靶向调控PTEN和PI3K对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨靶向调控张力蛋白同源物(PTEN)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法选取15例肾母细胞瘤患儿的术后肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫印迹实验及实时荧光定量PCR方法检测组织中PTEN和PI3K蛋白及mRNA的表达水平;将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组(A组,转染NC siRNA及Flag空载体)、PTEN过表达组(B组,转染NC siRNA及Flag-PTEN表达载体)、PI3K敲低组(C组,转染siPI3K及Flag空载体)、联合靶向组(D组,转染siPI3K及Flag-PTEN)。采用免疫印迹实验检测各组转染24 h后SK-NEP-1细胞中PI3K、蛋白激酶A(AKT)及磷酸化蛋白激酶A(p-AKT)的表达水平;采用CCK-8实验检测干预第24、48、72小时时SK-NEP-1细胞增殖情况;采用流式细胞术分析各组SK-NEP-1细胞转染24 h后细胞凋亡率及细胞周期。结果与癌旁正常组织相比,肾母细胞瘤肿瘤组织中PI3K蛋白及mRNA表达水平均显著升高(t=22.862、7.098,P<0.05),PTEN蛋白及mRNA表达水平均显著降低(t=25.634、8.379,P<0.05);体外细胞实验结果显示,B、C、D组SK-NEP-1细胞中p-AKT蛋白水平明显低于A组(t=8.386~11.900,P<0.05);CCK-8实验显示,干预第48、72小时时,B、C、D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于A组(t=5.163~8.647,P<0.05),干预第72小时时,D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于B、C组(t=3.982、4.021,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于A组(t=4.673~9.563,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显高于B、C组(t=5.829~8.075,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于A组(t=7.518~14.747,P<0.05),S期细胞比例明显低于A组(t=8.029~13.451,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于B、C组(t=9.930、9.732,P<0.05),S期细胞比例明显低于B、C组(t=10.281、9.927,P<0.05)。结论相比于单一靶向PTEN或PI3K,联合靶向调控PTEN和PI3K可更显著抑制肾母细胞瘤细胞生长,促进肾母细胞瘤细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路、阻断细胞周期有关。

PTEN磷酸酶活性对乳腺癌细胞ZR-75-1迁移能力的影响

目的:探求PTEN蛋白的磷酸酶活性对乳腺癌细胞ZR-75-1转移能力的影响。方法:采用脂质体介导法分别将野生型PTEN质粒(wt-PTEN)、磷酸酶失活的PTEN质粒(G129R-PTEN)和只具有蛋白磷酸酶活性的PTEN质粒(G129E-PTEN)转染PTEN基因缺失的人乳腺癌细胞株ZR-75-1,Western印迹法检测PTEN蛋白及P397-FAK的表达水平,体外细胞划痕实验观察PTEN磷酸酶活性对ZR-75-1细胞迁移能力的影响,细胞基质黏附试验和人工重组基底膜侵袭试验测定PTEN质粒转染和未转染的ZR-75-1细胞的黏附抑制率和侵袭抑制率,免疫组化法检测MMP-2的水平。结果:wt-PTEN、G129R-PTEN及G129E-PTEN3种质粒均成功转染ZR-75-1细胞并有PTEN蛋白的表达,其中wt-PTEN、G129E-PTEN均能抑制ZR-75-1细胞迁移;wt-PTEN和G129E-PTEN转染细胞之间的黏附抑制率和侵袭抑制率或侵袭细胞相对数均无显著性差异,但与G129R-PTEN转染的和未经转染的ZR-75-1细胞相比有显著性差异(P<0.01)。wt-PTEN和G129E-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞其P397-FAK水平均显著低于G129R-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞;wt-PTEN与G129E-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞MMP-2水平对比于G129R-PTEN质粒转染的和未经质粒转染的ZR-75-1细胞有显著性差异(P<0.01)。结论:具有双特异磷酸酶活性的野生型PTEN基因和只具蛋白磷酸酶活性的PTEN基因均能抑制乳腺癌细胞ZR-75-1的迁移,而磷酸酶失活的PTEN基因则无此作用。

10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因通过炎症参与心肌重构的研究进展

心肌重构是心脏遭受损伤,如压力负荷、缺血、容量负荷等出现的一系列结构和功能变化,在组织水平可表现为心肌肥厚、心肌纤维化,在细胞水平可表现为心肌细胞肥大、心肌成纤维细胞增殖和转分化、心肌炎性细胞浸润。心肌重构合并心功能不全患者5年内病死率约为50%,死亡原因大多归于心肌重构或心力衰竭[1]。因此,对于心肌重构相关机制的基础研究仍是研究热点和难点。研究认为,炎症与病理性心肌重构密切相关[2]。Ridker等[3]研究证实,使用白细胞介素(interleukin,IL)-1β阻断剂可降低冠心病患者因心力衰竭住院的比例。另外,促炎性消退介质减少中性粒细胞浸润,降低T细胞产生的促炎细胞因子TNF-α、IL-6水平,激活修复细胞因子IL-10,并刺激巨噬细胞的吞噬活性。

子宫内膜癌中p-AKT与PTEN、P53、HER-2表达的相关性及意义

目的:探讨磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、磷酸酶与张力蛋白同源物(phos-phatase and tensin homolog,PTEN)、P53、人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)在子宫内膜癌组织中的表达变化特点、相关性及意义。方法:免疫组织化学法检测p-AKT及PTEN、P53、HER-2、Ki67在95例内膜癌组织中的表达并与临床病理特点及预后相对照。结果:(1)本组95例子宫内膜癌p-AKT阳性率为53.7%(51/95),Ⅰ型癌(53.6%)与Ⅱ型癌(54.5%)的表达率近似;p-AKT阳性与阴性组间预后差异无统计学意义(P=0.757)。(2)PTEN失表达率为56.8%(54/95),在Ⅰ型癌(60.7%,51/84)与Ⅱ型癌(27.3%,3/11)差异具有统计学意义(P=0.035);PTEN失表达组的预后显著优于正常表达组(P=0.015)。(3)p-AKT与PTEN表达无显著相关性(P=0.265),但分组分析显示p-AKT阳性时,PTEN失表达组与正常组间的预后差异失去统计学意义(P=0.148),而p-AKT阴性时,PTEN失表达组生存期较PTEN正常表达组长(P=0.055)。同时,p-AKT阳性与PTEN失表达对肿瘤增殖活性可能有协同促进作用:PTEN+/p-AKT+时的Ki67阳性率最高(40.0%),PTEN-/p-AKT-时的Ki67阳性率最低(8.7%),差异有统计学意义(P=0.015)。(4)p-AKT表达与P53、HER-2阳性亦未见相关性(P>0.05),Ⅱ型癌P53、HER-2阳性表达(100.0%,45.5%)显著高于Ⅰ型癌(42.9%,6.0%)(P<0.05),阳性者预后差,且两者表达正相关(r=0.209,P=0.041)。结论:p-AKT在两型内膜癌中均有较高比例的活化,p-AKT阳性表达可能削弱PTEN失表达对内膜癌生物学行为相对善良的提示作用,p-AKT+与PTEN+对肿瘤增殖活性可能有协同促进作用;p-AKT活化与Ⅰ、Ⅱ型内膜癌常见的分子异常(PTEN失表达、P53和HER-2表达)均无相关性,可能更多取决于其他因素的调节。以p-AKT为靶点的生物治疗在进展期内膜癌中的治疗价值值得进一步深入研究。

PTEN基因逆转白血病多因素多药耐药机制探讨

目的研究分析野生型PTEN基因对多柔比星(阿霉素,ADM)耐药人红白血病细胞系K562/ADM多药耐药(MDR)逆转的作用机制。方法将携带野生型PTEN基因的腺病毒载体(Ad-PTEN-GFP)或空载体(Ad-GFP)感染ADM耐药的K562/ADM细胞,流式细胞术检测感染效率,在感染3 d内联合应用不同浓度的ADM、阿糖胞苷(Ara-C)或三氧化二砷(As2O3),通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,根据IC50计算药物逆转倍数,观察PTEN基因对上述化疗药物MDR逆转作用。同时采用荧光定量PCR检测PTEN、NF-κB、MDR1、MDR相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xL及Bax水平变化,蛋白质印迹检测PTEN、Akt、p-Akt、P65水平变化。结果以感染复数为200感染第3天后,Ad-PTEN-GFP感染与化疗药物联合作用组K562/ADM细胞增殖抑制率、凋亡率均高于Ad-GFP与化疗药物联合作用组(P<0.05),PTEN感染能增加K562/ADM对ADM、Ara-C、As2O3的敏感性,逆转倍数分别为3.80、2.65、2.64。与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP感染K562/ADM细胞3 d后p-Akt与P65蛋白表达下调,NF-κB、MDR1、Bcl-2、Bcl-xLmRNA表达下调,Bax mRNA表达上调。结论野生型PTEN基因可能通过抑制Akt信号转导通路进一步调控下游信号分子,通过下调NF-κB、MDR1、Bcl-2及上调Bax等多种信号分子逆转K562/ADM细胞的多药耐药。

黄芪多糖对基底细胞样乳腺癌细胞增殖和Akt磷酸化的影响

目的:观察黄芪多糖对基底细胞样乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞增殖和Akt蛋白磷酸化的影响。方法:用不同浓度的黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)干预MDA-MB-468细胞,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS干预对MDA-MB-468细胞增殖的量效和时效关系。用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞株1、2、4和7d后对磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)(Thr308)和p-Akt(Ser473)蛋白表达水平的影响,以及p53/鼠双微体2(murine double minute 2,MDM2)信号转导通路中的关键靶点p53、MDM2和人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白表达水平的影响。用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默PTEN的表达,用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞2d对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)蛋白表达水平的影响。结果:1和0.5mg/mL的APS对MDA-MB-468细胞的增殖有明显的抑制作用。1和0.5mg/mL的APS干预1、2、4和7d后能下调p-Akt(Thr308)的表达;干预1和2d后下调p-Akt(Ser473)的表达,上调MDM2蛋白的表达;干预7d后上调p53和PTEN蛋白的表达。PTEN沉默后,APS在干预2d后对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的表达没有影响,细胞增殖的抑制率低于PTEN未沉默时。结论:APS能抑制MDA-MB-468细胞的增殖,下调MDA-MB-468细胞Akt磷酸化的水平,其抑制MDA-MB-468细胞增殖的机制可能与通过对p53/MDM2正负反馈环的调节从而上调p53和PTEN蛋白的表达有关。

PTEN基因功能及其调控研究进展

肿瘤的发生是一种复杂的生物学过程，癌基因激活和抑癌基因失活是肿瘤发生发展的基础。1997年不同的研究小组分别用不同的方法发现了抑癌基因PTEN （gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten）[1-2]，该基因是继p53基因后，另一种与多种系统肿瘤的发生有密切关系的基因[3-5]，被认为是未来基因治疗的潜在途径，自发现以来一直是国内外研究的热点。近年来研究发现，PTEN基因的功能不仅局限于抑癌作用；针对该基因及蛋白的基因型和非基因型调控研究，亦有更深入的发现。本文现对PTEN基因功能及其调控的研究进展作一综述。

PTEN基因沉默骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死

背景:骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死是近年来的研究热点,但是心肌梗死区域的缺血缺氧微环境和早期炎症反应不利于移植细胞的存活,影响治疗效果。目的:探讨PTEN基因沉默骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的效果。方法:(1)SD大鼠骨髓间充质干细胞随机分为3组,空白对照组不进行任何处理,阴性对照组用Lipofectamin2000转染无意义的NCsiR NA,RNAi组用Lipofectamin2000转染PTEN基因特异的siR NA。采用MTT法描绘细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期;(2)取30只SD大鼠建立心肌梗死模型,随机分为3组,每组10只,分别为空白对照组、阴性对照组、RNAi组。建模6 h后,使用微量注射器和立体定位仪在左心室前壁梗死区中心注射相应的骨髓间充质干细胞,治疗后4周进行超声心功能检测,采用荧光显微镜观察细胞的存活和增殖情况。结果与结论:(1)RNAi组骨髓间充质干细胞在培养各时间点的吸光度值均显著大于空白对照组和阴性对照组;(2)RNAi组S+G2期细胞占总数的比例显著大于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);(3)RNAi组大鼠心肌组织中骨髓间充质细胞数量显著多于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);(4)治疗4周,RNAi组的左心室射血分数、左心室短轴缩短率显著小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);(5)体外实验表明PTEN基因沉默能有效地促进骨髓间充质干细胞的增殖,抑制细胞凋亡;(6)体内实验表明PTEN基因沉默的骨髓间充质干细胞在心肌梗死区域更易存活和扩增,心功能改善明显。

不稳定性心绞痛患者介入治疗围术期CD4 T淋巴细胞磷酸酶基因表达的变化

目的：探讨不稳定性心绞痛患者PCI围术期CD4 T淋巴细胞张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN ）表达的变化。方法连续入选拟行择期PCI的不稳定性心绞痛患者42例，分别于PCI术前、术后16～24 h抽取新鲜外周血20 ml ，免疫磁珠法分选出CD4 T淋巴细胞，荧光定量PCR检测PTEN mRNA表达，蛋白免疫印迹法检测PTEN蛋白表达，酶联免疫吸附法检测 TNF-α及白细胞介素10（IL-10）炎性相关因子的表达。结果与PCI术前比较，PCI术后患者肌钙蛋白I高于正常高值的发生率为45．4％；与PCI术前比较，PCI术后血浆TNF-α水平明显升高，PTEN mRNA、PTEN蛋白和IL-10明显下降，差异有统计学意义（P＜0．05，P＜0．01）。直线相关分析显示，PTEN蛋白与TNF-α呈负相关（r＝-0．874，P＜0．01），与IL-10呈正相关（r＝0．732，P＜0.05）。结论PCI术可能通过下调PT EN的表达，促进相关炎性因子的分泌，从而诱发心肌炎症损伤。

miR-17-5p通过靶定PTEN调节结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的研究

目的探讨miR-17-5p对结肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,以及miR-17-5p靶基因的确定及功能。方法实时定量聚合酶链反应(PCR)检测结肠癌组织和癌旁组织中miR-17-5p的表达情况。将miR-17-5p类似物(mimics)和miR-17-5p反义寡核苷酸(ASO)以及对照质粒分别转染SW620和SW480细胞系,通过噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成能力检测细胞的增殖能力,利用Transwell小室检测细胞的体外侵袭和迁移能力。利用生物信息学预测miR-17-5p的靶基因,并应用荧光报告载体,实时定量PCR和Western blot方法对靶基因进行验证。最后将靶基因的过表达质粒pc DNA3/PTEN转染细胞,检测细胞的增殖、体外侵袭和迁移能力。结果与癌旁组织相比,miR-17-5p在癌组织中表达增高(P<0.01);转染miR-17-5p后,SW620和SW480细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力与对照组相比显著增强(P<0.01),ASO封闭miR-17-5p表达后,SW620和SW480细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力下降(P<0.01)。过表达miR-17-5p可以抑制含miR-17-5p结合位点荧光报告载体的强度(P<0.01),将结合位点突变后抑制作用则显著减弱。过表达miR-17-5p可以同时在mRNA和蛋白水平上抑制PTEN的表达(P<0.01),而用ASO封闭miR-17-5p的表达后PTEN的表达则升高(P<0.01)。细胞转染过表达PTEN的质粒后,SW480和SW620细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力减弱(P<0.01)。结论 PTEN是miR-17-5p的直接靶基因,miR-17-5p通过抑制PTEN的表达而促进结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

中国甲状腺癌患者PTEN蛋白表达及其意义的Meta分析

目的综合分析中国甲状腺癌患者第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)蛋白表达及其意义。方法通过检索中国期刊全文数据库、万方数据库、维普数据库及PubMed,收集2002年5月至2012年5月发表的关于"PTEN蛋白在中国甲状腺癌患者中表达"的研究资料,采用Meta分析对这些文献进行汇总、归纳和统计学分析。结果 10篇文献(971例患者)符合入选标准,556例甲状腺癌患者中PTEN蛋白阳性表达263例,正常甲状腺或甲状腺良性病变对照组415病例中PTEN蛋白阳性表达382例,优势比为0.08,95%CI=0.06～0.12(P<0.01)。结论 Meta分析显示在中国甲状腺癌患者中,PTEN蛋白表达低于在正常甲状腺或甲状腺良性病变中。PTEN低表达可能在甲状腺癌的发生、发展、转移及预后中起重要作用,这对于甲状腺癌的早期诊断、治疗和预防具有参考意义。

Paxillin、FAK和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

背景:研究表明Paxillin、黏着斑激酶(FAK)和PTEN在许多肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中发挥重要作用,但联合检测三者在胃癌中表达的报道罕见。目的:研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN的表达及其临床意义。方法:以免疫组化SP法分别检测40例正常胃黏膜组织和88例胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系以及Paxillin与PTEN表达之间的相关性。结果:与正常胃黏膜组织相比,胃腺癌组织Paxillin(65.9%对32.5%,P<0.05)、FAK(56.8%对17.5%,P<0.05)阳性表达率显著增高,PTEN阳性表达率显著降低(47.7%对100%,P<0.05)。Paxillin、FAK和PTEN表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),与性别和年龄无关。胃腺癌组织中Paxillin表达与PTEN表达呈显著负相关(r=-0.369,P<0.05)。结论:Paxillin、FAK高表达和PTEN低表达可能与胃腺癌的浸润、淋巴结转移等恶性生物学行为相关,联合检测三者可能有助于判断胃腺癌恶性程度和患者预后。

PTEN基因在食管癌中的研究进展

我国是食管癌的高发地区之一。由于诊治的食管癌患者多数属于中晚期,预后较差。从食管癌发生和发展的分子机制入手探索新的治疗靶点和途径,对食管癌的治疗具有重要的意义。人类第十号染色体缺失与磷酸酶和张力蛋白同源基因(gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)是首个被发现的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,与一些恶性肿瘤的发生、发展、生物学行为和预后有密切关系。目前对PTEN基因在食管癌组织中的突变、表达变化及作用机制存在争议,本文就PTEN基因在食管癌发生和发展中的分子机制相关的最新研究作一综述。

15-脱氧前列腺素J2和PTEN质粒体外转染对乳腺癌MCF-7细胞株生长的抑制作用

目的探讨15d-PGJ2和PTEN质粒转染对体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7的抑制作用。方法MCF-7细胞接种96孔板,按2×2析因设计设置4个试验组。转染组用脂质体转染法将pcDNA3.0-PTEN质粒1μg转染MCF-7细胞;联合组给予pcDNA3.0-PTEN转染和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ天然激动剂15d-PGJ2 40μmol/L;干预组15d-PGJ2 40μmol/L处理细胞;对照组常规培养的MCF-7细胞不做任何处理。采用MTT法观察15d-PGJ2和质粒转染对MCF-7细胞的生长抑制作用;用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果MTT法检测细胞吸光度(A)值结果显示,与对照组相比,转染组、干预组均能有效地抑制MCF-7细胞生长。在48、72、96h时点,联用组的效果较其他两组的抑制作用更明显(P<0.05)。对照组细胞在各时间点均未显示出生长抑制;24h时点转染组、联合组、干预组的细胞抑制率分别为2%、0%、0%;在48h时点分别为28%、39%、26%;在72h时点分别为74%、84%、70%;在96h时点分别为85%、89%、80%。细胞周期检测结果显示,与对照组比较,转染组对G0、G1期细胞的阻滞作用较强(P<0.05),干预组作用较弱(P<0.05)。联合组的G0、G1期阻滞效应较转染组弱(P<0.05),但较干预组强(P<0.05)。细胞凋亡检测显示,与对照组相比,转染组、干预组和联合组均不能有效地诱导MCF-7细胞凋亡(P<0.05)。结论PTEN基因转染和靶向药物15d-PGJ2联合作用于体外培养的乳腺癌细胞株MCF-7,能有效抑制细胞生长,但并不诱导细胞凋亡。

乳腺癌超声表现与Cox-2、Survivin、PTEN表达的相关性

目的探索乳腺癌的超声声像表现与Cox-2、Survivin、PTEN基因蛋白表达之间的相关性。方法收集62例乳腺癌患者病例,手术前进行高频超声,彩色多普勒血流显像(CDFI)检查,术后使用免疫组化方法检测肿瘤标本中Cox-2、Survivin、PTEN基因蛋白的表达。分析超声表现与各基因蛋白表达之间的关系。结果超声表现"毛刺征"与Survivin表达相关;腋淋巴结肿大与Cox-2、Survivin、PTEN表达相关;CDFI血流信号丰富与Survivin、Cox-2阳性表达相关;PD表现高流速与Survivin、Cox-2阳性表达相关(P均<0.05);而肿瘤大小、"衰减征"、"钙化征"等与Cox-2、Survivin、PTEN基因蛋白表达无明显相关性(P>0.05)。结论乳腺癌的部分声像特征与基因蛋白表达存在相关性。

PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

背景:脊髓损伤后脊髓自身的修复和再生能力有限,细胞移植治疗脊髓损伤具有很强的临床应用价值和前景。目的:探讨PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,以期为组织工程提供更优良的种子细胞。方法:采用脂质体法转染PTEN基因特异的si RNA沉默PTEN基因,RT-PCR检测PTEN基因的表达,通过细胞生长曲线、细胞周期、Transwell实验观察PTEN基因修饰后细胞生物学特性的变化。结果与结论:PTEN基因在骨髓间充质干细胞中高表达并且siR NA成功干扰了PTEN基因的表达,PTEN基因沉默后的细胞具有更强的存活、增殖、迁移能力,更适合作为组织工程的种子细胞。

塞来昔布对人结肠癌细胞株HT-29MIF、PTEN和Caspase-3表达的影响

背景：塞来昔布为环氧合酶．2（COX-2）选择性抑制剂，近年研究发现其具有抗肿瘤作用。目的：观察塞来昔布对人结肠癌细胞株HT-29巨噬细胞游走抑制因子（MIF）、抑癌基因蛋白PFEN和凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响，探讨其防治结肠癌可能的分子机制。方法：25、50、100μmol／L塞来昔布分别作用于HT-29细胞24h后，以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HT-29细胞MIFmRNA表达，蛋白质印迹法检测MIF、PTEN、Caspase-3蛋白表达。结果：经25～100μmol/L塞来昔布处理后，HT-29细胞MIFmRNA和蛋白表达随塞来昔布浓度的增加而减低，PTEN和Caspase-3蛋白表达随塞来昔布浓度的增加而增加，与正常对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：塞来昔布的抗结肠癌作用可能与下凋MIF表达和上调PTEN、Caspase-3表达有关。

PTEN和Cdx2在溃疡性结肠炎和结直肠癌中的表达

背景:PTEN具有磷酸酶活性,能调控细胞的增殖、迁移和凋亡。Cdx2是一种肠道特异性转录因子,在调节肠上皮细胞分化、增殖中起关键作用。近年溃疡性结肠炎(UC)与结直肠癌之间的关系日益受到关注。目的:观察UC和结直肠癌组织中PTEN和Cdx2的表达,探讨两者在UC癌变进程中的作用。方法:在上海瑞金医院1997年1月～2007年10月诊断的UC患者中收集经病理检查确诊者的蜡块标本,其中UC组17例,UC相关结直肠癌组7例,另收集非UC相关结直肠癌标本35例和正常肠黏膜标本15例,以免疫组化方法检测PTEN和Cdx2表达。结果:PTEN和Cdx2在正常结直肠组织中基本呈阳性表达,阳性率分别为93.3%和100%,UC组织两者表达阳性率显著降低,均仅为6.7%。UC相关结直肠癌组PTEN和Cdx2表达阳性率显著低于非UC相关结直肠癌组(PTEN:28.6%对83.9%,Cdx2:42.9%对90.3%,P<0.01)。结论:UC与结直肠癌之间可能存在相关性。PTEN和Cdx2在调控肠上皮分化、增殖的过程中可能有相似的调节点或具有协同作用,两者可能共同参与了对UC癌变进程的调控。

PTEN与女性生殖

近年来研究发现,抑癌基因Pten及其编码的PTEN蛋白可能通过磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)等通路调控细胞的生长、分化及凋亡。在女性生殖系统中,PTEN通过PTEN-PI3K-3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)信号网络,不但控制原始卵泡的生存和激活、颗粒细胞的增殖和分化,影响卵泡的发育、生殖衰老的过程和生殖时间的长短,而且调控子宫内膜的增殖及早期胚胎的着床和发育。

PTEN蛋白与神经系统损伤相关性的研究进展

第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（phosphatase and tensin homology deleted on chro—mosometen，PTEN）被认为是继p53以后最重要的抑癌基因，由其表达的PTEN蛋白兼具脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的双重特性，参与细胞内外多条信号通路的转导，并调控细胞周期和生理功能。PTEN基因各种类型的突变、丢失和甲基化与包括神经胶质细胞瘤、前列腺癌、黑色素瘤等肿瘤的发生密切相关。而近来的研究发现，脑、脊髓或外周神经损伤后，PTEN蛋白的表达与神经元凋亡、轴突再生密切相关，对其机制的深入研究可能会为神经损伤修复提供新的靶点。