子宫内膜癌组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白表达

目的探讨子宫内膜癌组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测50例子宫内膜癌和15例正常子宫内膜组织中PTEN基因外显子1-8和5-9片段mRNA的表达;应用免疫组化技术检测PTEN蛋白的表达。结果(1)子宫内膜癌组织中,PTEN mRNA的表达缺失率在外显子1-8和5-9分别为48.00%和38.00%,正常子宫内膜组织PTEN mRNA全部呈阳性表达。两者在两组中表达缺失率的差异均有显著性(P<0.05);PTEN mRNA的表达缺失率在不同组织学类型、FIGO分期和组织学分级有随肿瘤恶性程度的增高而增高的趋势。(2)子宫内膜癌组织中,PTEN蛋白表达缺失率为60.00%,高于正常子宫内膜组织(0,P<0.01);PTEN蛋白表达缺失率在G3级组织和特殊类型癌中分别高于G1～G2级组织和内膜样腺癌(P<0.05)。(3)子宫内膜癌组织中,PTEN mRNA表达缺失和PTEN蛋白表达缺失呈正相关(P<0.01)。结论PTEN mRNA和蛋白表达缺失在子宫内膜癌的发生发展中可起重要作用。

PTEN mRNA、SMAD4 mRNA在肝外胆管癌中的表达及临床意义

目的通过检测第10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源丢失基因(PTEN)mRNA和TGF的细胞内信号转导蛋白家族(SMAD)mRNA在肝外胆管癌中的表达,研究它们在肝外胆管癌发生发展过程中的表达特点、相互关系以及对早期诊断及预后判断的临床价值。方法应用原位杂交染色法检测42例肝外胆管癌中PTEN mRNA、SMAD4 mRNA的表达,并以同期20例慢性胆管炎作对照。结果(1)PTEN mRNA、SMAD4 mRNA基因阳性表达率分别为57.14%(24/42)、61.90%(26/42),均显著低于对照组(均为100%)。(2)经统计学分析,PTEN mRNA、SMAD4mRNA的表达都分别与肝外胆管癌的临床病理分期及预后显著相关(P<0.05);与肝外胆管癌的组织学分级显著相关(P<0.05);SMAD4 mRNA的表达还与肝外胆管癌是否发生浸润转移显著相关(P<0.05)。(3)PTEN mRNA与SMAD4 mRNA在肝外胆管癌中的表达呈正相关。结论PTEN、SMAD4基因在肝外胆管癌的发生发展过程中可能起重要作用。联合检测PTEN mRNA、SMAD4 mRNA在肝外胆管癌中表达有助于反映肝外胆管癌生物学特性、为预后判断提供参考指标,并为探索肝外胆管癌早期诊断和干预性基因治疗提供相关的实验依据。

多发性骨髓瘤骨髓单个核细胞PTEN mRNA的表达

目的 观察PTEN mRNA在多发性骨髓瘤单个核细胞中的表达,探讨不同免疫球蛋白分型的多发性骨髓瘤患者PTEN基因mRNA表达的差异,了解PTEN基因在MM患者中的表达和意义。方法 RT-PCR法扩增多发性骨髓瘤患者单个核细胞中和非肿瘤对照者的PTEN mRNA,以β-actin作为内参照,用图像分析软件测定电泳条带的光密度值,并计算PTEN/β-actin比值。结果 多发性骨髓瘤患者单个核细胞PTEN mRNA表达与非肿瘤患者之间差异无显著性。不同免疫球蛋白类型的多发性骨髓瘤患者之间差异无显著性。结论 多发性骨髓瘤患者单个核细胞PTEN基因mRNA表达未见异常,其在多发性骨髓瘤中的意义待定。

针刺对VD模型大鼠脑组织细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、NFK-βp65及PTEN mRNA表达水平的影响

目的:探讨针刺对血管性痴呆(VD)大鼠脑组织中引起细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、NFK-βp65及PTEN mRNA表达的影响,为临床治疗血管性痴呆提供理论依据。方法:将水迷宫测试合格的大鼠随机分5组(正常组、假手术组、模型组、手针组、电针组,每组24只)。运用四血管阻断法制作VD大鼠模型,造模成功7天后,针刺大鼠头穴干预。通过Morris水迷宫实验测试大鼠的学习记忆能力;免疫组化检测海马Caspase-3、NFK-βp65阳性表达。结果:相同时刻,针刺组(手针组、电针组)大鼠与模型组大鼠对比,成功穿越平台次数增多,逃避潜伏期缩短,差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01);同一时间点,电针组大鼠较手针组穿越平台成功次数明显增多,差异有统计学意义(P <0. 05)。手针组和电针组治疗第7天、第14天、第21天3个时间点与同一时点模型组Caspase-3阳性细胞表达相比有所下降,均具有显著性差异(P <0. 05或P <0. 01),说明手针治疗和电针治疗均能降低Caspase-3阳性细胞表达。手针组和电针组治疗第7天、第14天、第21天3个时间点与同一时点模型组NFK-βp65阳性细胞表达相比有所下降,均具有显著性差异(P <0. 05或P <0. 01),说明手针治疗和电针治疗均能降低NFK-βp65阳性细胞表达。手针组和电针组治疗第7天、第14天、第21天3个时间点与同一时点模型组PTEN mRNA表达相比有所下降,均具有显著性差异(P <0. 01),说明手针治疗和电针治疗均能降低PTEN mRNA表达。结论:针刺具有明显抑制血管性痴呆(VD)大鼠脑组织细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、NFK-βp65及PTEN mRNA表达的影响,具有脑保护作用。

PTEN mRNA编辑的间充质干细胞对神经胶质瘤U251细胞杀伤作用研究

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)具有向肿瘤组织迁移趋化的特性,所以它被认为是一种携带特殊基因进行肿瘤的靶向治疗的理想载体。与不同形式的DNA载体相比,体外合成的mRNA更容易转染并且不会引入突变。利用间接共培养方法研究PTEN(gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)mRNA编辑的MSCs对U251-Luc细胞杀伤作用。体外转录合成PTEN mRNA,转染到MSCs,利用Western blot方法检测转染后PTEN蛋白表达情况,transwell共培养方法分析转染PTEN mRNA对MSCs肿瘤细胞迁移趋化性影响。利用活体成像仪和荧光显微镜检测在间接共培养条件下PTEN mRNA编辑的MSCs对U251-Luc细胞杀伤作用。体外成功合成PTEN mRNA,转染到U251-Luc细胞后能正确表达PTEN蛋白,并且在转染24 h表达最高。与对照组相比,转染PTEN mRNA后能一定程度提高MSCs细胞对肿瘤迁移能力(P<0.05)。PTEN mRNA编辑的MSCs培养上清能显著抑制U251-Luc细胞生长(P<0.05)。体外合成抑癌基因mRNA的方法为MSC介导的靶向基因治疗神经胶质瘤提供新思路。

子宫内膜癌组织中PTEN mRNA表达的研究

目的:探讨子宫内膜癌组织中PTENmRNA的表达及临床病理意义。 方法:应用逆转录 -聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增65例子宫内膜癌和15例正常子宫内膜组织中PTEN基因外显子1 -8、5 -9和5-8片段 ,并结合临床病理资料进行分析。结果:在65例子宫内膜癌组织中 ,PTENmRNA的表达缺失率在外显子1 -8、5-9和5-8分别为49.23 %(32/65)、38.46 %(25/65)和32.31 %(21/65) ,而正常子宫内膜组织中全部呈阳性表达。二者在三组中表达缺失率的差别显著(P<0.05)。而且子宫内膜癌组织中的表达缺失率在特殊类型癌和G3 级组织中分别高于内膜样腺癌和G1～2 级组织(P<0.05)。 结论:子宫内膜癌组织中存在较高比例的PTENmRNA表达缺失 。

PTEN mRNA和Smad4 mRNA在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的:探讨PTEN mRNA、Smad4 mRNA在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及意义。方法:采用FQ-PCR法检测94例PTC及癌旁组织,29例甲状腺腺瘤组织中PTEN mRNA和Smad4 mRNA的表达情况。结果:PTC高、中、低转移变型组PTEN mRNA和Smad4 mRNA的表达明显低于甲状腺腺瘤组及癌旁组,差异具有统计学意义(P<0.05);且PTEN mRNA表达与Smad4 mRNA表达呈正相关(P<0.05)。结论:PTEN和Smad4在PTC的发生发展过程中存在协调关系,二者的低表达可作为判断PTC预后不良的指标。

非小细胞肺癌（NSCLC）癌组织中PTEN mRNA表达的研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）癌组织中PTEN mRNA的表达及临床病理意义。方法压用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别扩增45例非小细胞肺癌和15例癌旁组织中PTEN基因外显子1—8和5—9，并结合临床病理资料进行分析。结果在45例非小细胞肺癌组织中，PTEN mRNA的表达缺失率在外显子1-8和5—9分别为48．9％（22／45）、33．3％（15／45），而正常癌旁组织中全部呈阳性表达。二者在两组中表达缺失率的差别显著（P〈0．05）。结论非小细胞肺癌组织中存在较高比例的PTEN mRNA表达缺失，表明PTEN基因转录水平异常在非小细胞肺癌的发生发展中起重要作用。

TP化疗联合三维适形放疗对宫颈癌患者血清PTEN mRNA水平、T淋巴细胞、生存率及复发转移的影响

目的:探讨TP化疗联合三维适形放疗对宫颈癌患者血清PTEN mRNA水平、T淋巴细胞、生存率及复发转移的影响。方法:选取本院收治的宫颈癌患者100例,按随机数字表法分为研究组(TP化疗联合三维适形放疗)和对照组(单纯三维适形放疗),各50例。检测两组血清PTEN mRNA、T淋巴细胞水平,统计患者的生存率及复发、转移情况。结果:两组治疗后血清PTEN mRNA水平均显著高于治疗前,且研究组显著高于对照组(P<0.05);两组治疗后T淋巴细胞水平显著下降,且研究组均显著高于对照组(P<0.05);研究组1、2、3年生存率均显著高于对照组(P<0.05),研究组复发率、转移率均显著低于对照组(P<0.05)。结论:TP化疗联合三维适形放疗对宫颈癌患者血清PTEN mRNA和T淋巴细胞水平的改善效果较佳,可提升患者的机体免疫力,提高生存率,减少复发转移的发生。

乙型肝炎病毒及黄曲霉毒素暴露的肝细胞癌中β-catenin、PTEN的mRNA表达

目的研究β-catenin、PTEN基因在乙型肝炎病毒(HBV)及黄曲霉毒素B1(AFB1)暴露下肝细胞癌(HCC)中mRNA表达,探讨在双暴露情况下β-catenin、PTEN与HCC发生、发展的关系。方法根据HBV与AFB1的暴露情况,将108例肝细胞癌手术切除研究对象分为4组,A组:HBV(+)/AFB1(+)48例;B组:HBV(+)/AFB1(-)27例;C组:HBV(-)/AFB1(+)19例;D组:HBV(-)/AFB1(-)14例。同时收集正常肝组织者20例,分别来自肝外伤、肝血管瘤、肝移植供体等手术切除标本作为正常对照组。采用逆转录-PCR(RT-PCR)法检测β-catenin基因与PTEN基因的mRNA表达情况,分别对各组的表达情况进行比较。结果 RT-PCR显示,β-catenin基因mRNA的半定量平均灰度值A组(1.13±0.14)、C组(1.16±0.18)分别与D组(1.01±0.13)相比,差异有统计学意义(P<0.05),此外,A、B(1.06±0.18)、C、D组与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。PTEN基因mRNA的半定量平均灰度值A组(0.54±0.13)、B组(0.59±0.16)分别与C组(0.97±0.16)及D组(0.92±0.13)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,A、B、D组与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论β-catenin基因的高表达率可能与AFB1高暴露有关,PTEN基因的失活与HBV高感染率有关。

PTEN与VEGF_(165)基因mRNA在卵巢癌中表达及相关性研究

目的 :探讨PTEN和VEGF165基因mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法 :利用RT PCR方法检测正常卵巢 (n =5 )、卵巢囊肿 (n =5 )、卵巢交界性肿瘤 (n =9)、上皮性卵巢癌 (n =6 0 )和卵巢癌细胞系CAOV 3中PTEN和VEGF165基因mRNA表达。结果 :PTEN基因mRNA在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中的表达水平低于正常卵巢和卵巢囊肿 ,P <0 0 5 ,与卵巢癌的临床病理分期呈负相关 ,P <0 0 5 ,而与组织分化程度呈正相关 ,P <0 0 5。在卵巢内膜样癌中PTEN基因mRNA表达水平显著低于浆液性或黏液性卵巢囊腺癌 ,P <0 0 5。VEGF165基因mRNA在卵巢癌中的表达水平高于正常卵巢和卵巢囊肿 ,P <0 0 5 ,与卵巢癌的临床病理分期呈正相关 ,P <0 0 5 ,而与组织分化程度呈负相关 ,P <0 0 5 ;浆液性卵巢癌中VEGF165基因mRNA表达水平显著高于其他上皮性卵巢癌 ,P <0 0 5。VEGF165基因mRNA随PTEN基因mRNA表达的降低而升高 ,r =0 72 8,P <0 0 5。结论 :在卵巢癌中PTEN基因mRNA表达下调和VEGF165基因mRNA表达上调 ,2个指标分别与卵巢内膜样癌和浆液性囊腺癌的发生和病理生物学行为关系密切 ;PTEN基因mRNA表达降低原因可能为通过上调VEGF基因mRNA表达促进新生血管形成 。

PTEN基因突变、mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的相关性探讨

目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)基因突变、mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的相关性。方法:选择2018年1月-2020年2月本院62例卵巢癌患者作为观察组,另选择同期于本院治疗的48例卵巢良性肿瘤患者作为对照组。对照组术中取病灶组织,观察组术中取卵巢癌组织与癌旁组织。采用PCR-SSCP完成观察组基因突变检测;采用实时荧光PCR法测定不同组织中PTEN mRNA水平;分析PTEN mRNA水平与卵巢癌病理生物学特征的相关性。结果:卵巢癌组织PTEN基因突变分析结果显示,外显子5第5位密码子T突变为C,经Blast P比较发现氨基酸由丝氨酸(S)变为苯丙氨酸(F)。观察组中卵巢癌组织PTEN mRNA水平低于癌旁组织和对照组中浆液性囊腺瘤与黏液性囊腺瘤组织(P<0.05)。不同年龄、组织学类型及组织分级的卵巢癌患者PTEN mRNA水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);不同FIGO分期、有无淋巴结转移的卵巢癌患者PTEN mRNA水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。PTEN mRNA水平与FIGO分期、淋巴结转移均呈负相关(P<0.05)。结论:PTEN基因突变参与卵巢癌的发生、发展,且PTEN mRNA在癌组织呈低表达,与卵巢癌FIGO分期、淋巴结转移存在相关性。

PTEN基因突变及mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的关系

目的:探究PTEN基因突变及mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的关系。方法:选取2017年5月-2018年5月上皮性卵巢囊肿患者10例、卵巢交界性肿瘤患者18例、卵巢癌患者120例及卵巢正常者10例。全部以PCR-SSCP法进行PTEN外显子5突变检测,比较四组卵巢组织的mRNA表达;分析PTEN基因突变、mRNA表达和卵巢癌病理生物学特征的关系。结果:上皮性卵巢癌患者发现有PTEN外显子5突变;卵巢交界性肿瘤、卵巢癌患者在PTEN基因的mRNA表达上低于上皮性卵巢囊肿与正常卵巢,差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN基因的mRNA表达和卵巢癌病理分期之间为负相关联系,与组织分化程度为正相关联系。结论:PTEN外显子5突变及mRNA下调与卵巢癌的病理生物学行为变化有着较为密切的联系,PTEN基因可以用于反映卵巢癌的病理生物学特征,临床可以借此对卵巢癌进行准确诊断。

PTEN基因mRNA在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌的诊断价值

目的探讨卵巢癌组织中PTEN基因突变情况及PTEN mRNA表达水平,进而评估PTEN mRNA水平对卵巢癌的诊断价值。方法选择2016年1月至2020年2月在温州市中医院进行诊治的卵巢癌患者58例为观察组,选择同期进行治疗的良性上皮性卵巢肿瘤患者71例为对照组。采用实时荧光定量PCR技术测定各组患者病灶组织中PTEN基因外显子突变及PTEN mRNA水平。进而分析卵巢癌患者的PTEN基因突变及不同病理状态下PTEN mRNA表达水平,最终通过绘制ROC曲线,评估PTEN mRNA水平对卵巢癌的诊断效能。结果 58例卵巢癌组织中,共检出35例携带PTEN基因突变,均为外显子5突变,多分布在中分化、低分化癌中。经对比,观察组的PTEN mRNA水平显著低于对照组(t=6.391,P<0.001)。不同年龄分层下,卵巢癌患者的PTEN mRNA水平无显著性差异(t=0.334,P=0.691)。不同分化类型及病理组织类型分层下,卵巢癌患者的PTEN mRNA水平分布具有显著统计学差异(F=7.891、7.998,P<0.001)。临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的卵巢癌患者PTEN mRNA水平显著高于Ⅲ~Ⅳ期患者(t=6.143,P<0.001)。ROC曲线结果显示,PTEN mRNA水平诊断卵巢癌的AUC为0.873(P<0.05),最优截断点的诊断灵敏度和特异度分别为85.71%、71.23%。结论卵巢癌患者常伴有PTEN基因突变,且PTEN mRNA水平可能因分化类型、病理组织类型及临床分期的分布而异,其对卵巢癌的诊断具有重要价值,有望成为卵巢癌新的治疗靶点。

PTEN基因表达与腮腺多形性腺瘤的发生发展的关系

目的分析PTEN基因表达与腮腺多形性腺瘤的发生发展的关系。方法选取本院口腔科收治的腮腺多形性腺瘤25例,同时选取正常腮腺组织20例作为对照,分别采集腮腺多形性腺瘤患者的腺瘤组织、瘤旁0.5 cm^2 cm组织、舌下腺组织,以及正常对照的腮腺组织,比较不同组织中PTEN mRNA及蛋白的表达差异;比较复发组、未复发组和正常腮腺组织中PTEN mRNA及蛋白的表达差异。结果腺瘤组织、瘤旁0.5 cm组织、瘤旁1 cm组织、瘤旁1.5 cm组织中PTEN mRNA表达均低于正常腺体组织和舌下腺组织;腺瘤组织(56.0%)和瘤旁0.5 cm组织(64.0%)中PTEN蛋白表达阳性率均低于正常腺体组织(100.0%)和舌下腺组织(96.0%);复发组腺瘤组织中PTEN mRNA表达(0.413±0.052)均低于正常腺体组织(0.947±0.061)和未复发组腺瘤组织(0.639±0.058);复发组腺瘤组织中PTEN蛋白表达阳性率(27.3%)均低于正常腺体组织(100.0%)和未复发组腺瘤组织(71.4%)(P均<0.05)。结论腮腺多形性腺瘤组织中的PTEN表达低于正常腮腺和舌下腺组织,复发组腺瘤组织中的PTEN表达低于未复发组和正常组。

PTEN在乳腺癌及癌前病变中的表达及意义

目的：探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen,PTEN)在乳腺导管上皮不典型增生（atypicalductalhyperplasia,ADH)、导管内癌（ductalcarcinomainsitu,DCIS)、浸润性导管癌（invaiveductal(^血01皿,1〇三组病变组织中的表达及意义。方法：收集ADH60例、DCIS100例、IDC165例，利用Real-timeRT-PCR检测ADH、DCIS、IDC病变组织中PTEN基因在mRNA水平的表达情况;利用W/tem-Blot方法和免疫组织化学技术检测ADH、DCIS、IDC病变组织中PTEN蛋白的表达情况。结果:Real-timeRT-PCR技术结果显示，ADH组PTENmRNA表达水平最高,DCIS组次之,IDC组最低差异具有统计学意义（=26.661,P<0.05)。Wetern-Blot技术检测PTEN蛋白在ADH、DCIS、IDC三组病变组织中的表达呈逐渐下降趋势,差异具有统计学意义（t=9.355,P<0.05)。免疫组织化学检测PTEN蛋白在ADH、DCIS、IDC三组病变组织中的阳性表达率分别为91.9%、51.2%、36.9%,差异有统计学意义（X=54.734，P<0.05)。分析PTEN蛋白表达水平与乳腺癌患者临床资料的相关性，结果显示其与患者年龄无相关性(P>0.05),而与患者的肿瘤分化程度、临床分级及转移有相关性，且差异有统计学意义（X=15.8,P<0.05)。结论:无论是在蛋白水平还是mRNA水平,PTEN基因的表达从ADH到DCIS再到IDC呈下降趋势，提示PTEN可能参与了乳腺癌发生发展的过程，为日后治疗提供靶点理论依据。

PTEN在心肌肥厚中的作用初探

目的 :观察肿瘤抑制因子PTENmRNA在腹主动脉狭窄大鼠及卡托普利处理的腹主动脉狭窄大鼠左心室肌中的表达 ,以探讨PTEN在心肌肥厚发生发展中的可能作用。方法 :采用腹主动脉狭窄术制备压力超负荷心肌肥厚动物模型 ,于术后 4周应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,分别检测和观察对照组、心肌肥厚组和卡托普利组大鼠左心室PTENmRNA表达的变化。结果 :①与对照组相比 ,心肌肥厚组大鼠左心室肌PTENmRNA表达减少 ;②与心肌肥厚组相比 ,卡托普利组大鼠左心室肌PTENmRNA表达增加 ,接近对照组。结论 :PTEN在心肌肥厚发生发展中可能起负调控作用 ,该作用与肾素

PTEN基因在犬乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义

有关酪氨酸磷酸酶基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen,PTEN)在乳腺肿瘤中的检测在人医早有报道。为了研究PTEN基因在犬乳腺肿瘤组织中的表达情况,笔者运用实时荧光PCR定量检测了38例不同的犬乳腺肿瘤组织(包括15例良性乳腺肿瘤和23例恶性乳腺肿瘤)、4例正常犬乳腺组织。结果发现:PTEN基因在犬恶性乳腺肿瘤组织中表达量明显低于其在良性乳腺肿瘤和正常乳腺组织中的表达量,两者差异极显著(P<0.001);PTEN在良性乳腺肿瘤组织中的表达与正常犬乳腺组织相比,差异不显著(P>0.05);发生了淋巴结转移的乳腺癌PTEN基因的表达量与未发生转移的乳腺癌组织的表达量间差异亦不显著(P>0.05),且PTEN的表达量与肿瘤组织的大小和发病动物年龄无关。结论:PTEN蛋白表达异常可能与乳腺肿瘤发生、发展相关,可考虑作为判断犬乳腺肿瘤生物学行为和预测的指标。

食管癌组织中PTEN基因启动子区高甲基化的临床特征

目的探讨PTEN基因的甲基化状态与食管癌发生、发展的关系,以及PTEN基因的甲基化与其mRNA表达的关系。方法首先采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)方法,检测94例食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者PTEN基因启动子区的甲基化状态,分析其与食管癌发病、淋巴结转移、浸润深度及临床病理分期的关系。其次应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法检测PTEN基因mRNA表达情况,分析PTEN基因甲基化状态与其基因mRNA表达的关系。结果食管癌组织中,PTEN基因的甲基化发生率为45.7%(43/94),而相应的病变周围的正常食管组织中甲基化频率为11.7%(11/94),PTEN基因的甲基化在食管癌组织中显著高于食管正常组织(P=0.00);食管癌中,淋巴结转移阳性组PTEN基因甲基化频率为62.9%(22/35),显著性高于阴性组(35.6%,21/59)(P=0.01);浸润深度T1+T2组和T3+T4组PTEN基因甲基化频率以及临床病理分期Ⅰ+Ⅱ期组和Ⅲ+Ⅳ期组PTEN基因甲基化频率差异均无统计学意义(P=0.23和P=0.14)。PTEN mRNA表达阴性的肿瘤组织中,74.2%(23/31)发生了PTEN基因的甲基化,PTEN基因mRNA阴性表达与其甲基化状态有显著的相关性(Phi=-0.40,P=0.00)。结论食管癌组织中PTEN基因的甲基化高频率与食管癌的发生和淋巴结转移密切相关;此外,PTEN基因甲基化是引起其mRNA阴性表达(失表达)的重要原因。

白血病细胞PTEN表达与AKT磷酸化水平相关性研究

本研究探讨各型白血病pten mRNA及蛋白表达与AKT磷酸化水平的关系及其在白血病发病中的作用,为今后PI3K/AKT通路抑制剂的使用提供依据。128例初发的白血病患者纳入研究,其中AML 61例,ALL 27例,CML24例,CLL16例。正常对照21例。采用RT-PCR和Western blot分别检测Jurkat细胞株、白血病患者骨髓单个核细胞pten mRNA表达,PTEN蛋白及P-AKT蛋白的表达。结果表明:Jurkat细胞株pten mRNA表达和PTEN蛋白表达水平均较正常对照组低。AML组pten mRNA表达量虽低于正常对照组,但差异无统计学意义(p=0.274);ALL、CML、CLL各组患者pten mRNA表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。AML、ALL、CML、CLL各组PTEN蛋白表达量均低于正常对照组,P-AKT蛋白表达量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:PTEN的低表达及P-AKT高表达在白血病的发生中可能有重要的作用,PTEN的失活主要发生在蛋白质翻译水平。