻对受精卵的毒性最大 .原肠期之前各阶段的胚胎对塔玛亚历山大藻毒性最敏感 .在密度为 30 0 0cells mL以上的塔玛亚历山大藻中 ,早期D型幼虫存活和活力开始显著下降 ,在密度为 5 0 0 0cells mL藻中暴露 2 0d或 10 0 0 0cells mL藻中暴露 14d后 ,D型幼虫的存活率为 0 .

四种/株亚历山大藻(Alexandrium)毒性的比较研究

通过对塔玛亚历山大藻(ATHK和AT-6藻株)、链状亚历山大藻(ACDH藻株)和微小亚历山大藻(AM-1藻株)的PSP毒素含量和组成以及它们分别对轮虫、黑褐新糠虾和鲈鱼存活影响的比较研究发现:塔玛亚历山大藻AT-6藻株不产生麻痹性贝毒毒素PSP,而塔玛亚历山大藻ATHK、链状亚历山大藻ACDH和微小亚历山大藻AM-1均产生PSP毒素,其总含量分别为19.74、5.395、5.57fmol/cell(2.60、0.36、1.61pgSTXeq/cell)。塔玛亚历山大藻AT-6对轮虫、黑褐新糠虾和鲈鱼这三种生物均没有不利影响;对于轮虫,塔玛亚历山大藻ATHK和链状亚历山大藻ACDH的96hLC50分别为:200和1200cells/ml,而微小亚历山大藻AM-1无不利影响;对于糠虾,塔玛亚历山大藻ATHK、链状亚历山大藻ACDH和微小亚历山大藻AM-1的96hLC50分别为7000、11000、16000cells/ml;对于鲈鱼,这三株藻的96hLC50分别为3700、4000、20000cells/ml。四株亚历山大藻对三种生物的毒性大小与其PSP毒素含量和组成无直接的相关关系,其毒性作用可能来自其他未知毒性物质。塔玛亚历山大藻ATHK不同组分分别对三种生物的毒性比较研究表明:藻细胞重悬液和藻液对三种生物的不利影响最为显著,去藻过滤液和细胞碎片对轮虫和鲈鱼没有明显影响,但糠虾的存活率有所下降;细胞内容物对轮虫和糠虾也无影响,但对鲈鱼的存活有一定影响。以上研究表明:不同亚历山大藻的毒性大小存在差别,其对不同生物的危害机制也不相同,除PSP毒素外,亚历山大藻可能还存在其他的毒性物质。

中国沿海部分海域麻痹性贝毒研究

采用美国分析化学家协会推荐的小白鼠生物检测法,对产于大连、深圳、广西北海和福建厦门海域的贝类进行麻痹性贝毒检测,选取部分有毒样品进行高效液相色谱毒素成分分析。小白鼠生物检测法检测结果表明,样品消化腺毒素含量为0—25.3MU/g,剔除消化腺的其他贝类软组织均没有检测到PSP的存在。消化腺和其他软组织的毒力加权平均值为0—2.6MU/g,低于联合国粮农组织制定的贝类安全食用标准的限定值4MU/g。大连海域染毒样品的检出率为50%,在四个海域中最高,福建海域检出率则最低。高效液相色谱毒素成分分析结果表明,深圳和广西北海海域贝类所含PSP成分相似,包含有C毒素(C1/2),GTX毒素(GTX1—4)和STX,而大连海域贝类含有的毒素组分与前两者有较大差异,且随贝类采集的不同时期而变化。

厦门海域养殖区麻痹性贝毒污染的研究

2002年3月至2003年2月对厦门海域集美、同安两地养殖区中的经济贝类麻痹性贝毒素进行了检测.分析结果表明,厦门海域沿岸贝类中肠腺麻痹性毒素（PSP）为1.79～2.22 MU/g,低于国际标准20 MU/g.在不同养殖区中,采样期的总检出率为7.54%,集美地区的检出率为9.09%,同安地区的检出率为5.00%.集美的主要染毒种类是菲律宾蛤仔,同安的主要染毒种类是僧帽牡蛎.染毒季节大多集中在2002年3～6月间.

连云港地区织纹螺食物中毒的流行病学研究

目的:分析连云港地区织纹螺食物中毒的流行病学特征,探讨预防织纹螺食物中毒的方法。方法:收集近年织纹螺中毒资料,对连云港地区织纹螺进行形态学鉴定。应用生物测定法检测螺肉中麻痹性贝类毒素(PSP)含量。结果:连云港海域生长4种织纹螺,其中半褶织纹螺导致10起中毒,中毒表现主要是下行性神经麻痹,毒素对温度不敏感。结论:鉴于海洋污染的严重性,为保障海贝的食用安全,应对贝类进行毒素安全指标检测。

硅胶性能表征及其对麻痹性贝类毒素吸附研究

研究硅胶对麻痹性贝类毒素吸附性能情况,探究其作为毒素检测前处理材料的可能性。利用扫描电子显微镜、红外光谱分别表征硅胶形貌尺寸、官能团与化学键,使用差示扫描量热仪、热重分析仪分析硅胶的热稳定性,采用液相色谱-串联质谱研究硅胶对麻痹性贝类毒素标准溶液吸附情况。结果表明,所选用硅胶直径介于30~60μm,尺寸相对均一,富含硅羟基团,热稳定性好,在弱酸或中性条件下有效吸附麻痹性贝类毒素,并能在0.1%酸性条件下解吸附。鉴于硅胶自身特性及对麻痹性贝类毒素良好的吸附能力,有望用于动物性水产食品中麻痹性贝类毒素检测净化前处理,其吸附机理是表面的硅羟基与麻痹性贝类毒素分子中氨基、亚氨基之间形成氢键的作用。

流沙湾养殖区的贝类毒素分析

为掌握流沙湾养殖区贝类毒素的特征情况,作者进行了贝类和浮游植物样品采集。小白鼠生物法和高效液相色谱法的检测结果表明:(1)PSP毒素在各季节均有出现,但含量值较低,且染毒的生物品种不多。春季样品中的毒素成分较多,有6种,属低毒性值和中等毒性值成分,但其总毒性值相对较高;而在冬季样品中,春季出现的各毒素成分均未被检出,取而代之的是两种新的中高毒性值的毒素成分,但其总毒性值低于春季。污染的主要贝类品种是牡蛎。(2)DSP毒素的含量值较高,季节性和染毒的生物品种均较为普遍。但OA成分未检出。(3)在贝类消费方面,PSP和DSP毒素一年四季均应予以关注,但PSP更应注意春季,而DSP应多注意秋季。在该海域,应重点注意的是DSP毒素的危害。(4)该海域存在能产生DSP毒素的具尾鳍藻Dinophysis caudata。

湛江港临近海域养殖区的贝类毒素

为掌握湛江港临近海域养殖区贝类毒素的特征情况,近几年来,作者在多个采样点进行了样品采集,小白鼠生物法和高效液相色谱法的检测结果表明:(1)多种贝类体中检测出PSP,而DSP则更为普遍。(2)所检测的12种PSP成分在该海域均存在。不同的贝类,其毒素成分情况有所不同。PSP各成分有一定的季节性变化规律。消化腺中各毒性成分含量值相对较高。(3)PSP毒素值较低,未超标,仅在春秋季节检出。DSP毒素在各季节均存在,并有超标现象,从阳性率和超标率来看,秋季>春季>冬季。春秋季节应特别注意水产品的食用安全。(4)多处地区毒素含量值较高。